Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

هنا ، نصف بروتوكول الفحص المجهري للتوطين بالموجات فوق الصوتية (ULM) ، والذي يحقق دقة مكانية تبلغ 12.5 ميكرومتر لتصوير الأوعية الدموية الدقيقة في الدماغ في الفئران. إنه يتيح التصور التفصيلي لاتجاه تدفق الدم وسرعته ، مما يوفر أداة قوية لتطوير دراسات الدورة الدموية الدماغية واضطرابات الأوعية الدموية.

Abstract

تشكل الأوعية الدموية الدقيقة الدماغية شبكة معقدة من الأوعية الضرورية للحفاظ على وظائف الدماغ. يمكن لأمراض مثل السكتة الدماغية ومرض الزهايمر والأورام الدبقية والخرف الوعائي أن تعطل نظام الأوعية الدموية الدقيقة بشكل عميق. لسوء الحظ ، تقدم طرق التصوير الطبي الحالية ملاحظات غير مباشرة فقط على هذا النطاق. مستوحى من الفحص المجهري البصري ، يتغلب الفحص المجهري للتوطين بالموجات فوق الصوتية (ULM) على المفاضلة الكلاسيكية بين عمق الاختراق والدقة المكانية. من خلال توطين وتتبع الفقاعات الدقيقة المحقونة الفردية (MBs) بدقة الطول الموجي الفرعي ، يمكن إنشاء خرائط الأوعية الدموية والسرعة على مقياس الميكرومتر. هنا ، نقدم بروتوكولا قويا للتصوير فائق الدقة للأوعية الدموية الدقيقة في الجسم الحي في الجسم الحي في الفئران باستخدام منصة الموجات فوق الصوتية التجارية. تحقق هذه الطريقة دقة مكانية تبلغ 12.5 ميكرومتر ، وتعيد بناء بنية الأوعية الدموية الدقيقة وتوفر معلومات مفصلة عن اتجاه تدفق الدم وسرعته ، مما يعزز بشكل كبير فهمنا للدوران الدقيق الدماغي. يمكن توسيع البروتوكول ليشمل نماذج أمراض الفئران ، مما يوفر أداة قوية للتشخيص المبكر وعلاج أمراض الأوعية الدموية العصبية.

Introduction

تعتبر الأوعية الدموية الدقيقة الدماغية ، التي تتكون من الشعيرات الدموية والشرايين والأوردة ، ضرورية للحفاظ على وظائف المخ من خلال تسهيل توصيل العناصر الغذائية وتبادل الأكسجين وإزالة النفايات1،2. تشارك الاضطرابات في هذه الشبكة في الاضطرابات العصبية مثل السكتة الدماغية3 ، ومرض الزهايمر4 ، والأورام الدبقية5 ، والخرف الوعائي6 ، مما يؤدي إلى ضعف في فسيولوجيا الدماغ. غالبا ما تسبق التغيرات الوعائية الدقيقة ظهور الأعراض السريرية ، مما يجعلها هدفا حاسما للتدخلات التشخيصية والعلاجية7،8. يعد الفهم الشامل لتغيرات الأوعية الدموية على المستويين الهيكلي والوظيفي أمرا أساسيا لتطوير استراتيجيات البحث والعلاج.

