نحن ممتنون للمساعدة الدكتور شينيو لى في إعداد المخطوطة. وأيد SW من صندوق بدء التشغيل من جامعة تولين، مجلس البحوث جائزة الباحث جديد الرئيس من مركز UT ساوث ويسترن الطبي، المعاهد الوطنية للصحة منح EY021862، وهي جائزة التطوير الوظيفي من البحوث لمنع الأساس العمى، وجائزة برايت التركيز في السن المتصلة تحلل البقعة الصفراء البحوث .

ملاحظة: بروتوكول التالية ونتائج ممثلة استخدام مثبط HDAC ساها باعتبارها مركب سبيل المثال. ومع ذلك، وهذا البروتوكول هو بأي حال من الأحوال تقتصر على استخدام ساها، وينصح كأسلوب عام لاختبار آثار المركبات القابلة للذوبان على اتساع الأوعية الدموية القرنية. سوف تحتاج إلى تعديلات طفيفة يتم للحصول على درجة من التخفيف وكذلك تواتر ومدة التطبيق. بالإضافة إلى ذلك، سوف المركبات القابلة للذوبان في الماء بسهولة تكون قادرة على أن تدار في غياب DMSO. بيان الأخلاقية: يجب فقط أن يتم تنفيذ جميع التجارب على الحيوانات وفقا للقانون واللوائح الوطنية المؤسسية. تمت الموافقة على هذا البروتوكول للاستخدام من قبل جامعة تولين المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام اللجنة. 1. إعداد مواد (في ترتيب الاستخدام) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع قطعة من ورق الترشيح السليلوز (11 ميكرون) إلى 2 ملم الدوائر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد محلول هيدروكسيد الصوديوم 1 M من قبلحل 20 غرام من هيدروكسيد الصوديوم في 500 مل المقطر H 2 O. تخزين في درجة حرارة الغرفة. تنبيه: حلول هيدروكسيد الصوديوم هي تآكل ويمكن أن يسبب حروق القلويات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد كوكتيل مخدر عن طريق تمييع 10 مل من 100 ملغ / مل الكيتامين و 2.5 مل من 20 ملغ / مل في زيلازين 37.5 مل من برنامج تلفزيوني 1X لتركيز النهائي من 20 ملغ / مل الكيتامين و 4 ملغ / مل زيلازين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد محلول 0.5٪ من بروباراكايين هيدروكلوريد (لتسكين موضعي) عن طريق إذابة 500 ملغ من هيدروكلوريد بروباراكايين في 100 مل من برنامج تلفزيوني تصفيتها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد برنامج تلفزيوني 1X عن طريق إذابة 8 ز كلوريد الصوديوم، 0.2 غرام من بوكل، 1.44 ز نا 2 هبو 4، و 0.23 غرام من ناه 2 ص 4 في 900 مل من H 2 O. المقطر ضبط الرقم الهيدروجيني إلى 7.4. تجلب الحل إلى الحجم النهائي من 1،000 مل مع المقطر H 2 O ومرشح لضمان العقم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد 1،000 خ حلول المخزون من ساها في ~ 100 ملم في سلفوكسيد ثنائي ميثيل (DMSO) عن طريق إذابة 26.4 ملغ من ساها في 1 مل من DMSO. تمييع ل1X (~ 10 ميكرومتر)الحل في برنامج تلفزيوني لتصفية كل استخدام. تخزين الحل السهم عند -20 درجة مئوية لمدة تصل إلى شهر واحد. تنبيه: DMSO هو السم المعروف والمغير. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد محلول 4٪ من بارافورمالدهيد (PFA) لتثبيت. تحت غطاء الكيميائية، ويحل 4 غرام من PFA في 90 مل من برنامج تلفزيوني. جلب الخليط إلى 65 درجة مئوية ويعاير إلى الرقم الهيدروجيني من 7.4. مرة واحدة وقد حل PFA، وجلب الحل إلى الحجم النهائي من 100 مل. تخزين عند 4 درجة مئوية لمدة تصل إلى شهر واحد. تنبيه: PFA هو المعروف أن الحساسية المسببة للسرطان، والسامة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد عازلة تمنع 1X عن طريق تمييع 5 مل من مصل الماعز و 500 من المجاهدين تريتون X-100 في 94.5 مل من برنامج تلفزيوني. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد 1X العازلة الغسيل عن طريق تمييع 500 من المجاهدين تريتون X-100 في 99.5 مل من برنامج تلفزيوني. </li></ol> 2. القلويات حرق الإصابات ومجمع العلاج <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بلل قطعة مستديرة من ورق الترشيح، ~ 2 مم في القطر، في حل من هيدروكسيد الصوديوم M 1. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الفأر مع حقنة من 100 ملغ / كغ الكيتامين و 5 ملغ / كغ زيلازين، ذوي الخوذات البيضاءالتراث الثقافى المعنوى هو ~ 100 ميكرولتر من مخدر كوكتيل من الخطوة 1.3 لكل 25 غرام الماوس. التخدير يجب أن تأخذ ~ 1-2 دقيقة لتعيين بوصة عمق التخدير قد يحددها معسر بلطف أخمص القدمين أو ذيل الحيوان، إذا التخدير كافية وينبغي أن يكون هناك أي رد. ملاحظة: يجب توخي الحذر لضمان الماوس لا تستسلم للتخدير يسببها انخفاض حرارة الجسم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام شافطة، وتطبيق موضعيا قطرة من 0.5٪ بروباراكايين هيدروكلوريد على سطح القرنية لتسكين المحلية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام ملقط معقم، والتقاط قطعة من ورق الترشيح هيدروكسيد الصوديوم غارقة. إذا لاحظت الزائدة هيدروكسيد الصوديوم أو التشبث يقطر من ورقة الترشيح، اضغط لفترة وجيزة ورقة الترشيح غارقة على قطعة جافة من ورق الترشيح لامتصاص الزائد. وضع قطعة من ورق الترشيح هيدروكسيد الصوديوم غارقة في القرنية المركزية. اتركه لمدة 30 ثانية لتوليد حرق القلويات الحادة من ~ 2 × 2 مم 2 في المنطقة. الميكروسكوب الجراحي مفيد في وضع صحيح ورقة الترشيح. ملاحظة: عين واحدة فقط من ليالي الماوسيكون اصيب hould معها مع الآخر بمثابة السيطرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة ورقة الترشيح. باستخدام حقنة 10 مل، مسح