Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

قمنا بالتحقيق في الأنسجة العضلية الهيكلية في Bos indicus والثيران المهجنة لشرح الاختلافات في سمات جودة اللحوم. وجد أن قوة القص وارنر براتزلر (WBSF) تتراوح من 4.7 كجم إلى 4.2 كجم. كشفت الأشكال المتساوية للسلسلة الثقيلة من الميوسين عن اختلافات بين ، وقدم مؤشر تجزئة اللييفات العضلية مزيدا من الأفكار حول اختلافات الرقة (WBSF).

Abstract

بحثت هذه الدراسة الأنسجة العضلية في Bos indicus والثيران المهجنة لشرح الاختلافات في سمات جودة اللحوم. يتم وصف سمات الذبيحة ، ومعايير جودة اللحوم ، والتحقيقات الكيميائية الحيوية والجزيئية للبروتينات الليفية العضلية. تم تحديد طرق تقييم الأس الهيدروجيني والدهون العضلية (IMF) ولون اللحم (L * ، a * ، b *) ، وفقدان الماء ، والحنان ، وفحوصات البيولوجيا الجزيئية. يتم وصف الإجراءات المحددة التي توضح بالتفصيل المعايرة وإعداد العينات وتحليل البيانات لكل طريقة. وتشمل هذه التقنيات مثل التحليل الطيفي بالأشعة تحت الحمراء لمحتوى صندوق النقد الدولي ، وتقييم الرقة الموضوعي ، والفصل الكهربائي للأشكال المتماثلة ل MyHC.

تم تسليط الضوء على معلمات اللون كأدوات محتملة للتنبؤ بحنان اللحم البقري ، وهي سمة جودة حاسمة تؤثر على قرارات المستهلك. استخدمت الدراسة طريقة قوة القص وارنر-براتزلر (WBSF) ، وكشفت عن قيم 4.68 و 4.23 كجم ل Nellore و Angus-Nellore (P < 0.01) ، على التوالي. قدم إجمالي خسائر الطهي والتحليلات الكيميائية الحيوية ، بما في ذلك مؤشر تجزئة اللييفات العضلية (MFI) ، رؤى حول اختلافات الحنان. تم فحص أنواع الألياف العضلية ، وخاصة أشكال سلسلة الميوسين الثقيلة (MyHC) ، مع غياب ملحوظ لشكل MyHC-IIb في Zebu المدروسة. كشفت العلاقة بين MyHC-I وحنان اللحوم عن نتائج متباينة في الأدبيات ، مما يسلط الضوء على تعقيد هذا الارتباط. بشكل عام ، تقدم الدراسة رؤى شاملة حول العوامل التي تؤثر على جودة اللحوم في ثيران Bos indicus و Crossbred (Bos taurus × Bos indicus) ، مما يوفر معلومات قيمة لصناعة لحوم البقر.

Introduction

تمتلك البرازيل أكبر قطيع تجاري للماشية على مستوى العالم ، حيث يبلغ عددها حوالي 220 مليون وتحتل المرتبة الثانية كأكبر منتج للحوم ، حيث تنتج أكثر من 9 ملايين طن متري من الذبيحة تعادل سنويا1. يساهم قطاع إنتاج الأبقار بشكل كبير في النظام الزراعي الوطني ، حيث يتجاوز إجمالي المبيعات السنوية 55 مليار ريال برازيلي. منذ عام 2004 ، كانت البرازيل لاعبا رئيسيا في تجارة اللحوم العالمية ، حيث صدرت إلى أكثر من 180 دولة ، وهو ما يمثل ~ 50٪ من تجارة اللحوم العالمية2.

يبرز حنان اللحوم باعتباره سمة الجودة القصوى التي تؤثر على رضا المستهلك واستهلاك اللحوم3. من خلال استخدام الأساليب البيوكيميائية والموضوعية لقياس طراوة اللحوم ، يهدف الباحثون إلى تقديم رؤى قيمة حول عوامل مثل علم الوراثة الحيوانية وتقنيات المعالجة وظروف التخزين ، مما يؤدي في النهاية إلى تحسين جودة واتساق منتجات اللحوم للمستهلكين. هذه المعلومات مفيدة لأن حنان اللحوم اكتسب أهمية متزايدة في اتخاذ قرارات المستهلك أثناء الشراء. علاوة على ذلك ، يوفر تقييم طراوة اللحوم معلومات قيمة لمراقبة الجودة في إنتاج اللحوم والصناعات التحويلية. من خلال مراقبة الرقة باستمرار ، يمكن للمنتجين التأكد من أن منتجات اللحوم تلبي المعايير والمواصفات المطلوبة. في هذا السياق ، يتبنى منتجو الأبقار البرازيليون تدريجيا أنظمة تسمين مكثفة مع المهجنة لتعزيز معدل دوران رأس المال. يمثل هذا النظام حوالي 10٪ طن من الذبيحة المنتجة سنويا في البرازيل 4,5.