ومع ذلك ، فإن تصوير الأوعية الدموية الدقيقة الدماغية يمثل تحديا خاصا نظرا لصغر حجمها وموقعها العميق جزئيا داخل الدماغ. طرائق التصوير التقليدية مثل التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI) 9 والتصوير المقطعي المحوسب (CT) 10 ، على الرغم من أنها كافية لالتقاط التغيرات الوعائية واسعة النطاق ، إلا أنها توفر دقة مكانية (~ 100 ميكرومتر) خشنة جدا لتصور الأوعية الصغيرة. توفر الطرق البصرية مثل الفحص المجهري ثنائيالفوتون 11 دقة مكانية ممتازة (تصل إلى 1 ميكرومتر) لتصوير الشعيرات الدموية الفردية ولكن يتم إعاقتها بسبب مجال الرؤية المحدود وعمق الاختراق (أقل من 1 مم) ، مما يحد من قدرتها على تصوير مناطق الدماغ العميقة. كتقنية قائمة على الموجات فوق الصوتية ، بينما يقدم دوبلر12 تقييما لتدفق الدم في الوقت الفعلي ، يظل مقيدا بدقة تتراوح من 50 إلى 200 ميكرومتر ، وهو ما لا يكفي لتفاصيل الأوعية الدموية الدقيقة. بشكل عام ، لا توجد طريقة واحدة تلبي حاليا المتطلبات المزدوجة المتمثلة في الدقة المكانية العالية والاختراق الكافي للدماغ الضروري لتصوير الأوعية الدموية الدقيقة الدماغية.

مستوحى من الفحص المجهري البصري13،14 ، يسمح الفحص المجهري للتوطين بالموجات فوق الصوتية (ULM) بتصور الهياكل الدقيقة على مقياس ميكرون عن طريق تحديد موقع الفقاعات الدقيقة المحقونة الفردية (MBs) وتتبع إزاحتها بدقة الطول الموجيالفرعي 15. إنه يتجاوز الحل الوسط الكلاسيكي بين الاختراق والدقة في التصوير بالموجات فوق الصوتية16. توضح هذه الدراسة بالتفصيل بروتوكولا قويا لتنفيذ ULM في نموذج الفئران الحية وبالتالي تمكين التصوير فائق الدقة للأوعية الدموية الدقيقة في الدماغ من خلال منصة الموجات فوق الصوتية المتاحة تجاريا. لا يوفر البروتوكول إعادة بناء شاملة لبنية الأوعية الدموية الدقيقة فحسب ، بل يوفر أيضا معلومات مفصلة حول اتجاه وسرعة تدفق الدم ، وهو أمر غير ممكن مع تقنيات التصوير التقليدية. على الرغم من التحقق من صحة البروتوكول في الفئران العادية ، إلا أنه قابل للتمديد ليشمل نماذج أمراض الفئران ، مما يوفر إمكانيات لدراسات مخصصة في ظروف مرضية مختلفة.

Protocol

تمت الموافقة على جميع التجارب على التي يتم إجراؤها في هذا العمل من قبل لجنة الأخلاقيات بجامعة فودان (رقم الموافقة: 2022JS-004). يتبع البروتوكول بدقة إرشادات رعاية لجامعة فودان لضمان المعاملة الإنسانية للحيوانات. قبل البدء التجريبي ، يجب السماح للفئران بفترة أسبوع واحد للتأقلم البيئي ، يتم خلالها تزويدهم بالعلف والماء الكافيين. يتم تنظيم الفترة الضوئية بعناية وفقا لإيقاعاتها البيولوجية لضمان الحفاظ على الحالات الفسيولوجية الطبيعية. في نهاية التجربة ، يتم إجراء القتل الرحيم باستخدام جرعة زائدة من الأيزوفلوران المستنشق.

ملاحظة: يظهر الإعداد التجريبي في الشكل 1A-H.