بلطف العين مع 10 مل من برنامج تلفزيوني 1X مرتين ليغسل المتبقية 1 M هيدروكسيد الصوديوم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبق على الفور قطرة من 1X ساها الحل تعمل (أو السيطرة على السيارة التي تتألف من برنامج تلفزيوني المخفف DMSO لا تحتوي على ساها) موضعيا على القرنية. تكرار 3x/day التطبيق لمدة 14 يوما. ملاحظة: خلال هذه الفترة لا ينصح مرهم مضاد حيوي موضعي لأنها قد تتداخل مع تطور الإصابة وتسليم المجمع. استخدام المضادات الحيوية حل السائل، مثل 3٪ جنتاميسين الحل، بدلا من ذلك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الانتقال مباشرة إلى التقييم السريري (بروتوكول 3 أدناه) أو التضحية الماوس واستأصل العينين لالقرنية مسطحة جبل (البروتوكول 4 أدناه) أو التقليدية البارافين / الأنسجة المجمدة. </li></ol> 3. التقييم السريري <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجراء فحص اليومي من الفئران بطريقة أعمى تحت المجهر الجراحي ويسجل جorneal NV على أساس عتامة القرنية، NV، وحجم السفينة. استخدام اثنين على الأقل من المراقبين وتسجيل النتيجة النهائية وهذا هو المتوسط ​​من الاثنين. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يسجل عتامة القرنية على مقياس من 0-4. 0 = واضحة تماما؛ 1 = ضبابي قليلا، قزحية والتلميذ مرئية بسهولة؛ 2 = مبهمة قليلا، قزحية والتلميذ لا يزال كشفها؛ 3 = مبهمة، والتلاميذ بالكاد يمكن كشفها؛ و4 = مبهمة تماما مع أي رأي للتلميذ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يسجل NV على مقياس من 0-3. 0 = لا neovessels؛ 1 = neovessels في حوف القرنية؛ 2 = neovessels تمتد حوف القرنية والاقتراب من مركز القرنية؛ 3 = neovessels تمتد وسط القرنية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يسجل حجم السفينة على مقياس من 0-3. 0 = لا neovessels؛ 1 = neovessels كشفها تحت المجهر الجراحي؛ 2 = neovessels رؤيتها بسهولة تحت المجهر الجراحي؛ 3 = neovessels ينظر اليه بسهولة دون المجهر. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام كاميرا رقمية، والتقاط الصور ممثل العين في 7 أيام و 14 يوما. </li></ol> 4.القرنية تلطيخ وشقة الجبال <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إصلاح العين منزوعة النواة في PFA 4٪ لمدة 1 ساعة على الأقل في 4 درجات مئوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل العين إلى برنامج تلفزيوني 1X واستخدام الملقط لإزالة الأنسجة الزائدة بعناية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مع المعونة من الميكروسكوب الجراحي، واستخدام إبرة (قياس 18) أو الجزئي سكين لخرم المنطقة المحيطة بالقرنية من العين (ملاحظة: هذا يجب إصدار السائل من العين). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> من ثقب المحرز في القسم 4.3.1 استخدام زوج من مقص جراحي لقطع الجزء الأمامي من العين (القرنية) من الجزء الخلفي. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل القرنية مرة أخرى في PFA 4٪ بين عشية وضحاها لتثبيت في 4 درجات مئوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تجاهل PFA 4٪ (تنبيه: PFA خطرة ويجب التخلص منها وفقا للأنظمة المؤسسية) وشطف القرنية ثلاث مرات مع برنامج تلفزيوني 1X لإزالة أي PFA المتبقية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> احتضان في عرقلة العازلة 1X لا يقل عن 2 ساعة في درجة حرارة الغرفة لpermeabilize الأنسجة ومنع ملزم غير محدد من الأجسام المضادة الأولية. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق الأجسام المضادة الأولية في 1X العازلة حظر، في التخفيف 100-500 أضعاف. (مثل الفئران لمكافحة فأر PECAM-1-للكشف عن الأوعية الدموية في 1:100، أرنب المضادة للماوس-LYVE-1 للكشف عن الأوعية اللمفاوية في 1:500، و / أو anti-mouse-F4/80 الفئران للكشف عن الضامة في 1:100). احتضان عند 4 درجات مئوية خلال الليل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يغسل ست مرات مع 1X العازلة الغسيل لمدة 1 ساعة في كل مرة في درجة حرارة الغرفة لإزالة الأجسام المضادة الأولية غير منضم بالكامل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق الضد الثانوية في 1X العازلة حظر على 500-1،000 التخفيف أضعاف. (على سبيل المثال 488 نانومتر الفلورسنت الموسومة الماعز المضادة للمفتش الجرذان في 1:800 أو الفلورسنت 594 نانومتر الموسومة الماعز المضادة للأرنب مفتش في 1:800). احتضان عند 4 درجات مئوية خلال الليل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يغسل ثلاث مرات مع برنامج تلفزيوني 1X لمدة 1 ساعة في درجة حرارة الغرفة كل لإزالة الأجسام المضادة الثانوية بالكامل غير منضم. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل القرنية في برنامج تلفزيوني 1X الطازجة و، بمساعدة الميكروسكوب الجراحي، وجعل بعناية أربعة شقوق من المحيط نحو المائةإيه. وهذا ينبغي تقسيم القرنية إلى أربعة أجزاء متساوية في الحجم تقريبا (الشكل الناتج ينبغي أن ننظر بدلا مثل فراشة) والسماح لها الاستلقاء على الشريحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جبل مع تصاعد المناسبة المتوسطة للتصوير الفلورسنت. للحصول على أفضل النتائج، يجب أن يمكن تصوير العينات فورا وأخذ الصور الرقمية، ولكن يمكن تخزينها لعدة أسابيع محمية من الضوء في 4 درجات مئوية. </li></ol>