دفع الطلب المتزايد على تحسين جودة اللحوم من قبل المستهلكين منتجي الأبقار إلى التهجين مع السلالات الأوروبية ، وخاصة أبردين أنجوس6. تهدف هذه الاستراتيجية إلى إنتاج هجين F1 Angus-Nellore ، المعروف بالأداء المتفوق ، وسمات الذبيحة المرغوبة ، وتحسين جودة اللحوم مقارنة بحيوانات zebuالنقية 7,8. في المناطق الاستوائية في البرازيل ، من الشائع استخدام غير المخصية (الثيران) ذات النضج المتقدم في الانتهاء من المزارع ، مما قد يضر بسمات جودة اللحوم مثل اللون والرخامي والحنان. والجدير بالذكر أن دراسة استقصائية كشفت أن 95٪ من التي تم الانتهاء منها في حظائر التسمين البرازيلية هي من الذكور ، مع 73٪ من نيلور ، تليها 22٪ من المهجنة و 5٪ من الأنماط الوراثية الأخرى 9,10.

يعد فهم الآليات الكيميائية الحيوية الكامنة وراء طراوة اللحم أمرا بالغ الأهمية لتحسين جودة اللحوم. أحد الجوانب الرئيسية هو التحلل البروتيني بعد الوفاة ، والذي يؤثر على السلامة الهيكلية لألياف العضلات11. مؤشر تجزئة اللييفات العضلية (MFI) هو اختبار كيميائي حيوي يستخدم على نطاق واسع يحدد مدى تدهور اللييفة العضلية ، مما يوفر نظرة ثاقبة على طراوة اللحم12. تتضمن طريقة MFI قياس تجزئة البروتينات الليفية العضلية ، والتي ترتبط ارتباطا مباشرا بحنان اللحوم. يكمل هذا الفحص تقييمات جودة اللحوم التقليدية ويقدم فهما أعمق للعمليات الكيميائية الحيوية التي تساهم في الاختلافات في طراوة اللحوم.

في هذا السياق ، بحثت الدراسة الحالية في العضلات الهيكلية لثيران Bos indicus مقابل الثيران المهجنة (Bos taurus × Bos indicus) التي تم الانتهاء منها في حظيرة التسمين ، بهدف شرح الاختلافات في سمات جودة اللحوم.

Protocol

امتثلت جميع الإجراءات مع لمعايير البحث الأخلاقية التي وضعتها لجنة أخلاقيات استخدام (CEUA) التابعة ل "جامعة باوليستا جوليو دي ميسكيتا فيلهو" - حرم UNESP Botucatu ، بموجب البروتوكول 0171/2018.

1. التجارب

  1. قم بإنهاء 30 ثيران نيلور (Bos indicus) و 30 ثيران F1 Angus-Nellore (Bos taurus × Bos indicus) ، الذين تتراوح أعمارهم بين 20 و 24 شهرا ، في حظيرة تسمين. إيواء كلتا المجموعتين من في حظائر جماعية بقياس 5 م × 6 م بأرضية خرسانية ومجهزة بأحواض مياه من نوع الصدفة ، تستوعب ما يصل إلى خمسة لكل حظيرة. تأكد من أن جميع تنتمي إلى نفس مجموعة الإدارة (ولدت ونشأت في نفس المزرعة) وتم تقديمها إلى نفس فترة التسمين.
    ملاحظة: في هذه الدراسة ، كان متوسط وزن الجسم الأولي لثيران نيلور 370.7 كجم بينما كان متوسط وزن الجسم الأولي لثيران F1 Angus-Nellore 380.8 ± 17 كجم.
  2. النظام الغذائي التسمين
    1. تأكد من أن النظام الغذائي النهائي يتكون من 11.3٪ نخالة (تبن تيفتون وتفل قصب السكر) و 88.7٪ مركزات (حبوب الذرة الجافة المطحونة ، وجبة فول الصويا ، حبوب تقطير الذرة الرطبة ، علف الذرة الجافة الغلوتين ، واللب المعدني). إطعام لمدة 120 يوما وتوفير الوجبات الغذائية الإعلانية مرتين في اليوم (في الساعة 10:00 صباحا و 04:00 مساء).
  3. ذبح
    1. سجل وزن الجسم النهائي (BWf) في نهاية الفترة التجريبية. معالجة جميع في مسلخ قريب ، مع الالتزام بإجراءات التفتيش القياسية. قبل الذبح ، تأكد من أن تخضع لصيام 16 ساعة على الأقل ، مع الامتناع عن كل من الأعلاف والماء.
      ملاحظة: أظهر ثيران F1 Angus-Nellore وزنا نهائيا للجسم بلغ 615.09 ± 57.53 كجم ، بينما كان وزن ثيران Nellore 545.47 ± 11.45 كجم.
  4. تقييم سمات الذبيحة
    1. قم بوزن جثث اللحم البقري في البداية ثم قم بتعريضها لفترة تبريد عند 2-4 درجة مئوية لمدة 48 ساعة. تشمل القياسات وزن الذبيحة الساخنة (HCW) ومنطقة عين الضلع (REA) وسمك الدهون الخلفية (BFT) عندواجهة الضلع 12/ 13 ، على النحو الموصى به13. حدد REA باستخدام طريقة الشبكة بشبكة صغيرة (18 سم × 13 سم) وقم بقياس BFT بالمليمترات باستخدام الفرجار.
      1. قم بقياس REA في كل ذبيحة باستخدام شبكة شبكية (نفس الشبكة المستخدمة في نظام تصنيف درجة العائد التابع لوزارة الزراعة الأمريكية) ، مقسمة إلى مربعات 1 سم² مع نقطة واحدة في المنتصف. أضف جميع المربعات داخل محيط تتبع ريب آي وتلك الموجودة على طول محيط التتبع الذي يمر عبر النقطة الوسطى.
      2. قم بقياس BFT في موضع محدد في موقع التقييم في أي مكان بينالضلوع 12/ 13. لتحديد هذا الموقف ، قم بقياس طول العين الضلع ؛ ثم ، بدءا من الحد الإنسي "A" ، حدد نقطة ثلاثة أرباع الطريق على طول الضلع ومنتصف الطريق عبر "B". خذ الفرجار من خلال هذه النقطة وبزاوية قائمة على الضلع المحدد إلى الواجهة بين الدهون تحت الجلد والدهون العضلية. قم بقياس الدهون تحت الجلد عن طريق وضع الفرجار بزاوية قائمة على خط الدهون تحت الجلد ، من نقطة الواجهة (الشكل التكميلي S1).
  5. أخذ العينات
    1. عينة Longissimus thoracis (LT) من نصف الذبيحة اليسرى (جزء من ± 12.0 سم من اللحم) ، بينالضلوع 11و 13 في اتجاه الجمجمة. في المختبر ، قسم عينات اللحم إلى شرائح لحم بحجم 2.54 سم.
  6. الشيخوخه
    1. قم بتقييم سمات جودة اللحوم بعد فترة تقادم رطب مدتها 14 يوما عند درجة حرارة 0-2 درجة مئوية في حاضنة الطلب البيولوجي على الأكسجين (BOD). استخدم شرائح اللحم بسمك 2.54 سم لتحليل لون اللحم ، ودرجة الحموضة ، والدهون العضلية ، وفقدان التطهير ، والقدرة على الاحتفاظ بالمياه ، والحنان الموضوعي ، وخسائر الطهي. قم بتعبئة شرائح اللحم بشكل منفصل في أكياس بلاستيكية للحصول على تفريغ عالي ونفاذية أكسجين منخفضة وبعد الوصول إلى وقت الشيخوخة ، احتفظ بها مجمدة عند -20 درجة مئوية حتى وقت التحليل. قم بإذابة عينات اللحم البقري عند 4 درجات مئوية لمدة 24 ساعة وعرضها للأكسجين لمدة 30 دقيقة عند 4 درجات مئوية (وقت التفتح).