1. تحضير لتصوير ULM

  1. تخدير
    1. تحفيز التخدير في الفئران عن طريق إعطاء خليط من 3.5٪ إيزوفلوران و 100٪ أكسجين بمعدل تدفق 3 لتر / دقيقة. بعد حوالي 4 دقائق ، أخرج من الغرفة وضعه على منصة تصوير دافئة مسبقا إلى 37 درجة مئوية. تأكد من عمق التخدير من خلال عدم وجود منعكس انسحابي على قرصة إصبع القدم الصلبة للطرف الخلفي للفئران.
    2. ضع أنف الجرذ في قناع تنفس متصل بنظام التخدير. حافظ على تخدير مستقر عن طريق إعطاء خليط من 1.5٪ إيزوفلوران و 100٪ أكسجين بمعدل تدفق 1.5 لتر / دقيقة.
      ملاحظة: تتبع طرق التخدير وجرعاته بدقة إرشادات الشركة المصنعة.
  2. تحضير قبل الجراحة
    1. قم بتأمين القواطع العلوية للفئران في شق شريط القاطع ، ووضع الفك السفلي أسفل الشريط. استخدم قضبان الأذن لتثبيت رأس الفئران عن طريق وضعها في المسافة البادئة العظمية الأمامية قليلا وأعلى من قناة الأذن (يمكن لمسها باليد) ، مما يضمن بقاء سطح الجمجمة بالكامل أفقيا (الشكل 1 أ).
    2. تحقق برفق من استقرار التثبيت عن طريق تطبيق قدر صغير من الضغط على أجزاء مختلفة من الرأس. تأكد من عدم وجود حركة أو انزلاق من الموضع الأصلي.
    3. اضبط ارتفاع منصة التصوير واضبط زاوية رأس الجرذ بدقة عن طريق رفع أو خفض شق شريط القاطع لضمان التنفس دون عائق.
    4. ضع مرهم الإريثروميسين أو محلول الجلسرين بنسبة 30٪ على عيون الفئران لمنع التلف الناتج عن التعرض المطول للأضواء الجراحية وللحفاظ على رطوبة العينين تحت التخدير. بالإضافة إلى ذلك ، استخدم ملاقط مستديرة الرأس لسحب لسان الجرذ برفق إلى جانب واحد من الفم لمنع الاختناق أثناء الجراحة.
    5. استخدم ماكينة قص كهربائية محمولة باليد واحلق رأس الجرذ عكس اتجاه نمو الشعر (من الخلف إلى الأمام) ، عادة بين الأذنين ، من العينين إلى بداية الرقبة (الشكل 1 ب). نظف المنطقة المحلوقة بمحلول اليود 1٪ للتحضير للشق الجراحي.
  3. حج قحف الفئران
    1. قم بعمل شق على طول الخيط السهمي لجمجمة الفئران ، بدءا من خلف العظم القذالي مباشرة ويمتد حوالي 4 سم إلى الأمام. استخدم المرقئ لسحب الجلد على كلا الجانبين (الشكل 1 ج). اختياريا ، قم باستئصال الجلد بالكامل فوق الجمجمة لتوفير وصول جراحي أكبر ، ولكن هذا قد يزيد من خطر الإصابة بالعدوى.
    2. استخدم مقصا صغيرا لإزالة السمحاق من الجمجمة ، مما يؤدي إلى تعريض طبقة العظام الصلبة بالكامل.
    3. قم بإجراء حج القحف باستخدام مثقاب قمجمة صغير محمول باليد مزود بمثقاب كروي (الشكل 1 د). ابدأ بمثقاب خشن (قطر 2.5 مم) واضغط برفق لكشط العظم ، وقم بتطبيق المثقاب لمدة 2-3 ثوان في المرة الواحدة. ابدأ في المنطقة المركزية وتقدم نحو المناطق السميكة على الجانبين.
      ملاحظة: يؤثر النزيف المفرط أثناء حج القحف على الدورة الدموية ، مما يؤدي إلى نقص إعادة بناء الأوعية الدموية في المناطق القشرية (الشكل 1H).
    4. توقف مؤقتا كل 2-3 ثوان لمنع ارتفاع درجة الحرارة ، وكل دقيقتين ، قم بحقن ما يقرب من 1 مل من 0.9٪ كلوريد الصوديوم في منطقة الحفر باستخدام حقنة لتبريد وشطف الحطام.
    5. بمجرد أن لا تظهر أنسجة العظام البيضاء متصلة باستمرار ، قم بالتبديل إلى مثقاب أدق (قطر 1 مم). استمر في الحفر حتى تظهر الأوعية الدموية الرئيسية المركزية بوضوح باللون البني الداكن ، وتظهر المنطقة المحيطة باللون الوردي ، مع ظهور الأوعية الدقيقة على شكل حمراء قليلا (الشكل 1F).
      ملاحظة: نطاق حج القحف النهائي هو من Bregma +3 مم إلى Lambda الأمامي الخلفي و 7 مم على كل جانب على طول خط الوسط للجمجمة (الشكل 1E). بعد الانتهاء من الجراحة ، اسمح للفأر بالراحة لمدة 10 دقائق تقريبا لضمان ظروف فسيولوجية مستقرة نسبيا قبل البدء في جمع البيانات.