<ol>
	<li>Pascolini, D., Mariotti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+estimates+of+visual+impairment.">Global estimates of visual impairment.</a> Br. J. Ophthalmol. 96 (5), 614-618 (2010).</li><li>Whitcher, J., Srinivasan, M., Upadhyay, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+Blindness:+A+Global+Perspective.">Corneal Blindness: A Global Perspective.</a> Bull. World Health Org. 79 (3), 214-221 (2003).</li><li>Gupta, D., Illingworth, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatments+for+corneal+neovascularization:+a+review.">Treatments for corneal neovascularization: a review.</a> Cornea. 30 (8), 927-938 (2011).</li><li>Cursiefen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Consensus+statement+on+indications+for+anti-angiogenic+therapy+in+the+management+of+corneal+diseases+associated+with+neovascularisation:+outcome+of+an+expert+roundtable.">Consensus statement on indications for anti-angiogenic therapy in the management of corneal diseases associated with neovascularisation: outcome of an expert roundtable.</a> Br. J. Ophthalmol. 96 (1), 3-9 (2012).</li><li>Delmonte, D., Kim, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomy+and+Physiology+of+the+Cornea.">Anatomy and Physiology of the Cornea.</a> J. Cataract Refract. Surg. 37 (3), 588-598 (2011).</li><li>Cursiefen, C., Seitz, B., Dana, M. R., Streilein, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiogenesis+and+lymphangiogenesis+in+the+cornea.+Pathogenesis,+clinical+implications+and+treatment+options.">Angiogenesis and lymphangiogenesis in the cornea. Pathogenesis, clinical implications and treatment options.</a> Der Ophthalmologe. 100 (4), 292-229 (2003).</li><li>Chang, J., Gabison, E., Kato, T., Azar, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+Neovascularization.">Corneal Neovascularization.</a> Curr. Opin Ophthalmol. 12 (4), 242-249 (2001).</li><li>Ambati, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+Avascularity+is+due+to+Soluble+VEGF+Receptor-1.">Corneal Avascularity is due to Soluble VEGF Receptor-1.</a> Nature. 443 (7114), 993-997 (2006).</li><li>Cursiefen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=VEGF-A+Stimulates+Lymphangiogenesis+and+Hemangiogenesis+in+Inflammatory+Neovascularization+via+Macrophage+Recruitment.">VEGF-A Stimulates Lymphangiogenesis and Hemangiogenesis in Inflammatory Neovascularization via Macrophage Recruitment.</a> J. Clin. Invest. 113 (7), 1040-1050 (2004).</li><li>Jiri, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paper+Strips+and+Rings+as+Simple+Tools+for+Standardization+of+Experimental+Eye+Injuries.">Paper Strips and Rings as Simple Tools for Standardization of Experimental Eye Injuries.</a> Ophthal. Res. 1975 (7), 363-367 (2009).</li><li>Ormerod, L., Abelson, M., Kenyon, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standard+Models+of+Corneal+Injury+Using+Alkali-Immersed+Filter+Discs+Invest.">Standard Models of Corneal Injury Using Alkali-Immersed Filter Discs Invest.</a> Ophthalmol. Vis. Sci. 30 (10), 2148-2153 (1989).</li><li>Saika, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+effects+of+adenoviral+gene+transfer+of+bone+morphogenic+protein-7+on+a+corneal+alkali+injury+model+in+mice.">Therapeutic effects of adenoviral gene transfer of bone morphogenic protein-7 on a corneal alkali injury model in mice.</a> Lab. Invest. 85 (4), 474-486 (2005).</li><li>Ferrari, G., Bignami, F., Giacomini, C., Franchini, S., Rama, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+and+efficacy+of+topical+infliximab+in+a+mouse+model+of+ocular+surface+scarring.">Safety and efficacy of topical infliximab in a mouse model of ocular surface scarring.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 54 (3), 1680-1688 (2013).</li><li>Sosne, G., Christopherson, P., Barrett, R., Fridman, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thymosin-beta4+modulates+corneal+matrix+metalloproteinase+levels+and+polymorphonuclear+cell+infiltration+after+alkali+injury.Invest.">Thymosin-beta4 modulates corneal matrix metalloproteinase levels and polymorphonuclear cell infiltration after alkali injury.Invest.</a> Ophthalmol. Vis. Sci. 46 (7), 2388-2395 (2005).</li><li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+Multiple+Pathogenic+Pathways+by+Histone+Deacetylase+Inhibitor+SAHA+in+a+Corneal+Alkali-Burn+Injury+Model.">Inhibition of Multiple Pathogenic Pathways by Histone Deacetylase Inhibitor SAHA in a Corneal Alkali-Burn Injury Model.</a> Mol. Pharm. 10 (1), 307-318 (2013).</li><li>Yoeruek, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety,+penetration+and+efficacy+of+topically+applied+bevacizumab:+evaluation+of+eyedrops+in+corneal+neovascularization+after+chemical+burn.">Safety, penetration and efficacy of topically applied bevacizumab: evaluation of eyedrops in corneal neovascularization after chemical burn.</a> Acta Ophthalmol. 86 (3), 322-328 (2008).</li><li>Bucher, F., Parthasarathy, A., Bergua, A., Onderka, J., Regenfu&#223;, B., Cursiefen, C., Bock, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topical+Ranibizumab+inhibits+inflammatory+corneal+hem-+and+lymphangiogenesis.">Topical Ranibizumab inhibits inflammatory corneal hem- and lymphangiogenesis.</a> Acta Ophthalmol. , (2012).</li><li>Hajrasouliha, A., Sadrai, Z., Chauhan, S., Dana, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=b-FGF+induces+corneal+blood+and+lymphatic+vessel+growth+in+a+spatially+distinct+pattern.">b-FGF induces corneal blood and lymphatic vessel growth in a spatially distinct pattern.</a> Cornea. 31 (7), 804-809 (2012).</li><li>Rogers, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+albino+mutation+of+tyrosinase+alters+ocular+angiogenic+responsiveness.">The albino mutation of tyrosinase alters ocular angiogenic responsiveness.</a> Angiogenesis. 16 (3), 639-646 (2013).</li><li>Connor, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+oxygen-induced+retinopathy+in+the+mouse:+a+model+of+vessel+loss,+vessel+regrowth+and+pathological.">Quantification of oxygen-induced retinopathy in the mouse: a model of vessel loss, vessel regrowth and pathological.</a> Nat. Protoc. 4 (11), 1565-1573 (2009).</li></ol>

والكتاب ليس لديهم ما يكشف.

بروتوكول المعروضة هنا النتائج في مستويات استنساخه من hemangiogenesis، lymphangiogenesis، والتهاب، مما يجعله نظام مثالي لدراسة هذه (المترابطة) العمليات الثلاث. في حين تنتج هذه الطريقة NV القرنية مركزية، العديد من الطرق التي تم تطويرها لتتسبب في المزيد من توجه NV، وهي خياطة القرنية وز?...

العمى القرنية هو رابع سبب الأكثر شيوعا من العمى، مسؤولة عن ما يقرب من 4٪ من جميع الحالات 1. اتساع الأوعية الدموية القرنية (NV) تلعب دورا هاما في كثير من هذه الأمراض، بما في ذلك التهاب القرنية بالهربس (أهم الأمراض المعدية المسببة للعمى في الغرب) والتراخوما (السبب الرئيسي للعمى في جميع أنحاء العالم المعدية) 2. وتشمل العلاجات الحالية المنشطات، والأدوية المضادة للالتهابات (المسكنات)، والعلاجات المضادة للVEGF، والسيكلوسبورين A وكذلك التقنيات الجراحية التقليدية أو بالليزر 3. ومع ذلك، فإن الطبيعة المنهكة بشدة من الأمراض NV مقرها القرنية، وقلة المرافق الجراحية قادرة على معالجة NV القرنية، وعدم وجود خيار الدوائية أداء قويا بقيادة مائدة مستديرة الخبراء مؤخرا أن نخلص إلى أن، على الرغم من العلاجات موجودة، والحاجة الطبية الأساسية قدم من قبل هذه الأمراض لا تزال غير الملباة 4. القرنية البشريةيتكون من 5 طبقات، 3 طبقات الخلوية (الظهارية، اللحمية والبطانة) و2 واجهة (بومان الغشاء وغشاء ديسميه). وهو يعمل كحاجز الميكانيكية والسطحية للعين الانكسار. طبيعته شفافة هو نتيجة لتوازن دقيق لمكوناته وجزء لا يتجزأ من وظيفة مناسبة لها 5. عادة اوعائي، يتلقى القرنية الدم من microvessels على طول الحافة الخارجية والتي يتم تغذيتها من الهدبية والشرايين العيون. يحدث القرنية NV عندما حافزا يشجع الأوعية الدموية من هذه السفن مما يسمح لها أن تنمو نحو مركز القرنية، وبالتالي تحد من الرؤية 6. ويشمل الأوعية الدموية القرنية hemangiogenesis وlymphangiogenesis، مما يؤدي في نشوب الأوعية الدموية والأوعية اللمفاوية من الممرات الأوعية الدموية الحوفي نحو مركز القرنية. وهذا يؤدي إلى انهيار القرنية &quot;امتياز عائية&quot;، زيادة في عتامة القرنية والتليف، اختلال القرنية لاyers، وذمة 7. مشغلات دقيقة من NV القرنية عديدة، بدءا من الاستجابة للأمراض المعدية مثل التراخوما إلى حالة يسببها كيميائيا تسبب الأدوية التقليدية، والمواد الكيميائية الصناعية، أو عوامل الحرب الكيميائية حتى. الآليات الجزيئية لهذه العملية ليست، حتى الآن، تتميز بشكل كامل؛ ومع ذلك، فقد تم تحديد عدد قليل من اللاعبين الرئيسيين. في ظل ظروف طبيعية القرنية تمتلك فريد &#39;امتياز عائية&#39; التي تحتفظ بها مجموعة زائدة من العوامل المضادة للعائية (مثل ذوبان VEGF-R1) 8. ومع ذلك، واستجابة لحافز خارجي (مثل إصابة)، سيكون هناك upregulation المحلية من العوامل المؤيدة للعائية (مثل VEGF-A). هذه النصائح ميزان العوامل المؤيدة والمضادة للعائية الذي يكمن وراء امتياز عائية القرنية، ويؤدي إلى وhemangiogenesis، lymphangeogenesis، والتهاب، وبالتالي التسبب في أمراض القرنية وحتى العمى 9. &lt;ع الطبقة = &quot;jove_content&quot;&gt; ونظرا للم تلب الحاجة الطبية لهذه الأمراض المنهكة للغاية، فإنه من مصلحة إلى الميدان لديهم نموذج حيواني موثوقة من NV القرنية. نحن هنا تقديم مثل هذا النموذج: تسيطر إصابة القلويات الحرق. وقد استخدمت نماذج مختلفة لافتة للإصابة على أساس استخدام فلتر حلقات رقة منذ 1970s 10. في عام 1989، وتتميز مجموعة من أطباء العيون كلية الطب بجامعة هارفارد نموذجا مستوى القرنية اصابة القلوي حرق المركزية في أرنب على أساس تمرغ قطعة من ورق الترشيح دائرية مع هيدروكسيد الصوديوم (هيدروكسيد الصوديوم) وتطبيقه على القرنية في مجموعة محددة من تركيزات 11. منذ ذلك الحين، وقد تم تكييف هذه التقنية لاستخدامها في 12-14 الماوس. في الآونة الأخيرة، ودرس في المختبر وانغ الآثار العلاجية للdeacetylase هيستون (HDAC) مثبط ساها في التسبب في NV القرنية باستخدام الماوس القرنية القلوي حرق إصابة نموذج 15. تم بناء منهجية الماوس القرنية نموذج إصابة القلويات حرق المقدمة هناأساسا على العمل قبل ورقتين أخرى 14،16.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="598">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">1 mL Syringe</td>
			<td style="width:96px;">BD</td>
			<td align="right" style="width:119px;">309659</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">18 Guage Needle</td>
			<td style="width:96px;">BD</td>
			<td align="right" style="width:119px;">305918</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">10 mL Syringe</td>
			<td style="width:96px;">BD</td>
			<td align="right" style="width:119px;">306575</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">25 Guage Needle</td>
			<td style="width:96px;">BD</td>
			<td align="right" style="width:119px;">305916</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Anti-F4/80 (rat anti-mouse)</td>
