وأيد هذا العمل في جزء من منحة مقدمة من جمعية الاميركية لOtological CAM ، ومنحة من المركز الطبي لجامعة المستشفيات القضية إلى KNA وCAM. نود أن نشكر جيف Churney الطبية في التركيز ، وشركة مجموعة (هينكلي ، OH) لتزويدنا كاميرا المجهر. تقدم خدمات إنتاج الفيديو مجاملة من الانصهار الإبداعي ، وشركة التسويق (فالدوستا ، GA) ونحن نشكر جوناثان فرانكل واليكس ليفيت في CWRU على تعليقاتها أثناء إعداد الفيديو.

الجزء 1 : التخدير والتحضير لعملية جراحية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> شخص بالغ ، أنثى خنزير غينيا دنكان هارتلي ، من المنظمة الدولية لنهر تشارلز ، وشركة مختبرات (ويلمينغتون ، MA) هو تخدير مع الكيتامين 60 ملغ / كغ وزيلازين 12 مغ / كغ عضليا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم تطبيق مواد التشحيم البترولية للعيون لحماية الحيوانات من الإصابة القرنية بسبب التجفيف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وحلق الحيوان من أعلى الرأس إلى الكتفين وبين الأذنين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وهيأهم منطقة حلق بطريقة عقيمة الأولى مع 7.5 ٪ بوفيدون اليود ، تليها 70 ٪ إثيل الكحول. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم وضع الحيوان على جدول التشغيل مع ارتفاع درجات الحرارة وبطانية على منصة أن يرفع رأسه وتنثني الرقبة. توجه رئيس الحيوان بعيدا عن الجراح. مطلوب انثناء كافية من الرقبة ، من أجل كشف على نحو كاف الحرف القذالي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رايات هو الحيوان بطريقة عقيمة. </li></ol> 2 الجزء : شق والتعرض للقفا عظمي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بوبيفاكايين زائد الإيبينيفرين (Marcaine) يطبق 0.25 ٪ على طول شق موقع المحتملين (خط الوسط شق الجلد على طول ظهري قفا). هذا يسبب تضيق الأوعية المحلية ، مما يحد من النزيف ، ويوفر دائم بعد العمليات الجراحية للوعي بعد أن يستيقظ الحيوان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتكون خط الوسط شق الجلد الظهرية على فروة الرأس قفا على طول. <img src="/files/ftp_upload/1728/1728fig1.jpg" alt="الشكل 1" /> الشكل 1 : يتم شق الجلد على طول خط الوسط الظهرية ، كما هو مبين أعلاه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> للحصول على التعرض الكافي ، وتراجع الجلد أفقيا من خلال وضع مرقئ الصغيرة المنحنية على كل جانب من الشق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم إجراء شق أفقي على طول العضلات الرقبة لفضح قفا العظمية. في هذه المرحلة قد نشل الحيوانية على الرغم من التخدير الكافي نظرا لtransection العصب القذالي أكبر. الحبل الشوكي transection يشكل خطرا مع شق أفقي في المنطقة تحت القذال. ويمكن تجنب هذه المضاعفات عن طريق ضمان أن يشعر دائما العظام الكامنة تحت شفرة المشرط. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مع عضلات تحت القذال قطعي حتى العظم ، يستخدم مرقئ ثالث التراجع عن الحافة العلوية العضلات. ويقام هذا مرقئ وضعتها مساعد الجراحية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويستخدم المصعد Lempert سمحاقي لفضح الدرز القذالي الصدغي. </li></ol> الجزء 3 : الحفر والدرز القذالي الصدغي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عند التعرض للخياطة صدغي قذالي (الشكل 2) ، وحفر otologic مع 1.5 مم لدغ الماس يستخدم لحفر inferio - جانبيا للخياطة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الجدول أدناه الخارجي للجمجمة ، فإن نسيج إسفنجي من diploë (إن عظم إسفنجي التدخل بين الجداول من الجمجمة) تصبح مرئية. مرة واحدة وقد تم حفر diploë بعيدا ، الجدول الداخلي للجمجمة يظهر ، جنبا إلى جنب مع لون أزرق باهت وهذا هو الجيب السيني. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعرف على هامش الجيب السيني دون اختراق السفينة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بمجرد العظم المغطي للالجيب السيني ضعيفة بما فيه الكفاية ، ويستخدم أعلى التكبير ويستخدم لإزالة اختيار مستقيم بعناية العظم المغطي للالجيب السيني. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/1728/1728fig2.jpg" alt="الشكل 2" /> الرقم (2) المنطقة المراد حفر جزئيا ليعتلي الدرز القذالي الصدغي. الجزء 4 : انسداد اقنية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> هو تراجع عن الجيب السيني إعلامي هيكل عظمي لكشف الوصاد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويستخدم الماس لدغ 0.5 مم لحفر الإنسي إلى الوصاد والى كيس اللمف الباطن والقناة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> هي معبأة ثم قناة اللمف الباطن بالشمع العظام باستخدام معول على التوالي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويتعزز ذلك الخلل الجمجمة مع جلفوم (فايزر ، نيويورك ، نيويورك). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يستخدم POLYSORB 4-0 (الولايات المتحدة الجراحية ، نورواك ، CT) لجلب خياطة العضلات معا. هناك ثم الانتقال السلس إلى تقنية خياطة تحت الجلد لاغلاق شق الجلد. مع هذا الاغلاق ليس هناك حاجة لإزالة الغرز بعد ذلك وليس هناك خطر من أن الحيوان سوف مخلب في الموقع ويسحب الخيط. </li></ol> الجزء 5 : الرعاية بعد العملية يتم وضع خنزير غينيا في حاضنة للحفاظ على درجة حرارة الجسم ودققت في 30 دقيقة حتى فترات اليقظة والقدرة على الحفاظ على موقف القصية. ويتم تفتيش للحيوان لمعدل التنفس ولون الجسم. يستخدم هذا المركز enrofloxacin (0.2 مل على 22.7 ملغ / مل ، تحت الجلد) والبوبرينورفين (0.05 مل في 0.3mg/mL ، تحت الجلد) للوقاية من العدوى بعد العمليات الجراحية ، والسيطرة على الألم ، على التوالي. يعطى مسكن مرة واحدة في اليوم لعملية جراحية ، ومرتين في ما بعد الجراحة ليوم واحد واثنين. على الرغم من أن المضادات الحيوية ليست ضرورية لسو العقيمقد rgery ، لمدة خمسة أيام ، مرتين في اليوم بالطبع من المضادات الحيوية الوقائية givenonce تكون على بعد العملية لمدة ثلاثة أيام. مضاعفات والإدارة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الاكتئاب الجهاز التنفسي يجب على الجراح أن يكون دائما على علم الحيوان التنفس ق. إذا تبطئ أو توقف عن التنفس ، ووقف عملية جراحية وفحص البصر للحركة الصدرية. إذا كان الحيوان يعاني من صعوبة في التنفس أو صعوبة في التنفس ، والتحقق من عدم المغطي الفم والتنفس. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> توقفت السيني استخدم الاختراق جلفوم ضغط الجيوب الأنفية وجنبا إلى جنب مع طرف حتى شفط النزيف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اختراق الغلاف السحائي العيب مع جلفوم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لا ضرر الدهليزي حفر أكثر من 1 ملم الوحشي على الجيب السيني. بذلك مخاطر اصابة القناة الهلالية الخلفي ، الأمر الذي يبطل جميع البيانات عن خنزير غينيا. </li></ol>