2. الإعداد قبل جمع البيانات

  1. تحضير عامل التباين والحقن
    1. قم بإذابة عامل التباين (قارورة واحدة تحتوي على 59 مجم من غاز SF6 و 25 مجم من المسحوق المجفف بالتجميد) ، وفقا للإرشادات الرسمية ، في 5 مل من 0.9٪ كلوريد الصوديوم. رج الخليط بقوة لتشكيل تعليق MB. التركيز النهائي ل SF6 في المعلق هو 8 ميكرولتر / مل.
    2. اسحب 0.8 مل من معلق MB في حقنة سعة 1 مل وثبته في مضخة حقن دقيق مبرمجة للنقع بسرعة 100 ميكرولتر / دقيقة.
    3. أدخل إبرة ساكنة 26 جم بقسطرة متصلة في وريد ذيل الجرذ (الشكل 1G).
  2. تحديد مستوى التصوير
    1. قم بتركيب مسبار بتردد مركزي يبلغ 15.625 ميجاهرتز على ذراع مناور الأداة التجسيمية للدماغ ، ومجهز بمشبك (نطاق الحركة: رأسي ، أفقي ، وأمامي خلفي يصل إلى 80 مم ؛ دقة القراءة: 0.1 مم).
    2. ضع مسبار الموجات فوق الصوتية مباشرة فوق دماغ الفئران المكشوف. ضع جل التوصيل على سطح الدماغ المكشوف لضمان نقل الإشارات الأمثل.
    3. افتح الواجهة الرئيسية للبرنامج ، والتي تدمج أطلس دماغ الفئران مع برامج التحكم في الحركة الحركية.
    4. قم بتعيين نقطة Bregma كالأصل. توفر واجهة البرنامج عرضا في الوقت الفعلي لمسار المسبار وموقع شريحة دماغ الفئران المقابل. حدد مستوى التصوير المستهدف ؛ على سبيل المثال ، بريجما -1 مم.

3. جمع البيانات (التوقيت ~ 20 دقيقة)

ملاحظة: يوفر Verasonics (نظام الموجات فوق الصوتية) نصوص MATLAB الأصلية للاستخدام مع نظام Vantage ولم يتم تعديله.

  1. بدء تشغيل البرمجيات
    1. قم بتشغيل برنامج MATLAB 2021a.
    2. أدخل البرنامج النصي للحصول على البيانات في MATLAB 2021a.
    3. في الدليل الجذر، اكتب activate في نافذة سطر الأوامر لتنشيط بيئة وقت التشغيل.
  2. تكوين المعلمات واكتساب إشارات التردد اللاسلكي
    1. اضبط أعماق بدء ونهاية جمع البيانات على 5 و 120 طولا موجيا ، على التوالي ، لالتقاط المنطقة محل الاهتمام بشكل فعال.
      ملاحظة: يجب إجراء التعديلات بناء على مستوى التصوير المحدد الذي تتم دراسته.
    2. اضبط زوايا توجيه نقل الموجة المستوية من -5 درجات إلى 5 درجات بزيادات قدرها 2.5 درجة لتحسين دقة الصورة والتباين.
      ملاحظة: اضبط هذه الإعدادات بناء على متطلبات التصوير المحددة والخصائص المستهدفة.
    3. اضبط جهد الإرسال على 20 فولت لضمان الاختراق الكافي ونسبة الإشارة إلى الضوضاء المثلى للمنطقة ذات الاهتمام.
    4. انقر فوق الزر تشغيل لبدء جمع البيانات وحفظ إشارات التردد اللاسلكي (RF) بتنسيق ملف .mat.
      ملاحظة: ابدأ في جمع البيانات بعد 30 ثانية من بدء تشغيل مضخة الحقن المجهري لضمان توزيع ميغابايت موحد ومستقر داخل جسم الفئران.

