Создание модели рака колопроктита у мышей и оценка терапевтического эффекта китайской медицины

Резюме

Этот протокол представляет собой мышиную модель язвенного колоректального рака, ассоциированного с колопроктитом, индуцированного азометаном в сочетании с декстрана сульфатом натрия. Модель была использована для оценки эффективности соединений традиционной китайской медицины в профилактике и лечении колоректального рака.

Аннотация

Колоректальный рак (КРР) является распространенным злокачественным новообразованием пищеварительной системы и стал третьим по распространенности злокачественным новообразованием во всем мире и второй по значимости причиной смерти, связанной со злокачественными новообразованиями. Язвенный колопроктит (ЯК) является предраковым поражением, а ЯК-ассоциированный КРР (UC-CRC) является наиболее распространенным подтипом КРР. Таким образом, разумная модель ЯК-КРР является краеугольным камнем и гарантией разработки новых лекарственных препаратов. Традиционная китайская медицина (ТКМ) широко используется в лечении ЯК-КРР благодаря своей хорошей эффективности. В качестве классического тонизирующего средства ТКМ отвар Люцзюньцзы (LJZD) широко используется при лечении ЯК-КРР. В этом исследовании была создана модель UC-CRC путем сочетания азометана и декстрана сульфата натрия, и был введен LJZD. Полученные данные подтвердили, что LJZD может эффективно ингибировать переход рака при ЯК-КРР с помощью массы тела мыши, длины колоректальной кишки, патологических и воспалительных факторов, функции колоректального барьера и онкомаркеров. Данный протокол представляет собой систему оценки эффективности ТКМ в профилактике и лечении ЯК-КРР.

Введение

Колоректальный рак (КРР) является распространенным злокачественным новообразованием желудочно-кишечного тракта, третьим по распространенности злокачественным новообразованием и второй по распространенности причиной смерти в мире, на его долю приходится 10% глобальной заболеваемости раком и 9,4% от общего^{числа смертей,} связанных с раком1,2. Генетические факторы, хроническое воспаление, диета с высоким содержанием жиров, диабет и аномальная кишечная флора являются факторами риска развития КРР ^3,4. Среди них воспалительные заболевания кишечника, особенно ....

протокол

Процедура на животных была одобрена Комитетом по этике Чанчуньского университета китайской медицины (регистрационный номер: 2021214). Специфические мыши C57BL/6J (8-10 недель, масса 18-22 г), самцы и самки, содержались в независимо вентилируемых клетках при температуре 22 °C и относительной влажности воздуха 65%. Мыши начинали эксперимент после 7 дней адаптивного кормления, во время которого у них был свободный доступ к воде и рациону.

1. Приготовление препарата

1. Подготовка LJZD
   ПРИМЕЧАНИЕ: Используемое китайское лекарство было приобретено в Филиале больницы Чанчуньского университета китайской медицины и было ид....

Результаты

Отвар ЛЖЗД готовили в соответствии с соотношением составов препаратов в таблице 1 и методом отваривания ТКМ на рисунке 1А. В соответствии с временным моментом, указанным на рисунке 1B, мышам внутрибрюшинно вводили 1 мг/мл АОМ на^7-й день, и мыш?.......

Обсуждение

КРР является одним из самых распространенных видов рака во всем мире, ежегодно регистрируется около 1 148 000 новых случаев заболевания и более 576 000 смертей. КРР можно разделить на три типа в зависимости от различных причин, включая наследственный, спорадический и ЯК-КРР³¹. Част.......

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
Azoxymethane	Sigma	A5486
5-amino salicylic acid	Kuihua Pharmaceuticals Group Jiamusi Luling Pharmaceutical Co., Ltd	3819413
C57BL/6J mice	Liaoning Changsheng Biotechnology Co., Ltd	NO 210726210100853716
Cover slip	Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd	10212432C
DAB color development kit	Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd	2005289
Dewatering machine	Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd	JJ-12J
Dextran sulfate sodium	Dalian Meilun Biotechnology Co., Ltd	MB5535
Embedding machine	Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd	JB-P5
Hematoxylin-eosin dye	Wuhan Hundred Degree Biotechnology Co., Ltd	B1000
IL-6	Jiangsu Meimian Industrial Co., Ltd	MM-0163M2
Isoflurane	RWD Life Science Co., Ltd	R510-22-10
KI67 primary antibody	Google Biotechnology Inc	GB121141
Neutral gum	Wuhan Hundred Degree Biotechnology Co., Ltd	10004160
Object slide	Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd	10212432A
Occludin primary antibody	Affnity	DF7504
Orthostatic optical microscope	Nikon	Nikon Eclipse CI
Pathological microtome	Shanghai Leica Instrument Co., Ltd	RM2016
ZO-1 primary antibody	Abcam	ab221547