<ol>
	<li>Andrews, J. C., Bohmer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+surgical+approach+to+the+endolymphatic+sac+and+the+cochlear+aqueduct+in+the+guinea+pig.">The surgical approach to the endolymphatic sac and the cochlear aqueduct in the guinea pig.</a> Am J Otolaryngol. 10, 61-66 (1989).</li><li>Kimura, R., Schuknecht, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Membranous+hydrops+in+the+inner+ear+of+the+guinea+pig+after+obliteration+of+the+endolymphatic+sac.">Membranous hydrops in the inner ear of the guinea pig after obliteration of the endolymphatic sac.</a> Pract Otolaryngol. , (1965).</li></ol>

وقد أجريت تجارب على الحيوانات وفقا للمبادئ التوجيهية واللوائح التي وضعتها المؤسسات ورعاية الحيوان في لجنة استخدام بلوغ جامعة كيس ويسترن.

في الأسابيع التالية عرقلة الجراحي للقناة اللمف الباطن ، موضوع التجارب الحيوانية تقلب فقدان السمع الحسي العصبي كما تقاس استجابة جذع الدماغ السمعية أثار. يظهر عينة من الدماغ السمعية تسجيل (ABR) الاستجابة في الشكل 3. الأذن اليسرى بمثابة تحكم unoperated. <a href="https://www.jove.com/files...

surgical induction of endolymphatic hydrops by obliteration of the endolymphatic duct

الحث الجراحية للموه اللمف الباطن (ELH) في خنزير غينيا الطمس وانسداد اقنية اللمف الباطن هو نموذج حيواني مقبولة تماما للحالة وهامة لربط الأمراض التي تصيب البشر مينيير. في عام 1965 ، وروبرت كيمورا Schuknecht هارولد وصف لأول مرة هذا النهج داخل الجافية للعرقلة من قناة اللمف الباطن (كيمورا 1965). على الرغم من فعالية ، تكبدت هذه التقنية ، الأمر الذي يتطلب اختراق تغطي الدماغ واقية ، وهو مستوى غير مرغوب فيه في معدلات الاعتلال والوفيات في المواد الحيوانية. وبالتالي ، وضع أندروز وبومر نهج الجافية ، والتي تنتج أقل متوقعا من المضاعفات المرتبطة بالجهاز العصبي المركزي (CNS) اختراق (اندروز وبومر 1989) وصف نهج الجافية هنا يتطلب أولا شق خط الوسط في منطقة قفا لفضح طبقة الكامنة في العضلات. نعمل فقط على الجانب الأيمن. بعد تراجع المناسبة من النسيج المغطي ، يتم إجراء شق أفقي في الجهاز العضلي للقفا الحق في فضح الحق خط الدرز القذالي الصدغي. عظم inferio فورا ، ثم حفر الأفقي هو خط الدرز (الشكل رقم 1) مع حفر otologic حتى الجيب السيني تصبح مرئية. تراجع وسطي للالجيب السيني يكشف الوصاد من قناة اللمف الباطن ، الذي يضم كيس اللمف الباطن. حفر الإنسي إلى الوصاد في منطقة كيس اللمف الباطن يكشف عن قناة اللمف الباطن ، والتي هي معبأة ثم مع الشمع لإنتاج العظام وعرقلة ELH في نهاية المطاف. في الأسابيع التالية ، وسوف تثبت الحيوان التقدمية ، وفقدان السمع متقلبة والأدلة نسيجية من ELH.

Watch this Scientific Journal Video about Surgical Induction of Endolymphatic Hydrops by Obliteration of the Endolymphatic Duct at JoVE.com

Surgical Induction of Endolymphatic Hydrops by Obliteration of the Endolymphatic Duct

هذا الفيديو يوضح كيفية عرقلة جراحيا قناة الخنزير غينيا اللمف الباطن لإنتاج موه اللمف الباطن.

الجراحية تحريض موه اللمف الباطن عن طريق محو القناة اللمف الباطن

Surgical induction of endolymphatic hydrops (ELH) in the guinea pig by obliteration and obstruction of the endolymphatic duct is a well-accepted animal ...

surgical-induction-endolymphatic-hydrops-obliteration-endolymphatic

Research

JoVE Journal

Biology

11.3K Views.  Case Western Reserve University. هذا الفيديو يوضح كيفية عرقلة جراحيا قناة الخنزير غينيا اللمف الباطن لإنتاج موه اللمف الباطن.

Video: Surgical Induction of Endolymphatic Hydrops by Obliteration of the Endolymphatic Duct

Imaging Effector Memory T cells in the Ear After Induction of Adoptive DTH

Delayed type hypersensitivity (DTH) is an immune reaction in which the main players are CCR7- effector / memory T lymphocytes. Here, we demonstrate a method for inducing and recording the progress of a DTH reaction in the rat ear. This is followed by a demonstration of the preparation of rat ear tissue for two-photon imaging of the CCR7- effector / memory T cell response.
An adoptive DTH is induced by the intraperitoneal injection of GFP-labeled Ova-specific CCR7- effector / memory T cell line (Beeton, C J. Visualized Experiments, Issue 8). Cells are then allowed to equilibrate in the rat for 48 hours before challenge by injecting one ear with saline (control ear) and the other with a 1:1 mix of Ova and Ova conjugated to Texas-Red (Ova-TR) to allow visualization of resident antigen-presenting cells.
We describe a method of tissue preparation useful for imaging the motility of cells within the deep dermal layer during an immune response, in conjunction with visualization of collagen fibers by second harmonic generation. Ear tissue is cut into 5 x 5 mm squares (slightly larger is better) and mounted onto plastic cover slips using Vetbond&trade;, which are then secured using silicone grease in an imaging chamber and superfused by oxygen-bubbled tissue culture medium at 37&deg;C.