4. معالجة البيانات وتحليلها (التوقيت ~ 8 ساعات)

  1. معالجة البيانات
    1. قم باستيراد بيانات التردد اللاسلكي إلى MATLAB 2021a وقم بإلغاء تشكيلها لإنشاء بيانات في الطور والتربيع (I / Q) (انظر جدول المواد).
    2. انقر فوق الزر تشغيل لاستخدام خوارزمية التأخير والمجموع (DAS) لتشكيل الحزمة على بيانات I/Q (انظر جدول المواد).
      ملاحظة: معدل الإطارات اللاحقة للمركب يبلغ 800 هرتز، بإجمالي 120,000 إطار.
  2. تصوير ULM
    1. قم بتطبيق خوارزمية التصفية الزمانية المكانية لتحلل القيمة المفردة (SVD)17 على بيانات IQ لإزالة ضوضاء الخلفية والفوضى. يتم تخزين كل 800 إطار ككتلة بيانات، ويتم تعيين عتبة SVD إلى [15، 800].
    2. حدد موقع مركز كل ميغابايت باستخدام خوارزمية التركيب الغوسية18.
    3. استخدم خوارزمية Kuhn-Munkres لتتبع مسارات MB عبر إطارات متتالية بناء على مواقعها (انظر جدول المواد).
    4. قم بتعيين مسارات MB على شبكة تم أخذ عينات منها 8x ، باستخدام خريطة ألوان ساخنة لعرض عدد مسارات MB وخريطة ألوان نفاثة لتشفير سرعة التدفق عن طريق تعيين السرعة المحسوبة في كل موضع داخل الأوعية الدموية الدقيقة.
    5. قم بتطبيق نظام ألوان مخصص للتمييز بين اتجاهات التدفق لأعلى ولأسفل ، مما ينتج عنه صور عالية الدقة لتحسين المرئيات.
    6. قم بتقسيم مسارات MB الأصلية بشكل عشوائي إلى مجموعتين لإنشاء صورتين فرعيتين ، وإجراء تحويل فورييه على كل منهما ، وحساب ارتباط حلقة فورييه (FRC) كارتباط طبيعي لأطيافها. حدد الاستبانة على أنها معكوس التردد المكاني حيث ينخفض FRC إلى ما دون العتبة19.

النتائج

يوضح الشكل 1 الإعداد التفصيلي لتصوير الأوعية الدموية الدقيقة في الجسم الحي في الفئران ، مع تصميم كل عنصر بعناية لتقليل التباين التجريبي وضمان الحصول على بيانات دقيقة للحصول على نتائج تصوير موثوقة فائقة الدقة.

يعرض الشكل 2 ?...

Discussion

استخدم هذا البروتوكول بنجاح ULM لإجراء تصوير فائق الدقة للأوعية الدموية الدقيقة لدماغ الفئران في الجسم الحي. بالمقارنة مع طرق التصوير الأخرى ، يستوعب ULM في نفس الوقت كلا من الدقة المكانية وعمق الاختراق. تم تصوير دماغ الفئران المكشوف بدلا من الجمجمة ، وتجنب التوهين والتشو?...

Disclosures

المؤلفون ليس لديهم ما يكشفون عنه.

