Etablierung eines Koloproktitis-Krebsmodells bei Mäusen und Bewertung der therapeutischen Wirkung der chinesischen Medizin

Zusammenfassung

Dieses Protokoll bietet ein Mausmodell für ulzerativen Koloproktitis-assoziierten Darmkrebs, der durch Azomethan in Kombination mit Dextransulfat-Natrium induziert wird. Das Modell wurde verwendet, um die Wirksamkeit von Verbindungen der traditionellen chinesischen Medizin bei der Prävention und Behandlung von Darmkrebs zu bewerten.

Zusammenfassung

Darmkrebs (CRC) ist eine häufige bösartige Erkrankung des Verdauungssystems und hat sich zur dritthäufigsten bösartigen Erkrankung weltweit und zur zweithäufigsten Ursache für malignitätsbedingte Todesfälle entwickelt. Die ulzerative Koloproktitis (UC) ist eine präkanzeröse Läsion, und UC-assoziiertes CRC (UC-CRC) ist der häufigste Subtyp von CRC. Daher ist ein vernünftiges UC-CRC-Modell der Eckpfeiler und Garant für die Entwicklung neuer Medikamente. Die Traditionelle Chinesische Medizin (TCM) ist aufgrund ihrer guten Wirksamkeit bei der Behandlung von UC-CRC weit verbreitet. Als klassisches Tonikum der TCM ist die Liujunzi-Abkochung (LJZD) bei der Behandlung von UC-CRC weit verbreitet. In dieser Studie wurde ein UC-CRC-Modell durch Kombination von Azomethan und Dextransulfat-Natrium etabliert und das LJZD verabreicht. Die Daten bestätigten, dass LJZD den Krebsübergang bei UC-CRC wirksam hemmen kann, indem es das Körpergewicht der Maus, die kolorektale Länge, pathologische und entzündliche Faktoren, die kolorektale Barrierefunktion und Krebsmarker verwendet. Dieses Protokoll bietet ein System zur Bewertung der Wirksamkeit von TCM bei der Prävention und Behandlung von UC-CRC.

Einleitung

Darmkrebs (CRC) ist eine häufige gastrointestinale Malignität, die dritthäufigste Malignität und die zweithäufigste Todesursache der Welt, die 10 % der weltweiten Krebsinzidenz und 9,4 % der gesamten krebsbedingten Todesfälle ausmacht ^1,2. Genetische Faktoren, chronische Entzündungen, fettreiche Ernährung, Diabetes und eine abnormale Darmflora sind Risikofaktoren für den Darmkrebs ^3,4. Unter ihnen ist eine entzündliche Darmerkrankung, insbesondere die Cololoproktitis ulcerosa (UC), ein klarer Risikofaktor für den Darmkrebs ^....

Protokoll

Das Tierverfahren wurde von der Ethikkommission der Changchun University of Chinese Medicine genehmigt (Aktenzeichen: 2021214). Spezifische pathogenfreie C57BL/6J-Mäuse (8-10 Wochen, Gewicht 18-22 g), männlich und weiblich, wurden in unabhängig belüfteten Käfigen bei 22 °C und 65% relativer Luftfeuchtigkeit untergebracht. Die Mäuse begannen das Experiment nach 7 Tagen adaptiver Fütterung, während der sie freien Zugang zu Wasser und Nahrung hatten.

1. Arzneimittelvorbereitung

1. Vorbereitung von LJZD
   HINWEIS: Das verwendete chinesische Arzneimittel wurde vom angeschlossenen Krankenhaus der Changchun University of C....

Diskussion

Darmkrebs ist eine der häufigsten Krebsarten weltweit, mit etwa 1.148.000 neuen Fällen und mehr als 576.000 Todesfällen pro Jahr. CRC kann nach unterschiedlichen Ursachen in drei Typen unterteilt werden, darunter erbliche, sporadische und UC-CRC³¹. Die Inzidenz von Darmkrebs bei Patienten mit entzündlichen Darmerkrankungen wie UC ist deutlich höher als in der Allgemeinbevölkerung. UC stimuliert die Entwicklung von Darmkrebs über den entzündlichen Krebsweg, der sich vom typischen Adenom-Ade.......

Materialien

Name	Company	Catalog Number	Comments
Azoxymethane	Sigma	A5486
5-amino salicylic acid	Kuihua Pharmaceuticals Group Jiamusi Luling Pharmaceutical Co., Ltd	3819413
C57BL/6J mice	Liaoning Changsheng Biotechnology Co., Ltd	NO 210726210100853716
Cover slip	Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd	10212432C
DAB color development kit	Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd	2005289
Dewatering machine	Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd	JJ-12J
Dextran sulfate sodium	Dalian Meilun Biotechnology Co., Ltd	MB5535
Embedding machine	Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd	JB-P5
Hematoxylin-eosin dye	Wuhan Hundred Degree Biotechnology Co., Ltd	B1000
IL-6	Jiangsu Meimian Industrial Co., Ltd	MM-0163M2
Isoflurane	RWD Life Science Co., Ltd	R510-22-10
KI67 primary antibody	Google Biotechnology Inc	GB121141
Neutral gum	Wuhan Hundred Degree Biotechnology Co., Ltd	10004160
Object slide	Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd	10212432A
Occludin primary antibody	Affnity	DF7504
Orthostatic optical microscope	Nikon	Nikon Eclipse CI
Pathological microtome	Shanghai Leica Instrument Co., Ltd	RM2016
ZO-1 primary antibody	Abcam	ab221547