2. درجة حموضة اللحوم

  1. قم بقياس درجة الحموضة في اللحم باستخدام مقياس رقمي للأس الهيدروجيني مزود بمسبار اختراق. قم بمعايرته باستخدام pH 4.0 و 7.0 buffers عند درجة حرارة الغرفة 25 درجة مئوية. قم بقياس درجة حموضة اللحم في ثلاثة مواقع من عينة العضلات LT. تسجيل قراءات البيانات يدويا ثم تصدير ورقة البيانات ؛ احسب متوسط القراءات الثلاث لدرجة الحموضة في اللحوم.

3. الدهون العضلية

ملاحظة: تم تحديد محتوى الدهون العضلية (IMF) باستخدام التحليل الطيفي للأشعة تحت الحمراء القريبة (NIR)14 وبطريقة الجاذبية15.

  1. إزالة الدهون تحت الجلد من عضلة LT باستخدام مشرط. بعد ذلك ، قم بطحن شريحة اللحم وتجانسها لمدة 5 دقائق باستخدام خلاط ، مع دمج حوالي 180 جراما من العينة. ضع العينة في كوب ، وضعها داخل غرفة العينة ، وقم بإجراء مسح فرعي لمناطق مختلفة من عينة الاختبار عن طريق تدوير كوب العينة ؛ دمج المناطق للحصول على النتيجة النهائية.
  2. خذ ثلاث قراءات لكل عينة. بعد التجانس ، ضع العينات في اللوحة للقراءة اللاحقة. اضبط الجهاز على إرسال NIR ، مع صريف أحادي اللون متحرك يمسح المنطقة من 850 نانومتر إلى 1050 نانومتر.
  3. تصدير ورقة البيانات ثم حساب متوسط ثلاث قراءات لصندوق النقد الدولي. عبر عن النتائج كنسبة مئوية ، باستخدام الصيغة: [(متوسط وزن العينة ÷ صندوق النقد الدولي) × 100].
  4. الجمع بين تجانس عينات العضلات LT (3.0 جم) مع محلول الكلوروفورم / الميثانول / الكلوروفورم (2: 1) لمدة دقيقتين وإخضاعها للطرد المركزي (700 × جم ؛ 10 دقائق ؛ 20 درجة مئوية) لفصل المراحل المحبة للماء (العلوية) والصلبة (الوسطى) والكارهة للماء (السفلية).
  5. قم بتصفية المرحلة الكارهة للماء التي تم الحصول عليها بعد الطرد المركزي باستخدام ورق ترشيح على قمع مع شفط طفيف. انقل الراشح (الطور السفلي ؛ الدهون في الكلوروفورم) إلى دورق يسمى طور الدهون وانقل ما لا يقل عن 5 مم من الراشح إلى دورق دورق مسبق الوزن بعد تركه يقف لبضع دقائق. بعد ذلك ، سجل حجم طبقة الكلوروفورم (150 مل على الأقل) واستنشق الطبقة الكحولية.
    1. تجانس 100 غرام من القسامات من عينة الأنسجة الطازجة أو المجمدة لمدة 2 دقيقة مع مزيج من 100 مل من الكلوروفورم و 200 مل من الميثانول. أضف 100 مل من الكلوروفورم إلى الخليط ، واخلطه لمدة 30 ثانية ، وأضف 100 مل من الماء المقطر ، واخلطه لمدة 30 ثانية أخرى.
    2. قم بتصفية التجانس من خلال ورق الترشيح على قمع بشفط طفيف. اضغط بقاع الكأس الزجاجية عندما تصبح البقايا جافة لضمان أقصى قدر من استرداد المذيب.
    3. انقل المرشح إلى أسطوانة مدرجة سعة 500 مل واتركها لبضع دقائق للسماح بالفصل والتوضيح. سجل حجم طبقة الكلوروفورم (150 مل على الأقل) واستنشق الطبقة الكحولية.
    4. تأكد من إزالة الطبقة العليا تماما ؛ تحتوي طبقة الكلوروفورم على الدهون المنقاة. لاستخراج الدهون الكمي ، استرجع الدهون المحاصرة في بقايا الأنسجة عن طريق مزج البقايا وورق الترشيح مع 100 مل من الكلوروفورم.
    5. قم بتصفية الخليط من خلال القمع وشطف جرة الخلاط والبقايا بإجمالي 50 مل من الكلوروفورم. امزج هذا المرشح مع المرشح الأصلي قبل إزالة الطبقة الكحولية.
      ملاحظة: عادة ما يكون الترشيح سريعا; اضغط بقاع دورق على البقايا الجافة لضمان أقصى قدر من استرداد المذيب.
  6. جفف العينات في الفرن ، وقم بتبريدها في مجفف لمدة 24 ساعة على الأقل ، وضعها في فرن على حرارة 110 درجة مئوية حتى يتبخر المذيب بالكامل ، وقم بتبريدها في مجفف طوال الليل ، وأخيرا أعد وزنها.
  7. حدد محتوى صندوق النقد الدولي عن طريق حساب الفرق بين الأوزان الأولية والنهائية للدورق.