Acknowledgements

تم دعم هذا العمل جزئيا من قبل البرنامج الوطني للبحث والتطوير الرئيسي في الصين بموجب المنحة 2023YFC2410903 ، والمؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (المنح 12274092 ، 12034005) ، وبرنامج المستكشف في شنغهاي (المنحة 21TS1400200) ، وبرنامج التعاون الدولي للعلوم والتكنولوجيا في شنغهاي (المنحة 24490710400) ، ومؤسسة الذكاء الاصطناعي للعلوم بجامعة فودان (Grant FudanX24AI016).

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
AlcoholDICHANGhttps://www.dehsm.com/goods-17187.html75%
Beamforming programInstitute of Biomedical Engineering at the University of MontrealMatlab Ultrasound Toolbox 3.4 version
Body temperature maintenance deviceRWD Life Science Co., Ltd.69026
Brain stereotaxic instrumentRWD Life Science Co., Ltd.71000-RAdaptable to breathing mask
Cranial Microinjection Surgical Instrument KitRWD Life Science Co., Ltd.SP0005-R
Digital microscopeRWD Life Science Co., Ltd.DOM-1001
Drug delivery catheterRWD Life Science Co., Ltd.https://www.rwdls.com/product-solutions/life-sciences/administration/draw-blood
Erythromycin ointmentRenhe PharmaH360200181% x 15 g
Gas anesthesia machineRWD Life Science Co., Ltd.R500IEIncludes breathing mask
Handheld electric clipperGUAZHOUMUMJD-DTJ02
Handheld mini cranial drillRWD Life Science Co., Ltd.78001
Indwelling needleKindly EnterpriseDevelopment Group Co., LTDPositive Pressure Model 26 G
Iodine solutionHYNAUThttps://www.hainuocn.com/index/detail/524.html4.5–5.5 g/L
IQ demodulation programInstitute of Biomedical Engineering at the University of MontrealMatlab Ultrasound Toolbox 3.4 version
IsofluraneRWD Life Science Co., Ltd.R510-22-10
MATLAB softwareMathWorksVersion R2021a
Microinjection pumpRWD Life Science Co., Ltd.R462
Sodium chloride injectionSHENG'AO animals pharmaceutical Co., Ltd.2700714600.90%
SonoVueBraccohttps://www.bracco.com/en-se/product/sonovue
Spherical drill bitRWD Life Science Co., Ltd.HM1027/HM1010
Supporting Positioning SoftwareRWD Life Science Co., Ltd.V2.0.0.30400
SyringeKindly EnterpriseDevelopment Group Co., Ltd.RWLB1 mL
Tracking programJean-Yves Tinevez2016 version
Ultrasound gelJunkang Medical Equipment Co., Ltd.Model DS-1
Ultrasound probeVERASONICS, INC.L22-14vX LF
Verasonics Ultrasound SystemVERASONICS, INC.Vantage-256ultrasound platform

