Bu protokol, küçük ölçekli hücre üretimi için kapalı otomatik arabellek değişimi ve konsantrasyonu için bir çözüm sağlar. Daha da önemlisi, tampon değişimi yüksek bir kurtarma ve konsantre ürün çok küçük bir hacim teslim ile yapılabilir. Yeni kullanıcılar tüm otomasyon adımlarını takip etmekte zorlanabilir.
Bu adımları programlama ve orta ile test çalışır gerçekleştirme pratik cihaz aşina olmak için iyi yollardır. Tampon değişimi başlamadan önce, bir sınıf iki laminar akış kafası, 500 mililitrelik tuzlu çanta dan tuzlu çözelti 50 mililitre kaldırmak için bir şırınga ve iğne montaj kullanın. Bu hacmi %20 insan serum albumininin 50 mililitresi ile değiştirin ve kültür damarlarından ilgi hücrelerini toplayıp.
Saydıktan sonra, hücreleri bir aktarım çantasına yüklemek için şırıngayı kullanın ve aktarım torbasını tek kullanımlık işleme kitine bağlamak için Luer kilidini kullanın. Daha sonra önceden hazırlanmış yıkama tampon çantasını tek kullanımlık işleme kitine bağlayın. Otomatik arabellek değişimi ayarlamak için aygıtın grafik kullanıcı arabirimini açın ve başlat düğmesini tıklatın.
Yeni bir protokol oluşturmak için yeniyi tıklatın ve açılacak ve kapatılmak üzere vanaları, santrifüj ve pompa hızlarını, pompa yönünü ve eylemi tetiklemenleri seçmek için denetimi tıklatın. Tüm parametreler ayarlandığında kaydet'i tıklatın. Bağlı uygun çantaları cihaza asın ve tek kullanımlık işleme kitini makineye yerleştirin.
Ardından bağlan düğmesini tıklatın ve kaydedilen programı indirin. Oynat düğmesi yandığında protokol başlatılacak şekilde hazırdır. Otomatik arabellek değişimini gerçekleştirmek için, transfer çantası tüpü için manuel kelepçeleri açın ve arabellek değişim programını başlatmak için başlat'ı tıklatın.
Otomasyon adım altı sonunda, süreç şimdi boş torbada hava tarafından kabarcık sensörü tetikleme nedeniyle duraklayacaktır. Çanta gerçekten boşsa, işlemi bir sonraki adıma taşımak için yanına basın. Otomatik işlem tamamlandığında, tüm boru kelepçelerini kapatın ve cihazın kapısını açın.
Ardından tek kullanımlık kiti cihazdan çıkarın ve sonraki analiz için hücrelerin toplanması için şırınganın bağlantısını kesin. Tipik olarak, akışkan hücre yatağı, bu görüntüde, koninin ortasında ve önüne doğru biriken hücreler, hücrelerin birikmediğinin olduğu odanın ucundaküçük bir boşluk ve hücre yükleme girişi içinde görünür bir açıklıkla görünür. Akışkan hücre yatağı, farklı bir viskozite veya yoğunlukta yeni bir tampon tanıtılırken sıkıştırılabilir.
Ölü hücreler daha küçük ve daha hafif olduğundan ve akış hızını artırarak odanın dışına çıkmaya zorlanabilirken, canlı hücreler için yüksek akış hızı uygulanabilir. Arabellek değişimi işlem süresinin otomatik işlemi, el ile arabellek değişim işleminden daha kısadır. Bu analizde, manuel ve otomatik işlemler arasındaki kurtarma oranları test edilen her iki hücre türü için de benzerdi ve hücre nin canlılığı her iki işlemden de etkilenmedi.
Kurtarılan hücreler benzer çoğalma oranları, sitokin üretme yeteneklerini ve işleme türüne bakılmaksızın ideo-aktiviteleri gösterdiler. Bu protokolün yalnızca bir kılavuz görevi gördüğünüzde, kullanıcıların akış hızını ve santrifüj hızını hücre türüne ve arabelleğine göre programlamaları gerektiğini unutmamak önemlidir. Arabellek değişimi hücre kültürü genişleme veya kriyopreservation ve formülasyon takip edebilir hücre üretiminde bir ara adımdır.
Amaç, tüm süreci içine almanın yollarını geliştirmektir. Karşı akış santrifüj çok yönlü bir platformdur. Gelecekteki çalışmalar, ölü hücre kaldırma ve bir korisis üründen mononükleus hücre izolasyonu gibi hücre seçimiuygulamaları araştıracaktır.