Here we demonstrate a method for inducing and recording the progress of a delayed type-hypersensitivity (DTH) reaction in the rat ear. This is followed by a demonstration of the preparation of rat ear tissue for two-photon imaging of the effector / memory T cell response.

التصوير T الذاكرة المستجيب الخلايا في الأذن بعد تحريض DTH بالتبني

Delayed type hypersensitivity (DTH) is an immune reaction in which the main players are CCR7- effector / memory T lymphocytes. Here, we demonstrate a ...

Assay for Neural Induction in the Chick Embryo

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ideal tool for studying the formation and initial patterning of the nervous system. This video demonstrates how to graft organizer tissue into a host, a method by which Hensen s node (the organizer in the chick embryo) is grafted to a host competent ectoderm. The organizer graft instructs overlying na ve tissue to adopt a neural fate via neural inducing signals. This mechanism is referred to as neural induction, and constitutes the initial step in the formation of brain and spinal cord in amniotes. This method is essentially used for the characterization of putative neural inducing molecules in chick. This video demonstrates the different steps in the assay for neural induction; First, the donnor embryo is explanted and pinned on a dish. Then, the host embryo is prepared for New culture. The graft is excised and transplanted to the host area pellucida margin. The host is cultured for 18-22 hrs. The assembly is fixed and processed for further applications (e.g. in situ hybridization). This method was originally devised by Waddington 1,2 and Gallera 3,4.

Neural induction is the first step in the formation of the brain. It is a mechanism by which Hensen's node (organizer), instructs adjacent tissue to adopt a neural fate, i.e. to give rise to the nervous system. This video demonstrates an assay for neural induction in chick embryo.

مقايسة لتحريض العصبية في الأجنة الفرخ

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

Microsurgical Clip Obliteration of Middle Cerebral Aneurysm Using Intraoperative Flow Assessment

Cerebral aneurysms are abnormal widening or ballooning of a localized segment of an intracranial blood vessel.  Surgical clipping is an important treatment for aneurysms which attempts to exclude blood from flowing into the aneurysmal segment of the vessel while preserving blood flow in a normal fashion.  Improper clip placement may result in residual aneurysm with the potential for subsequent aneurysm rupture or partial or full occlusion of distal arteries resulting in cerebral infarction.  Here we describe the use of an ultrasonic flow probe to provide quantitative evaluation of arterial flow before and after microsurgical clip placement at the base of a middle cerebral artery aneurysm.  This information helps ensure adequate aneurysm reconstruction with preservation of normal distal blood flow.

Description of the surgical obliteration of a cerebral aneurysm utilizing an ultrasonic flow probe to assess arterial flow prior to and after aneurysm clip placement.

المجهرية طمس كليب من تمدد الأوعية الدموية الدماغية الأوسط عن طريق جراحة داخلية تقييم التدفق

Cerebral aneurysms are abnormal widening or ballooning of a localized segment of an intracranial blood vessel.  Surgical clipping is an important ...

Isolation of Basal Cells and Submucosal Gland Duct Cells from Mouse Trachea

The large airways are directly in contact with the environment and therefore susceptible to injury from toxins and infectious agents that we breath in 1. The large airways therefore require an efficient repair mechanism to protect our bodies. This repair process occurs from stem cells in the airways and isolating these stem cells from the airways is important for understanding the mechanisms of repair and regeneration. It is also important for understanding abnormal repair that can lead to airway diseases 2. The goal of this method is to isolate a novel stem cell population from the mouse tracheal submucosal gland ducts and to place these cells in in vitro and in vivo model systems to identify the mechanisms of repair and regeneration of the submucosal glands 3. This production shows methods that can be used to isolate and assay the duct and basal stem cells from the large airways 3.This will allow us to study diseases of the airway, such as cystic fibrosis, asthma and chronic obstructive pulmonary disease. Currently, there are no methods for isolation of submucosal gland duct cells and there are no in vivo models to study the regeneration of submucosal glands.

Here we demonstrate our protocol for isolation of basal and submucosal gland duct cells from mouse tracheas. We also demonstrate the method of injecting stem cells into the dorsal mouse fat pad to create an in vivo model of submucosal gland regeneration.

عزل الخلايا القاعدية والخلايا تحت المخاطية قناة الغدة من القصبة الهوائية ماوس

The large airways are directly in contact with the environment and therefore susceptible to injury from toxins and infectious agents that we breath in 1. ...