References

  1. Sweeney, M. D., Ayyadurai, S., Zlokovic, B. V. Pericytes of the neurovascular unit: Key functions and signaling pathways. Nat Neurosci. 19 (6), 771-783 (2016).
  2. Wardlaw, J. M., Smith, C., Dichgans, M. Mechanisms of sporadic cerebral small vessel disease: Insights from neuroimaging. Lancet Neurol. 12 (5), 483-497 (2013).
  3. Fang, J., Wang, Z., Miao, C. -. Y. Angiogenesis after ischemic stroke. Acta Pharmacol Sin. 44 (7), 1305-1321 (2023).
  4. Zlokovic, B. V. Neurovascular pathways to neurodegeneration in Alzheimer's disease and other disorders. Nat Rev Neurosci. 12 (12), 723-738 (2011).
  5. Kane, J. R. The role of brain vasculature in glioblastoma. Mol Neurobiol. 56 (9), 6645-6653 (2019).
  6. Iadecola, C. The pathobiology of vascular dementia. Neuron. 80 (4), 844-866 (2013).
  7. Ren, B., et al. Cerebral small vessel disease: Neuroimaging features, biochemical markers, influencing factors, pathological mechanism and treatment. Front Neurol. 13, 843953 (2022).
  8. Bradley, C. P., Berry, C. Microvascular arterial disease of the brain and the heart: A shared pathogenesis. QJM. 116 (10), 829-834 (2023).
  9. Baltes, C., Radzwill, N., Bosshard, S., Marek, D., Rudin, M. Micro MRI of the mouse brain using a novel 400 MHz cryogenic quadrature RF probe. NMR Biomed. 22 (8), 834-842 (2009).
  10. Brancaccio, R., Bettuzzi, M., Morigi, M. P., Casali, F., Ragazzini, L. Image quality and dose assessment in inner ear computed tomography imaging with a flat panel-based system. J Comput Assist Tomogr. 39 (2), 232-239 (2015).
  11. Svoboda, K., Yasuda, R. Principles of two-photon excitation microscopy and its applications to neuroscience. Neuron. 50 (6), 823-839 (2006).
  12. Osmanski, B. -. F., et al. Ultrafast Doppler imaging of blood flow dynamics in the myocardium. IEEE T Med Imaging. 31 (8), 1661-1668 (2012).
  13. Rust, M. J., Bates, M., Zhuang, X. Sub-diffraction-limit imaging by stochastic optical reconstruction microscopy (storm). Nat Methods. 3 (10), 793-796 (2006).
  14. Hess, S. T., Girirajan, T. P., Mason, M. D. Ultra-high resolution imaging by fluorescence photoactivation localization microscopy. Biophys J. 91 (11), 4258-4272 (2006).
  15. Christensen-Jeffries, K., et al. Super-resolution ultrasound imaging. Ultrasound Med Biol. 46 (4), 865-891 (2020).
  16. Couture, O., Hingot, V., Heiles, B., Muleki-Seya, P., Tanter, M. Ultrasound localization microscopy and super-resolution: A state of the art. IEEE Trans Ultrason Ferroelectr Freq Control. 65 (8), 1304-1320 (2018).
  17. Demené, C., et al. Spatiotemporal clutter filtering of ultrafast ultrasound data highly increases Doppler and fUltrasound sensitivity. IEEE Trans Med Imaging. 34 (11), 2271-2285 (2015).
  18. Errico, C., et al. Ultrafast ultrasound localization microscopy for deep super-resolution vascular imaging. Nature. 527 (7579), 499-502 (2015).
  19. Banterle, N., Bui, K. H., Lemke, E. A., Beck, M. Fourier ring correlation as a resolution criterion for super-resolution microscopy. J Struct Biol. 183 (3), 363-367 (2013).
  20. Lowerison, M. R., et al. Super-resolution ultrasound reveals cerebrovascular impairment in a mouse model of Alzheimer's disease. J Neurosci. 44 (9), e1251232024 (2024).
  21. Zhang, G., et al. ULM-MBCNRT: In vivo ultrafast ultrasound localization microscopy by combining multi-branch CNN and recursive transformer. IEEE Trans Ultrason Ferroelectr Freq Control. , (2024).
  22. Zhang, G., et al. In vivo ultrasound localization microscopy for high-density microbubbles. Ultrasonics. 143, 107410 (2024).
  23. Redfors, B., Shao, Y., Omerovic, E. Influence of anesthetic agent, depth of anesthesia and body temperature on cardiovascular functional parameters in the rat. Lab Anim. 48 (1), 6-14 (2014).
  24. Lenz, C., Rebel, A., Van Ackern, K., Kuschinsky, W., Waschke, K. F. Local cerebral blood flow, local cerebral glucose utilization, and flow-metabolism coupling during sevoflurane versus isoflurane anesthesia in rats. Anesthesiology. 89 (6), 1480-1488 (1998).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

JoVE 217

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved