يوفر هذا البروتوكول حلاً لتبادل المخزن المؤقت التلقائي المغلق والتركيز لتصنيع الخلايا الصغيرة الحجم. الأهم من ذلك ، تبادل العازلة قادرة على أن يؤديها مع انتعاش عالية وتسليم حجم صغير جدا من المنتجات المركزة. قد يواجه المستخدمون الجدد صعوبة في اتباع جميع خطوات التشغيل التلقائي.
إن ممارسة برمجة هذه الخطوات وإجراء عمليات الاختبار مع المتوسط هي طرق جيدة للتعرف على الجهاز. قبل البدء في تبادل العازلة، في فئة اثنين من رأس تدفق لارينار، واستخدام حقنة وإبرة التجميع لإزالة 50 ملليلتر من محلول ملحي من كيس ملحي 500 ملليلتر. استبدال هذا الحجم مع 50 ملليلتر من 20٪ من الألبومين المصل البشري، وحصاد الخلايا ذات الاهتمام من أوعية الثقافة الخاصة بهم.
بعد العد، استخدم الحقنة لتحميل الخلايا في كيس نقل، واستخدام قفل Luer لتوصيل حقيبة نقل إلى مجموعة معالجة ذات استخدام واحد. ثم قم بتوصيل حقيبة الغسيل الاحتياطية المعدة مسبقًا بمجموعة المعالجة ذات الاستخدام الواحد. لإعداد تبادل المخزن مؤقت تلقائي، افتح واجهة مستخدم الرسومات للجهاز وانقر فوق زر البدء.
انقر فوق جديد لإنشاء بروتوكول جديد، وانقر فوق التحكم لتحديد الصمامات التي سيتم فتحها وإغلاقها، وسرعة الطرد المركزي والضخ، واتجاه المضخة، ومشغلات العمل. عند تعيين كافة المعلمات، انقر فوق حفظ. قم بتعليق الأكياس المناسبة المتصلة على الجهاز، ثم ضع مجموعة المعالجة ذات الاستخدام الواحد على الجهاز.
ثم انقر فوق زر الاتصال وتحميل البرنامج المحفوظة. عندما يضيء زر التشغيل، يكون البروتوكول جاهزًا للبدء. لإجراء تبادل المخزن المؤقت التلقائي، افتح المشابك اليدوية للأنابيب حقيبة نقل، وانقر فوق بدء لبدء برنامج تبادل المخزن المؤقت.
في نهاية الخطوة السادسة الأتمتة، فإن العملية وقفة بسبب اثار من استشعار فقاعة من قبل الهواء في كيس فارغة الآن. إذا كانت الحقيبة فارغة بالفعل، اضغط بجوار نقل العملية إلى الخطوة التالية. عند الانتهاء من العملية الآلية، أغلق جميع مشابك الأنابيب وافتح باب الجهاز.
ثم قم بإزالة مجموعة الاستخدامات ذات الاستخدام الواحد من الجهاز وافصل الحقنة للسماح بتجميع الخلايا للتحليل اللاحق. عادة، سوف تظهر سرير الخلية الممسيلة كما هو الحال في هذه الصورة مع الخلايا المتراكمة في الوسط ونحو الجزء الأمامي من المخروط، ومساحة صغيرة في طرف الغرفة التي الخلايا لا تتراكم، وفتحة مرئية داخل مدخل تحميل الخلية. قد يتم ضغط سرير الخلية الممسيلة عند إدخال مخزن مؤقت جديد يكون في لزوجة أو كثافة مختلفة.
ويمكن تطبيق معدل تدفق مرتفع لتحديد الخلايا الحية حيث أن الخلايا الميتة أصغر وأخف وزنا ويمكن إجبارها على الخروج من الغرفة عن طريق زيادة معدل التدفق. العملية التلقائية للوقت معالجة تبادل المخزن المؤقت أقصر من عملية تبادل المخزن المؤقت اليدوي. وفي هذا التحليل، كانت معدلات الاسترداد بين الدليل والعمليات الآلية متشابهة بالنسبة لكلا النوعين من الخلايا التي تم اختبارها، ولم تتأثر قابلية الخلية للاستمرار بأي من العمليتين.
وأظهرت الخلايا المستعادة معدلات انتشار مماثلة، وقدرات على إنتاج السيتوكينات، وأنشطة إيديو، بغض النظر عن نوع المعالجة. من المهم أن نتذكر أن هذا البروتوكول يخدم فقط كمبدأ توجيهي ، وبالتالي يحتاج المستخدمون إلى برمجة معدل التدفق وسرعة الطرد المركزي وفقًا لنوع الخلية والمخزن المؤقت. تبادل المخزن المؤقت هو خطوة وسيطة في تصنيع الخلايا التي قد تتبع توسيع الخلية أو الحفظ بالتبريد و الصياغة.
والهدف هو تطوير طرق لإحاطة العملية برمتها. الطرد المركزي للتدفق المضاد هو منصة متعددة الاستخدامات للغاية. وسوف تستكشف الدراسات المستقبلية التطبيقات في اختيار الخلايا، مثل إزالة الخلايا الميتة وعزل الخلايا أحادية النواة عن منتج chorisis.