Culturing Primary Rat Inner Medullary Collecting Duct Cells

Arginine-vasopressin (AVP) facilitates water reabsorption by renal collecting duct principal cells and thereby fine-tunes body water homeostasis. AVP binds to vasopressin V2 receptors (V2R) on the surface of the cells and thereby induces synthesis of cAMP. This stimulates cellular signaling processes leading to changes in the phosphorylation of the water channel aquaporin-2 (AQP2). Protein kinase A phoshorylates AQP2 and thereby triggers the translocation of AQP2 from intracellular vesicles into the plasma membrane facilitating water reabsorption from primary urine. Aberrations of AVP release from the pituitary or AVP-activated signaling in principal cells can cause central or nephrogenic diabetes insipidus, respectively; an elevated blood plasma AVP level is associated with cardiovascular diseases such as chronic heart failure and the syndrome of inappropriate antidiuretic hormone secretion.
Here, we present a protocol for cultivation of primary rat inner medullary collecting duct (IMCD) cells, which express V2R and AQP2 endogenously. The cells are suitable for elucidating molecular mechanisms underlying the control of AQP2 and thus to discover novel drug targets for the treatment of diseases associated with dysregulation of AVP-mediated water reabsorption. IMCD cells are obtained from rat renal inner medullae and are used for experiments six to eight days after seeding. IMCD cells can be cultured in regular cell culture dishes, flasks and micro-titer plates of different formats, the procedure only requires a few hours, and is appropriate for standard cell culture laboratories.

Arginine-vasopressin (AVP) controls fine-tuning of body water homeostasis through facilitating water reabsorption by renal principal cells. Here, we present a protocol for the cultivation of primary rat inner medullary collecting duct cells suitable for the elucidation of molecular mechanisms underlying AVP-mediated water reabsorption.

زراعة النخاع الابتدائية الجرذ الداخلية جمع خلايا القناة

Arginine-vasopressin (AVP) facilitates water reabsorption by renal collecting duct principal cells and thereby fine-tunes body water homeostasis. AVP ...

Induction and Analysis of Epithelial to Mesenchymal Transition

Epithelial to mesenchymal transition (EMT) is essential for proper morphogenesis during development. Misregulation of this process has been implicated as a key event in fibrosis and the progression of carcinomas to a metastatic state. Understanding the processes that underlie EMT is imperative for the early diagnosis and clinical control of these disease states. Reliable induction of EMT in vitro is a useful tool for drug discovery as well as to identify common gene expression signatures for diagnostic purposes. Here we demonstrate a straightforward method for the induction of EMT in a variety of cell types. Methods for the analysis of cells pre- and post-EMT induction by immunocytochemistry are also included. Additionally, we demonstrate the effectiveness of this method through antibody-based array analysis and migration/invasion assays.

A straightforward method is described for the induction of epithelial to mesenchymal transition (EMT) in a variety of cell types. Methods for the analysis of cells in EMT states by immunocytochemistry are included.

الاستقراء وتحليل الظهارية الوسيطة الانتقالية ل

Epithelial  to mesenchymal transition (EMT) is essential for proper morphogenesis during  development. Misregulation of this  process has been implicated ...

Isolation of Human Hepatocytes by a Two-step Collagenase Perfusion Procedure

The liver, an organ with an exceptional regeneration capacity, carries out a wide range of functions, such as detoxification, metabolism and homeostasis. As such, hepatocytes are an important model for a large variety of research questions. In particular, the use of human hepatocytes is especially important in the fields of pharmacokinetics, toxicology, liver regeneration and translational research. Thus, this method presents a modified version of a two-step collagenase perfusion procedure to isolate hepatocytes as described by Seglen 1.
Previously, hepatocytes have been isolated by mechanical methods. However, enzymatic methods have been shown to be superior as hepatocytes retain their structural integrity and function after isolation. This method presented here adapts the method designed previously for rat livers to human liver pieces and results in a large yield of hepatocytes with a viability of 77&plusmn;10%. The main difference in this procedure is the process of cannulization of the blood vessels. Further, the method described here can also be applied to livers from other species with comparable liver or blood vessel sizes.

A modified two-step collagenase perfusion procedure for isolation of human hepatocytes is described. This method can also be applied to other mammalian livers. The isolated hepatocytes are available in high yield and viability, making them a suitable model for scientific research in areas such as liver regeneration, pharmacokinetics and toxicology.