			<td style="width:96px;">AbD Serotech</td>
			<td>MCA497RT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Anti-LYVE-1 (rabbit anti-mouse)</td>
			<td style="width:96px;">Abcam</td>
			<td style="width:119px;">ab14917</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Anti-PECAM-1 (rat anti-mouse)</td>
			<td style="width:96px;">BD</td>
			<td align="right" style="width:119px;">553370</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Anti-IgG Alexa488 (goat anti-rat)</td>
			<td style="width:96px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">A11006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Anti-IgG Alexa594 (goat anti-rabbit)</td>
			<td style="width:96px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">A11012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Camera</td>
			<td style="width:96px;">Tucsen</td>
			<td style="width:119px;">TCC 5.0 ICE</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Coverslips</td>
			<td style="width:96px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">12-548-B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">DMSO</td>
			<td style="width:96px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">D4540-1L</td>
			<td>Caution: Mutagenic, Toxic</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Forceps (Blunt), Iris</td>
			<td style="width:96px;">WPI</td>
			<td align="right" style="width:119px;">15915</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Forceps (Sharp), Dumont #4</td>
			<td style="width:96px;">WPI</td>
			<td align="right" style="width:119px;">500340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">KCl</td>
			<td style="width:96px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">P217-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ketamine Solution</td>
			<td style="width:96px;">MedVet</td>
			<td>RXKETAMINE</td>
			<td>Controlled substance, proper license required for use.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Light Source for Microscope</td>
			<td style="width:96px;">AmScope</td>
			<td style="width:119px;">LED-14M-YA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Microscope (Stereo 7X-45X)</td>
			<td style="width:96px;">AmScope</td>
			<td style="width:119px;">SM-1B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Mounting Medium, Vectashield</td>
			<td style="width:96px;">Vector</td>
			<td style="width:119px;">H-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">NaCl</td>
			<td style="width:96px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">S271-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">NaH2PO4</td>
			<td style="width:96px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">S397-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">NaOH</td>
			<td style="width:96px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">S318-1</td>
			<td>Caution: Corrosive</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Paraformaldehyde</td>
			<td style="width:96px;"></td>
			<td style="width:119px;">P6148-500G</td>
			<td>Caution: Allergenic, Carcenogenic, Toxic</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Proparacaine Hydrochloride</td>
			<td style="width:96px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">P4554-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Scissors (5mm blade), Vanas</td>
			<td style="width:96px;">WPI</td>
			<td align="right" style="width:119px;">14003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Goat Serum</td>
			<td style="width:96px;">MPBio</td>
			<td align="right" style="width:119px;">92939249</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Microscope Slides</td>
			<td style="width:96px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">12-550-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Triton X-100</td>
			<td style="width:96px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">T8787-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Whatman Grade 1 Filter Paper</td>
			<td style="width:96px;">Whatman</td>
			<td style="width:119px;">1001-6508</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Xylazine Solution</td>
			<td style="width:96px;">MedVet</td>
			<td style="width:119px;">RXANASED-20</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an alkali-burn injury model of corneal neovascularization in the mouse