4. لون اللحم

  1. قم بمعايرة الجهاز باستخدام لوحة قياسية بالأبيض والأسود. ضع لوحة المعايرة البيضاء بالقرب من منتصف اللوحة. عند إجراء معايرة ، استخدم المنطقة القريبة من منتصف اللوحة. تكتمل المعايرة بعد وميض المصباح ثلاث مرات.
  2. خذ القياسات بعد 30 دقيقة عند 4 درجات مئوية (وقت التفتح). احصل على قراءات ملونة من ثلاثة مواقع مختلفة على عينة العضلات LT ، وتجنب بعناية النسيج الضام والدهون.
  3. في درجة حرارة الغرفة (20 درجة مئوية) ، احسب متوسطا من هذه القياسات ، على النحو الموصى به16.

5. خسائر المياه

  1. تقييم فقدان التطهير (PL) لجميع العينات. حدد PL لأقسام الخاصرة البقرية عن طريق قياس التباين بين الوزن الأولي قبل التجميد والوزن النهائي بعد التجميد / الذوبان.
    ملاحظة: لا تقم بتقييم PL من حقويه اللحم البقري غير المجمدة أبدا.
  2. قم بقياس قدرة الاحتفاظ بالماء (WHC) من خلال فرق وزن عينة اللحم (حوالي 1.0 جم) قبل وبعد التعرض لضغط 10 كجم لمدة 5 دقائق17.

6. طراوة اللحم الموضوعية

ملاحظة: تم إجراء قياس قوة القص Warner-Bratzler (WBSF) كما هو موضح18,19.

  1. ضع العينات على شبكة متصلة بزجاج حراري واطهيها في فرن كهربائي صناعي حتى تصل درجة الحرارة النهائية إلى 71 درجة مئوية. بعد الطهي ، تبرد العينات وتزنها وتبرد على حرارة 4 درجات مئوية لمدة 24 ساعة.
  2. حدد خسائر الطهي (CL) باستخدام الصيغة figure-protocol-8598.
    1. حدد فقدان التنقيط عن طريق وزن المادة المقاومة للحرارة قبل وبعد طهي العينة. تحقيقا لهذه الغاية ، ضع العينات على شبكة فوق زجاج حراري للسماح بتصريف عصائر اللحوم والدهون أثناء الطهي.
    2. حدد فقد التبخر عن طريق وزن العينة فقط قبل الطهي وبعده.
    3. سجل الأوزان النيئة والمطبوخة واحسب النسبة المئوية ل DL كوزن بالتنقيط بعد الطهي مقسوما على وزن عينة اللحم المذاب.
    4. احسب نسبة فقدان التبخر (EVP) باستخدام الصيغة [100 - (الوزن بعد الطهي) ÷ الوزن الخام × 100].
  3. لتحديد WBSF ، القسم الثامن من النوى بقطر 1.27 سم باستخدام محلل نسيج ، مزود بشفرة قوة القص Warner-Bratzler مقاس 3.07 مم وحافة قطع على شكل حرف V (زاوية 60 درجة).
    1. أبلغ عن النتائج كمتوسط ست قيم لكل عينة ، بالكيلوجرام (كجم) ، بعد استبعاد الحدود القصوى المنخفضة والعالية19.

