用于小型细胞处理的自动逆流离心系统

该协议为小型电池制造提供了封闭式自动缓冲交换和浓缩解决方案。重要的是，缓冲交换能够以高恢复率和非常小的集中产品量执行。新用户可能难以执行所有自动化步骤。

练习这些步骤编程和使用介质执行测试运行是熟悉设备的好方法。在开始缓冲液交换之前，在二类层流头中，使用注射器和针头组装从 500 毫升盐水袋中去除 50 毫升盐水溶液。用 50 毫升 20%的人血清白蛋白代替此体积，并收获其培养容器中感兴趣的细胞。

计数后，使用注射器将细胞装入转移袋中，并使用 Luer 锁将转移袋连接到一次性处理袋。然后将先前准备好的洗涤缓冲袋连接到一次使用加工套件。要设置自动缓冲区交换，请打开设备的图形用户界面，然后单击"开始"按钮。

单击"新"以创建新协议，然后单击控制以选择要打开和关闭的阀门、离心和泵速度、泵方向和操作触发器。设置所有参数后，单击"保存"。将连接好的适当行李挂在设备上，然后将一次使用加工套件放在机器上。

然后单击连接按钮并下载已保存的程序。播放按钮亮起时，协议已准备好启动。要执行自动缓冲交换，请打开传输袋管的手动夹，然后单击"开始"以启动缓冲交换程序。

在自动化步骤六结束时，由于现在空袋中空气触发气泡传感器，该过程将暂停。如果袋子确实是空的，请按下一步，将过程移动到下一步。自动化过程完成后，关闭所有管夹并打开设备的门。

然后从设备中取出一次性套件，断开注射器，以便收集细胞以进行后续分析。通常，流化细胞床将在此图像中显示，细胞在圆锥体的中间和朝前累积，在腔室尖端有一个小空间，其中细胞不会累积，并在细胞加载入口内出现可见的开口。引入具有不同粘度或密度的新缓冲液时，可压缩流化细胞床。

高流速可用于选择活细胞，因为死细胞更小、更轻，可以通过增加流速强制离开腔室。缓冲区交换处理过程的自动化过程比手动缓冲区交换处理过程短。在此分析中，手动和自动过程之间的恢复率对于两种测试的细胞类型都相似，并且细胞的生存能力不受这两种过程的影响。

回收的细胞表现出类似的增殖率，产生细胞因子的能力，和伊迪奥活动，无论处理的类型。重要的是要记住，该协议仅作为一个指南，因此用户需要根据他们的细胞类型和缓冲区对流速和离心速度进行编程。缓冲交换是细胞制造中的中间步骤，可能跟随细胞培养扩化或低温保存和配方。

目标是开发包围整个流程的方法。逆流离心是一个非常通用的平台。未来的研究将探讨细胞选择的应用，如死细胞去除和单核细胞分离从胆小球产品。