عزل خلايا الكبد البشرية من قبل خطوتين كولاجيناز الإرواء الداخلي

The liver, an organ with an exceptional regeneration capacity, carries out a wide range of functions, such as detoxification, metabolism and homeostasis. ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) maintain the turnover of all mature blood cell lineages. The coordination of the complex signals leading to specific HSC fates relies upon the interaction between HSCs and the intricate bone marrow microenvironment, which is still poorly understood[1-2].
We describe how by combining a newly developed specimen holder for stable animal positioning with multi-step confocal and two-photon in vivo imaging techniques, it is possible to obtain high-resolution 3D stacks containing HSPCs and their surrounding niches and to monitor them over time through multi-point time-lapse imaging. High definition imaging allows detecting ex vivo labeled hematopoietic stem and progenitor cells (HSPCs) residing within the bone marrow. Moreover, multi-point time-lapse 3D imaging, obtained with faster acquisition settings, provides accurate information about HSPC movement and the reciprocal interactions between HSPCs and stroma cells.
Tracking of HSPCs in relation to GFP positive osteoblastic cells is shown as an exemplary application of this method. This technique can be utilized to track any appropriately labeled hematopoietic or stromal cell of interest within the mouse calvarium bone marrow space.

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

The nature of the interactions between hematopoietic stem and progenitor cells (HSPCs) and bone marrow niches is poorly understood. Custom hardware modifications and a multi-step acquisition protocol allow the use of two-photon and confocal microscopy to image ex vivo labeled HSPCs homed within bone marrow areas, tracking interactions and movement.

في فيفو تتبع 4 الأبعاد للالجذعية المكونة للدم والسلف الكبار في خلايا الفأر قبي نخاع العظم

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Fecal Glucocorticoid Analysis: Non-invasive Adrenal Monitoring in Equids

Adrenal activity can be assessed in the equine species by analysis of feces for corticosterone metabolites. During a potentially aversive situation, corticotrophin releasing hormone (CRH) is released from the hypothalamus in the brain. This stimulates the release of adrenocorticotrophic hormone (ACTH) from the pituitary gland, which in turn stimulates release of glucocorticoids from the adrenal gland. In horses the glucocorticoid corticosterone is responsible for several adaptations needed to support equine flight behaviour and subsequent removal from the aversive situation. Corticosterone metabolites can be detected in the feces of horses and assessment offers a non-invasive option to evaluate long term patterns of adrenal activity. Fecal assessment offers advantages over other techniques that monitor adrenal activity including blood plasma and saliva analysis. The non-invasive nature of the method avoids sampling stress which can confound results. It also allows the opportunity for repeated sampling over time and is ideal for studies in free ranging horses. This protocol describes the enzyme linked immunoassay (EIA) used to assess feces for corticosterone, in addition to the associated biochemical validation.

Adrenal activity can be assessed in the equine species by analysis of feces for corticosterone metabolites. The method offers a non-invasive option to assess long term patterns in both domestic and free ranging horses. This protocol describes the enzyme linked immunoassay involved and the associated biochemical validation.

برازي تحليل جلايكورتيكود: رصد الغدة الكظرية غير الغازية في الخيليات

Adrenal activity can be assessed in the equine species by analysis of feces for corticosterone metabolites. During a potentially aversive situation, ...

Partial Bile Duct Ligation in the Mouse: A Controlled Model of Localized Obstructive Cholestasis

In rodents, complete bile duct ligation (cBDL) of the common bile duct is an established surgical technique for studying obstructive cholestasis and bile duct proliferation. However, long-term experiments can lead to increased morbidity and mortality. In select mouse strains with underlying liver disease, meaningful comparisons can be made even with ligation of a single lobe of the liver, which can reduce animal losses and expenses. Here, we describe partial bile duct ligation (pBDL) in the mouse, in which only the left hepatic bile duct is ligated, causing biliary obstruction in the left lobe but not the remaining lobes. With careful microsurgical technique, pBDL experiments can be cost-effective, since the unligated lobe serves as an internal control to the ligated lobes, when subjected to the same conditions in the same animal. Unlike cBDL, a separate sham-operated control group is not necessary. pBDL is highly useful to directly compare localized versus systemic effects of cholestasis and other retained bile components. pBDL can also be repurposed as a novel method to investigate mechanisms related to medications and cell migration.

Here, we present partial bile duct ligation as a surgical model of liver injury and regeneration in rodents.

ربط القناة الصفراوية الجزئي في الماوس: نموذج الخاضعة لركود صفراوي معرقلة مترجمة

In rodents, complete bile duct ligation (cBDL) of the common bile duct is an established surgical technique for studying obstructive cholestasis and bile ...