7. مقايسة الكيمياء الحيوية

ملاحظة: تم تقييم التحلل البروتيني بعد الوفاة من خلال تقدير مؤشر تجزئة اللييفات العضلية (MFI) ، باتباع الإجراء الأصلي الذي حدده Culler et al.20 وتم تكييفه مع ماشية Bos indicus بواسطة Borges et al.21.

  1. تجانس شظايا حوالي 3 جم من عينات LT (الأنسجة العضلية المجردة من الدهون والنسيج الضام) في محلول عازل يحتوي على 100 mM كلوريد البوتاسيوم ، 20 mM فوسفات البوتاسيوم عند الرقم الهيدروجيني 7 ، 1 mM حمض الإيثيلين ديامينيترايتيك (EDTA) ، 1 mM كلوريد المغنيسيوم ، و 1 mM أزيد الصوديوم عند 2 درجة مئوية ، تليها الطرد المركزي (1000 × جم لمدة 15 دقيقة عند 4 درجات مئوية).
    1. أعد تعليق الرواسب في 10 مجلدات (v / w) من الوسط العازل باستخدام قضيب التحريك ، ثم ترسيبها مرة أخرى عند 1000 × جم لمدة 15 دقيقة وصب المادة الطافية.
    2. إعادة تعليق الرواسب في 2.5 حجم (v / w) من الوسط العازل وفصل النسيج الضام والحطام عن طريق تمريره عبر مصفاة البولي إيثيلين (18 شبكة). استخدم 2.5 وحدة تخزين إضافية (v / w) للسماح لللييفات العضلية بالمرور عبر المصفاة.
    3. تحديد تركيز البروتين من تعليق اللييفات العضلية باستخدام طريقة بيوريت من Gornall et al.22. خفف حصة معلق اللييفة العضلية مع وسط عازل إلى تركيز بروتين 0.5 ± 0.05 ملغم/مل.
    4. قم بقياس امتصاص هذا التعليق على الفور عند 540 نانومتر. تحديد MFI باستخدام القياس الطيفي عند 540 نانومتر. اضرب الامتصاص في 200 للحصول على MFI لكل عينة (وقم بالإبلاغ عنها كمؤشر بدون وحدة قياس).

8. مقايسة البيولوجيا الجزيئية

ملاحظة: لتحليل سلسلة الميوسين الثقيلة (MyHC) ، وهو البروتين الأكثر وفرة في العضلات الهيكلية البقرية ، تمت معالجة عينات LT من كلا المجموعتين باتباع البروتوكول الموصوف في الأدبيات23،24.

  1. حقق الفصل الكهربائي باستخدام جل SDS-PAGE المتدرج (7-10٪) وجل التراص بنسبة 4٪. ضع 25 ميكرولتر من كل عينة على الجل وقم بتشغيله عند 70 فولت و 28 مللي أمبير و 4 درجات مئوية لمدة 1 ساعة ، متبوعا بالجري عند 180 فولت و 12 مللي أمبير و 4 درجات مئوية لمدة 29 ساعة.
  2. استخدم اثنين من المخازن المؤقتة المختلفة في الأشواط: المخزن المؤقت الهلامي العلوي الذي يتكون من الجلايسين ، وقاعدة تريس (هيدروكسي ميثيل) أمينوميثان ، وكبريتات دوديسيل الصوديوم (SDS) ، والماء المقطر ، في حين أن المخزن المؤقت الهلامي السفلي مطابق للمخزن المؤقت العلوي ، مع إضافة ميركابتوإيثانول.
  3. قم بتلطيخ المواد الهلامية باستخدام Coomassie Blue والتقط الصور باستخدام البرامج المناسبة.
  4. تحديد الأشكال المتماثلة ل MyHC (MyHC-I و MyHC-IIa و MyHC-IIx / d) بناء على أوزانها الجزيئية (223.900 و 224.243 و 223.875 كيلو دالتون على التوالي). إجراء تحليل شبه كمي عن طريق قياس كثافة النطاقات المقابلة لكل شكل متساوي ، باستخدام البرامج المناسبة.
  5. استخدم الجرذ النعل والعضلة الباسطة الرقمية الطويلة (EDL) كعناصر تحكم إيجابية لتصنيف الأشكال المتماثلة ل MyHC ، مع الاحتفاظ ببئر واحد في كل هلام لتحميل 40 ميكرولتر من العينة المعالجة.
  6. بالنسبة لجميع البيانات ، قم بإجراء تحليل التباين (ANOVA) بواسطة اختبار F ، باستخدام النموذج التالي:
    Yij = μ + ti + Ɛij
    حيث Yij هي القيمة المرصودة للوحدة التجريبية التي تشير إلى العلاج i في التكرار j ؛ μ هو التأثير العام للمتوسط. t هو تأثير العلاج (المجموعة الوراثية) ، ε هو الخطأ التجريبي.
  7. قارن الوسائل باستخدام اختبار t للطالب واعتمد قيمة P < 0.05 كاحتمال حرج.

النتائج

يعرض الجدول 1 سمات الذبيحة للمجموعتين الوراثيتين اللتين تم بحثهما في هذه الدراسة. والجدير بالذكر أنه تم تحديد الاختلافات (P < 0.01) في HCW و REA و BFT ، حيث أظهرت المهجنة قيما أكبر ، مما يشير إلى تأثير التغاير .

متغير¹ن?...