في ظل ظروف طبيعية، والقرنية هي اوعائي، وهذه الشفافية أمر ضروري للحفاظ على البصر جيدة. اتساع الأوعية الدموية (NV) من القرنية، والتي يمكن أن يكون سببها الصدمة، القرنية أو الأمراض المعدية، ينهار ما يسمى &quot;شرف عائية &#39;القرنية ويشكل أساس الأمراض البصرية المتعددة التي قد تؤدي إلى العمى. على الرغم من أن هناك العديد من الخيارات العلاجية المتاحة، والحاجة الطبية الأساسية المقدمة من الأمراض التوعية المستحدثة القرنية لا تزال غير الملباة. من أجل تطوير علاجات آمنة وفعالة، وهادفة، لا بد من نموذج يمكن الاعتماد عليها من NV القرنية والتدخل الدوائي. هنا، نحن تصف إصابة القلويات الحرق نموذج اتساع الأوعية الدموية القرنية في الماوس. يوفر هذا البروتوكول طريقة لتطبيق إصابة القلويات حرق تسيطر على القرنية، وإدارة مجمع الدوائية المصالح، وتصور النتيجة. هذا الأسلوب يمكن أن تكون أجهزة قياسالتل لدراسة آليات والفرص أمام التدخل في NV القرنية واضطرابات التوعية المستحدثة الأخرى.

بعد إصابة القلويات الحرق، يحدث NV القرنية في التنبؤ بها، تعتمد على الوقت المناسب. الشكل 1 يوضح الفرق صارخ سواء في اتساع الأوعية الدموية وعتامة القرنية بين حيوان غير المعالجة (الشكل 1A) وحيوان تعامل مع مثبط HDAC ساها (الشكل 1B ) في نقطة زمنية لمدة 7...

Watch this Scientific Journal Video about An Alkali-burn Injury Model of Corneal Neovascularization in the Mouse at JoVE.com

An Alkali-burn Injury Model of Corneal Neovascularization in the Mouse

اتساع الأوعية الدموية (NV) من القرنية يمكن أن يعقد الأمراض البصرية متعددة. الاستفادة من وجود والقلوي الحرق نموذج الإصابة التي تسيطر عليها، ومستوى قياس الكمي من NV القرنية يمكن أن تنتج عن دراسة الآلية من NV القرنية وتقييم العلاجات المحتملة لاضطرابات التوعية المستحدثة.

والقلوي حرق الإصابات نموذج من القرنية اتساع الأوعية الدموية في ماوس

Under normal conditions, the cornea is avascular, and this transparency is essential for maintaining good visual acuity. Neovascularization (NV) of the ...

an-alkali-burn-injury-model-of-corneal-neovascularization-in-the-mouse

Research

JoVE Journal

Medicine

16.5K Views.  Tulane University.  اتساع الأوعية الدموية (NV) من القرنية يمكن أن يعقد الأمراض البصرية متعددة. الاستفادة من وجود والقلوي الحرق نموذج الإصابة التي تسيطر عليها، ومستوى قياس الكمي من NV القرنية يمكن أن تنتج عن دراسة الآلية من NV القرنية وتقييم العلاجات المحتملة لاض...

Video: An Alkali-burn Injury Model of Corneal Neovascularization in the Mouse

Renal Ischaemia Reperfusion Injury: A Mouse Model of Injury and Regeneration

Renal ischaemia reperfusion injury (IRI) is a common cause of acute kidney injury (AKI) in patients and occlusion of renal blood flow is unavoidable during renal transplantation. Experimental models that accurately and reproducibly recapitulate renal IRI are crucial in dissecting the pathophysiology of AKI and the development of novel therapeutic agents. Presented here is a mouse model of renal IRI that results in reproducible AKI. This is achieved by a midline laparotomy approach for the surgery with one incision allowing both a right nephrectomy that provides control tissue and clamping of the left renal pedicle to induce ischaemia of the left kidney. By careful monitoring of the clamp position and body temperature during the period of ischaemia this model achieves reproducible functional and structural injury. Mice sacrificed 24 hr&#160;following surgery demonstrate loss of renal function with elevation of the serum or plasma creatinine level as well as structural kidney damage with acute tubular necrosis evident. Renal function improves and the acute tissue injury resolves during the course of 7 days following renal IRI such that this model may be used to study renal regeneration. This model of renal IRI has been utilized to study the molecular and cellular pathophysiology of AKI as well as analysis of the subsequent renal regeneration.

The mouse model of renal ischaemia reperfusion injury described here comprises of a right nephrectomy that provides control tissue and clamping of the left renal pedicle to induce ischaemia that results in acute kidney injury. This model uses a midline laparotomy approach with all steps performed via one incision.

الكلوي ونقص الأوكسجين إعادة إشباع الخلايا الإصابات: نموذج الفأر من الإصابات والتجديد

Renal ischaemia reperfusion injury (IRI) is a common cause of acute kidney injury (AKI) in patients and occlusion of renal blood flow is unavoidable ...

A Neonatal Mouse Spinal Cord Compression Injury Model

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal cord. A major current area of research is focused on the mechanisms of adaptive plasticity that underlie spontaneous or induced functional recovery following SCI. Spontaneous functional recovery is reported to be greater early in life, raising interesting questions about how adaptive plasticity changes as the spinal cord develops. To facilitate investigation of this dynamic, we have developed a SCI model in the neonatal mouse. The model has relevance for pediatric SCI, which is too little studied. Because neural plasticity in the adult involves some of the same mechanisms as neural plasticity in early life1, this model may potentially have some relevance also for adult SCI. Here we describe the entire procedure for generating a reproducible spinal cord compression (SCC) injury in the neonatal mouse as early as postnatal (P) day 1. SCC is achieved by performing a laminectomy at a given spinal level (here described at thoracic levels 9-11) and then using a modified Yasargil aneurysm mini-clip to rapidly compress and decompress the spinal cord. As previously described, the injured neonatal mice can be tested for behavioral deficits or sacrificed for ex vivo physiological analysis of synaptic connectivity using electrophysiological and high-throughput optical recording techniques1. Earlier and ongoing studies using behavioral and physiological assessment have demonstrated a dramatic, acute impairment of hindlimb motility followed by a complete functional recovery within 2 weeks, and the first evidence of changes in functional circuitry at the level of identified descending synaptic connections1.

This article describes a method for generating a reproducible spinal cord compression injury (SCI) in the neonatal mouse. The model provides an advantageous platform for studying mechanisms of adaptive plasticity that underlie spontaneous functional recovery.

وحديثي الولادة ماوس الحبل الشوكي ضغط إصابة نموذج

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal ...

A Mouse Model for Laser-induced Choroidal Neovascularization

The mouse laser-induced choroidal neovascularization (CNV) model has been a crucial mainstay model for neovascular age-related macular degeneration (AMD) research. By administering targeted laser injury to the RPE and Bruch&#8217;s membrane, the procedure induces angiogenesis, modeling the hallmark pathology observed in neovascular AMD. 
First developed in non-human primates, the laser-induced CNV model has come to be implemented into many other species, the most recent of which being the mouse. Mouse experiments are advantageously more cost-effective, experiments can be executed on a much faster timeline, and they allow the use of various transgenic models. The miniature size of the mouse eye, however, poses a particular challenge when performing the procedure. Manipulation of the eye to visualize the retina requires practice of fine dexterity skills as well as simultaneous hand-eye-foot coordination to operate the laser. However, once mastered, the model can be applied to study many aspects of neovascular AMD such as molecular mechanisms, the effect of genetic manipulations, and drug treatment effects. 
The laser-induced CNV model, though useful, is not a perfect model of the disease. The wild-type mouse eye is otherwise healthy, and the chorio-retinal environment does not mimic the pathologic changes in human AMD. Furthermore, injury-induced angiogenesis does not reflect the same pathways as angiogenesis occurring in an age-related and chronic disease state as in AMD.
Despite its shortcomings, the laser-induced CNV model is one of the best methods currently available to study the debilitating pathology of neovascular AMD. Its implementation has led to a deeper understanding of the pathogenesis of AMD, as well as contributing to the development of many of the AMD therapies currently available.

Here, we present the mouse laser-induced choroidal neovascularization (CNV) protocol, an experimental model that re-creates the vascular hallmarks of neovascular age-related macular degeneration (AMD). Once mastered, it can reliably and effectively induce CNV as a model system to test various experimental measures.

نموذج الفأر ليزر بفعل اتساع الأوعية الدموية المشيمية

The mouse laser-induced choroidal neovascularization (CNV) model has been a crucial mainstay model for neovascular age-related macular degeneration (AMD) ...

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. Moreover, by rupture of the defective vascular wall, atherosclerosis induces occlusive thrombus formation, which represents the main cause of myocardial infarction or stroke and the most frequent cause of death. Despite the advances in the cardiovascular field, many questions remain unanswered, and additional basic research is essential to improve our understanding of the molecular mechanisms during atherosclerosis and its effects. Due to limited clinical studies, there is a need for representative animal models recreating atherosclerotic conditions such as neointima formation after stent implantation, balloon angioplasty, or endarterectomy. Since the mouse presents many advantages and is the most frequently used model for studying molecular processes, the current study proposes an invasive procedure of endothelial denudation, also known as the wire-injury model, which is representative of the human condition of neointima formation in arteries after revascularization procedures.

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The &quot;Wire-Injury&quot; Model

This study describes an invasive procedure for the induction of accelerated atherosclerosis in mice. In comparison to other methods using electric- or cryo-induced injury, mechanical-induced injury mimics the human condition of restenosis after revascularization therapies and is ideal for the study of the molecular mechanisms involved.

تحريض تصلب الشرايين المتسارع في الفئران: نموذج "الأسلاك- إصابة"

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. ...

A Mouse Model of Single and Repetitive Mild Traumatic Brain Injury

Mild Traumatic Brain Injury (mTBI) can result in the acute loss of brain function, including a period of confusion, a loss of consciousness (LOC), focal neurological deficits and even amnesia. Athletes participating in contact sports are at high risk of exposure to large number of mTBIs. In terms of the level of injury in a sporting athlete, a mTBI is defined as a mild injury that does not cause gross pathological changes, but does cause short-term neurological deficits that are spontaneously resolved. Despite previous attempts to model mTBI in mice and rats, many have reported gross adverse effects including skull fractures, intracerebral bleeding, axonal injury and neuronal cell death. Herein, we describe our highly reproducible animal model of mTBI that reproduces clinically relevant symptoms. This model uses a custom made pneumatic impactor device to deliver a closed-head trauma. This impact is made under precise velocity and deformation parameters, creating a reliable and reproducible model to examine the mechanisms that contribute to effects of single or repetitive concussive mTBI.

Athletes absorb several hundred mild traumatic brain injuries (mTBI)/concussions every year; however, the consequence of these on the brain is poorly understood. Therefore, an animal model of single and repetitive mTBI that consistently replicates clinically relevant symptoms provides the means to advance the study of mTBI and concussion.

A نموذج الفأر من إصابات الدماغ الصدمة خفيفة ومتكررة خفيفة

Mild Traumatic Brain Injury (mTBI) can result in the acute loss of brain function, including a period of confusion, a loss of consciousness (LOC), focal ...

Puncture-Induced Iris Neovascularization as a Mouse Model of Rubeosis Iridis

We describe a model of puncture-induced iris neovascularization as a general model for noninvasive evaluation of angiogenesis. The model is also relevant for targeting neovascular glaucoma, a sight-threatening complication of diabetic retinopathy. This method is based on the induction of iris vascular response by a series of self-sealing uveal punctures on BALB/c mice and takes advantage of the postpartum maturation of mouse ocular vasculature. Mouse pups undergo uveal punctures from postnatal day 12.5, when the pups naturally open their eyes, until postnatal day 24.5. Due to the transparency of the cornea, iris vasculature can be analyzed easily through time by noninvasive in vivo methods. Furthermore, the semitransparent iris of BALB/c mice can be flatmounted for detailed immunohistologic analysis with minimal non-specific background staining. In this model, angiogenesis is mainly driven by the inflammatory and plasminogen activating systems. The puncture-induced model is the first to induce iris neovascularization in small rodents, and has the advantage of allowing direct noninvasive in vivo analysis of the angiogenic process. Moreover, the model can be combined with angiogenic modulating substances, which highlights its potential in the study of angiogenesis with an in vivo perspective.

Iris neovascularization, a common complication of ischemic retinal disease, may lead to sight-threatening neovascular glaucoma. Here, we describe a murine protocol for inducing experimental iris neovascularization that may be used for noninvasive evaluation of angiogenesis-modulating substances.

نيوفاسكولاريزيشن آيريس المستحثة بثقب كنموذج الفأر من إيريديس روبيوسيس

We describe a model of puncture-induced iris neovascularization as a general model for noninvasive evaluation of angiogenesis. The model is also relevant ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

متساوي القياس كونتراكتيليتي القياس الشريان المساريقي العلوي الماوس باستخدام أسلاك ميوجرافي

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to injury. In fact, the most common type of eye injury found in clinic is a corneal abrasion. Here, we utilize an ocular burr to induce an abrasion resulting in removal of the corneal epithelium in vivo on anesthetized mice. This method allows for targeted and reproducible epithelial disruption, leaving other areas intact. In addition, we describe the visualization of the abraded epithelium with fluorescein staining and provide concrete advice on how to visualize the abraded cornea. Then, we follow the timeline of wound healing 0, 18, and 72 h after abrasion, until the wound is re-epithelialized. The epithelial abrasion model of corneal injury is ideal for studies on epithelial cell proliferation, migration and re-epithelialization of the corneal layers. However, this method is not optimal to study stromal activation during wound healing, because the ocular burr does not penetrate to the stromal cell layers. This method is also suitable for clinical applications, for example, pre-clinical test of drug effectiveness.

This protocol describes a method to inflict an abrasion to the ocular surface of the mouse, and to follow the wound healing process thereafter. The protocol takes advantage of an ocular burr to partially remove the surface epithelium of the eye in anaesthetized mice.

سحجه الظهارة القرنية مع لدغ العين كنموذج للقرنية التئام الجروح

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...

A Novel Approach to Monitoring Graft Neovascularization in the Human Gingiva

Laser speckle contrast imaging (LSCI) is a novel method for measuring superficial blood perfusion over large areas. Since it is non-invasive and avoids direct contact with the measured area, it is suitable for monitoring blood flow changes during wound healing in human patients. Vestibuloplasty is periodontal surgery to the oral vestibule, aiming to restore vestibular depth with simultaneous enlargement of the keratinized gingiva. In this special clinical case, a split thickness flap was elevated at the first upper premolar and a xenogenic collagen matrix was adapted to the resulting recipient bed. LSCI was used to monitor the re- and neovascularization of the graft and the surrounding mucosa for one year. A protocol is introduced for the correct adjustment of microcirculation measurement in the oral mucosa, highlighting difficulties and possible failures.
The clinical case study presented demonstrated that &#8212; following the appropriate protocol &#8212; LSCI is a suitable and reliable method for following up microcirculation in a healing wound in the human oral mucosa and gives useful information on graft integration.

This study introduces a protocol for measuring microcirculation in human oral mucosa by laser speckle contrast imaging. The monitoring of wound healing after vestibuloplasty combined with a xenogenic collagen graft is presented on a clinical case.

نهج جديد لرصد الفساد نيوفاسكولاريزيشن في اللثة البشرية

Laser speckle contrast imaging (LSCI) is a novel method for measuring superficial blood perfusion over large areas. Since it is non-invasive and avoids ...

Blood Circuit Reconstruction in an Abdominal Mouse Heart Transplantation Model

The surgical technique of heterotopic abdominal heart transplantation in mice is a standard model for research in transplantation immunology. Here, the established technique for a modified blood circuit reconstruction in a heterotopic abdominal heart transplantation model is presented. This method uses the intrathoracic inferior vena cava (IIVC) instead of the pulmonary artery of the donor heart for the anastomosis to the inferior vena cava of the recipient. It is facilitating and improving success rates for abdominal heart transplantation in mice.

A novel technique for blood circuit reconstruction in a heterotopic abdominal mouse heart transplantation model is demonstrated.

إعادة بناء دائرة الدم في نموذج زرع قلب فأر البطن

The surgical technique of heterotopic abdominal heart transplantation in mice is a standard model for research in transplantation immunology. Here, the ...