Discussion

أثناء تقييم الذبيحة ، من الأهمية بمكان قياس سمات النمو والجودة بدقة بعد فترة تبريد مدتها 48 ساعة للحصول على بيانات متسقة وقابلة للمقارنة. أظهر النموذجان البيولوجيان سمات ذبيحة متباينة ، خاصة HCW و REA و BFT ، والتي تتوافق مع النتائج المبلغ عنها في دراسات أخرى. يتوافق متوسط HCW لثيران Nellore مع تفضيل...

Disclosures

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه. لم يكن للممولين أي دور في تصميم الدراسة أو جمع البيانات وتحليلها أو قرار النشر أو إعداد المخطوطة.

Acknowledgements

تم تمويل هذا البحث من قبل FAPESP (منح 2023/05002-3 ؛ 2023/02662-2 و 2024/09871-9) ، CAPES (رمز المالية 001) ، CNPq (304158 / 2022-4) ، ومن قبل PROPE (منحة IEPe-RC رقم 149) من كلية الطب البيطري وعلوم ، جامعة ولاية ساو باولو.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
AcetoneMerk, Darmstadt, GermanyCAS 67-64-1 | 100014solutions used for the electrophoretic separations
Anti-MYH-1 AntibodyMerk, Darmstadt, GermanyMABT846Rat soleus
Anti-Myosin antibodyAbcam, Massachusetts, United Statesab37484Myosin heavy chain
Anti-Myosin-2 (MYH2) AntibodyMerk, Darmstadt, GermanyMABT840Extensor digitorum longus (EDL)
Biological oxygen demand (BOD) incubatorTECNAL, São Paulo, BrazilTE-371/240LMeat aging
Chloroform; absolute analytical reagentSigma-Aldrich, Missouri, United States67-66-3Intramuscular fat
CIELab systemKonica Minolta Sensing, Tokyo, JapanCR-400 colorimeterMeat color
Coomassie BlueSigma-Aldrich, Missouri, United StatesC.I. 42655)Myosin heavy chain
Electric ovenVenâncio Aires, Rio Grande do Sul, BrazilMeat tenderness
EthanolMerk, Darmstadt, Germany64-17-5solutions used for the electrophoretic separations
Ethylenediaminetetraacetic acidSigma-Aldrich, Missouri, United States60-00-4Post-mortem proteolysis
Glass flasksSigma-Aldrich, Missouri, United Statessolutions used for the electrophoretic separations
GlycineSigma-Aldrich, Missouri, United StatesG6761Myosin heavy chain
Infrared spectroscopy - FoodScanFoss NIRSystems, Madson, United StatesFoodScan™ 2Intramuscular fat
Magnesium chlorideSigma-Aldrich, Missouri, United States 7786-30-3Post-mortem proteolysis
MercaptoetanolSigma-Aldrich, Missouri, United StatesM6250Myosin heavy chain
Methanol, absolute analytical reagentSigma-Aldrich, Missouri, United States67-56-1Intramuscular fat
pH meterLineLab, São Paulo, BrazilAKLA 71980Meat pH
PlusOne 2-D Quant KitGE Healthcare ProductCode 80-6483-56Post-mortem proteolysis
PolypropyleneSigma-Aldrich, Missouri, United Statessolutions used for the electrophoretic separations
Potassium chlorideSigma-Aldrich, Missouri, United States7447-40-7Post-mortem proteolysis
Potassium phosphateSigma-Aldrich, Missouri, United StatesP0662Post-mortem proteolysis
R softwareVienna, Austriaversion 3.6.2Data analysis
Sodium azideSigma-Aldrich, Missouri, United States26628-22-8Post-mortem proteolysis
Sodium dodecyl sulfate (SDS)Sigma-Aldrich, Missouri, United States822050Myosin heavy chain
SpectrophotometerPerkin Elmer, Shelton, United StatesPerkin Elmer
Lambda 25 UV/Vis		Post-mortem proteolysis
Statistical Analysis SystemSAS, Cary, North Carolina, United Statesversion 9.1,Data analysis
Texture AnalyzerAMETEK Brookfield, Massachusetts, United
States		CTXMeat tenderness
Tris(hydroxymethyl)aminomethaneSigma-Aldrich, Missouri, United States77-86-1Myosin heavy chain
UltrafreezerIndrel Scientific, Londrina, Paraná, Brazil.INDREL IULT 335 D - LCDSample storage
Ultrapure waterElga PURELAB Ultra Ionic systemsolutions used for the electrophoretic separations
Ultra-Turrax high shear mixerMarconi – MA102/E, Piracicaba, São Paulo, BrazilPost-mortem proteolysis

References

  1. Nunes, C. L. d. e. C., Pflanzer, S. B., Rezende-de-Souza, J. H., Chizzotti, M. L. Beef production and carcass evaluation in Brazil. Anim Front. 14 (2), 15-20 (2024).
  2. MAPA. Projeções Do Agronegócio: Brasil 2017/18 a 2027/28 Projeções de Longo Prazo / Ministério Da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Biblioteca Nacional de Agricultura. , (2018).
  3. Bernués, A., Ripoll, G., Panea, B. Consumer segmentation based on convenience orientation and attitudes towards quality attributes of lamb meat. Food Qual Prefer. 26, 211-220 (2012).
  4. Andrade, T. S., et al. Perception of consultants, feedlot owners, and packers regarding management and marketing decisions on feedlots: A national survey in Brazil (Part II). Can J Anim Sci. 100 (4), 759-770 (2020).
  5. de Andrade, T. S., et al. Perception of consultants, feedlot owners, and packers regarding the optimal economic slaughter endpoint in feedlots: A national survey in Brazil (Part I). Can J Anim Sci. 100 (4), 745-758 (2020).
  6. Santiago, B., et al. Comparison of dental carcass maturity in non-castrated male F1 Angus-Nellore cattle finished in feedlot. Food Sci Anim Resour. 41 (3), 554-562 (2021).
  7. Miguel, G. Z., et al. Immunocastration improves carcass traits and beef color attributes in Nellore and Nellore×Aberdeen Angus crossbred animals finished in feedlot. Meat Sci. 96 (2), 884-891 (2014).
  8. Costa, N. V., et al. Carcass and meat quality traits in Nellore and F1 Nellore-Araguaia crosses. Genet Mol Res. 14 (2), 5379-5389 (2015).
  9. Pinto, A. C. J., Millen, D. D. Nutritional recommendations and management practices adopted by feedlot cattle nutritionists: the 2016 Brazilian survey. Can J Anim Sci. 99 (2), 392-407 (2019).
  10. Costa Junior, C., et al. Brazilian beef cattle feedlot manure management: A country survey. J Anim Sci. 91 (4), 1811-1818 (2013).
  11. Huang, C., et al. Proteomics discovery of protein biomarkers linked to meat quality traits in post-mortem muscles: Current trends and future prospects: A review. Trends Food Sci Technol. 105, 416-432 (2020).
  12. Muniz, M. M. M., et al. Use of gene expression profile to identify potentially relevant transcripts to myofibrillar fragmentation index trait. Funct Integr Genomics. 20, 609-619 (2020).
  13. Official United States Standards for Grades of Carcass Beef. United States Standards for Grades of Carcass Beef. USDA Available from: https://www.ams.usda.gov/sites/default/files/media/CarcassBeefStandard.pdf (1997)
  14. Anderson, S. Determination of fat, moisture, and protein in meat and meat products by using the FOSS FoodScan near-infrared spectrophotometer with FOSS artificial neural network calibration model and associated database: Collaborative study. J AOAC Int. 90 (4), 1073-1083 (2007).
  15. Bligh, E. G., Dyer, W. J. A rapid method of total lipid extraction. Can J Biochem Physiol. 37 (8), 911-917 (1959).
  16. Hernández Salueña, B., Sáenz Gamasa, C., Diñeiro Rubial, J. M., Alberdi Odriozola, C. CIELAB color paths during meat shelf life. Meat Sci. 157, 107889 (2019).
  17. Rao, M. V., Gault, N. F. S., Kennedy, S. Variations in water-holding capacity due to changes in the fibre diameter, sarcomere length and connective tissue morphology of some beef muscles under acidic conditions below the ultimate pH. Meat Sci. 26 (1), 19-37 (1989).
  18. Wheeler, T. L., Koohmaraie, M., Cundiff, L. V., Dikeman, M. E. Effects of cooking and shearing methodology on variation in Warner-Bratzler shear force values in beef. J Anim Sci. 72 (9), 2325-2330 (1994).
  19. AMSA. Research Guidelines for Cookery, Sensory Evaluation, and Instrumental Tenderness Measurements of Meat. American Meat Science Association Educational Foundation. , (2015).
  20. Culler, R. D., Parrish, F. C., Smith, G. C., Cross, H. R. Relationship of myofibril fragmentation index to certain chemical, physical and sensory characteristics of bovine longissimus muscle. J Food Sci. 43 (4), 1177-1180 (1978).
  21. Borges, B. O., et al. Polymorphisms in candidate genes and their association with carcass traits and meat quality in Nellore cattle. Pesqui Agropecu Bras. 49 (5), 364-371 (2014).
  22. Gornall, A. G., Bardawill, C. J., David, M. M. Determination of serum proteins by means of the biuret reaction. J Biol Chem. 177 (2), 751-766 (1949).
  23. Chardulo, L. A. L., et al. Gene and protein expression of myosin heavy chain in Nellore cattle comparing growth or meat tenderness traits. Anim Biotechnol. 32 (3), 300-309 (2019).
  24. Vechetti-Júnior, I. J., et al. NFAT isoforms regulate muscle fiber type transition without altering can during aerobic training. Int J Sports Med. 34 (10), 861-867 (2013).
  25. Ferraz, J. B. S., de Felício, P. E. Production systems - An example from Brazil. Meat Sci. 84, 238-243 (2010).
  26. Liang, R. R., et al. Tenderness and sensory attributes of the longissimus lumborum muscles with different quality grades from Chinese fattened yellow crossbred steers. Meat Sci. 112, 52-57 (2016).
  27. Viljoen, H. F., De Kock, H. L., Webb, E. C. Consumer acceptability of dark, firm and dry (DFD) and normal pH beef steaks. Meat Sci. 61 (2), 181-185 (2002).
  28. Lopes, L. S. F., et al. Application of the principal component analysis , cluster analysis , and partial least square regression on crossbreed Angus-Nellore bulls feedlot finished. Trop Anim Health Prod. 52 (6), 3655-3664 (2020).
  29. Oddy, V. H., Harper, G. S., Greenwood, P. L., McDonagh, M. B. Nutritional and developmental effects on the intrinsic properties of muscles as they relate to the eating quality of beef. Aust J Exp Agric. 41 (7), 921-942 (2001).
  30. Purchas, R. W., Burnham, D. L., Morris, S. T. Effects of growth potential and growth path on tenderness of beef longissimus muscle from bulls and steers. J Anim Sci. 80 (12), 3211-3221 (2002).
  31. Wulf, D. M., O’Connor, S. F., Tatum, J. D., Smith, G. C. Using objective measures of muscle color to predict beef Longissimus tenderness. J Anim Sci. 75 (3), 684-692 (1997).
  32. Baldassini, W. A., et al. Meat quality traits of Nellore bulls according to different degrees of backfat thickness: A multivariate approach. Anim Prod Sci. 57 (2), 363-370 (2017).
  33. Chardulo, L. A. L., Silveira, A. C., Vianello, F., Lima, G. P. P., Vianello, F. Analytical aspects for tropical meat quality assessment. Food Quality, Safety and Technology. , 53-62 (2013).
  34. Chen, L., Opara, U. L. Texture measurement approaches in fresh and processed foods - A review. Food Research International. 51 (2), 823-835 (2013).
  35. Luo, L., Guo, D., Zhou, G., Chen, K. An investigation on the relationship among marbling features, physiological age and Warner–Bratzler Shear force of steer longissimus dorsi muscle. J Food Sci Technol. 55 (4), 1569-1574 (2018).
  36. Essex, E. Objective measurements for texture in foods. J Texture Stud. 1, 19-37 (1969).
  37. . Standardized Warner-Bratzler shear force procedures for meat tenderness measurement Available from: https://www.ars.usda.gov/ARSUserFiles/30400510/protocols/shearforceprocedures.pdf (1995)
  38. Severino, M., et al. Proteomics unveils post-mortem changes in beef muscle proteins and provides insight into variations in meat quality traits of crossbred young steers and heifers raised in feedlot. Int J Mol Sci. 23 (20), 12259 (2022).
  39. Bertola, N. C., Bevilacqua, A. E., Zaritsky, N. E. Heat treatment effect on texture changes and thermal denaturation of proteins in beef muscle. J Food Process Preserv. 18 (1), 31-46 (1994).
  40. Palka, K., Daun, H. Changes in texture, cooking losses, and myofibrillar structure of bovine M. semitendinosus during heating. Meat Sci. 51 (3), 237-243 (1999).
  41. Pearce, K. L., Rosenvold, K., Andersen, H. J., Hopkins, D. L. Water distribution and mobility in meat during the conversion of muscle to meat and ageing and the impacts on fresh meat quality attributes - A review. Meat Sci. 89 (2), 111-124 (2011).
  42. Muniz, M. M. M., et al. Use of gene expression profile to identify potentially relevant transcripts to myofibrillar fragmentation index trait. Funct Integr Genomics. 20 (4), 609-619 (2020).
  43. Baldassini, W., et al. Meat quality and muscle tissue proteome of crossbred bulls finished under feedlot using wet distiller grains by-product. Foods. 11 (20), 3233 (2022).
  44. della Malva, A., et al. In-depth characterization of myofibrillar muscle proteome changes in lambs fed hazelnut skin by-products. Food Biosci. 53, 102836 (2023).
  45. Koohmaraie, M., Kent, M. P., Shackelford, S. D., Veiseth, E., Wheeler, T. L. Meat tenderness and muscle growth: Is there any relationship. Meat Sci. 62 (3), 345-352 (2002).
  46. Lefaucheur, L., et al. Muscle characteristics and meat quality traits are affected by divergent selection on residual feed intake in pigs. J Anim Sci. 89 (4), 996-1010 (2011).
  47. Picard, B., et al. Inverse relationships between biomarkers and beef tenderness according to contractile and metabolic properties of the muscle. J Agric Food Chem. 62 (40), 9808-9818 (2014).
  48. Chikuni, K., Muroya, S., Nakajima, I. Myosin heavy chain isoforms expressed in bovine skeletal muscles. Meat Sci. 67 (1), 87-94 (2004).
  49. Picard, B., Cassar-Malek, I. Evidence for expression of IIb myosin heavy chain isoform in some skeletal muscles of Blonde d’Aquitaine bulls. Meat Sci. 82 (1), 30-36 (2009).
  50. Crouse, J. D., Koohmaraie, M., Seideman, S. D. The relationship of muscle fibre size to tenderness of beef. Meat Sci. 30 (4), 295-302 (1991).
  51. Zamora, F., et al. Predicting variability of ageing and toughness in beef M. Longissimus lumborum et thoracis. Meat Sci. 43 (3-4), 321-333 (1996).
  52. Strydom, P. E., Naude, R. T., Smith, M. F., Scholtz, M. M., Van Wyk, J. B. Characterisation of indigenous African cattle breeds in relation to meat quality traits. Meat Sci. 55 (1), 79-88 (2000).
  53. Renand, G., Picard, B., Touraille, C., Berge, P., Lepetit, J. Relationships between muscle characteristics and meat quality traits of young Charolais bulls. Meat Sci. 59 (1), 49-60 (2001).
  54. Chriki, S., et al. Meta-analysis of the comparison of the metabolic and contractile characteristics of two bovine muscles: Longissimus thoracis and semitendinosus. Meat Sci. 91 (4), 423-429 (2012).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

JoVE 209

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved