Этот протокол обеспечивает решение для закрытого автоматизированного буферного обмена и концентрации для мелкомасштабного производства ячеев. Важно отметить, что буферный обмен может выполняться при высоком восстановлении и поставке очень небольшого объема концентрированного продукта. Новые пользователи могут бороться, чтобы следовать всем шагам автоматизации.
Практика программирования этих шагов и выполнение тестовых запусков со средой являются хорошими способами ознакомиться с устройством. Перед началом буферного обмена, в классе 2 ламинарной головки потока, используйте шприц и сборку иглы, чтобы удалить 50 миллилитров солевого раствора из 500-миллилитрового солевого мешка. Замените этот том 50 миллилитров 20%человеческого альбумин сыворотки, и урожай клеток, представляющих интерес от их культуры сосудов.
После подсчета, используйте шприц, чтобы загрузить клетки в мешок передачи, и использовать замок Luer для подключения передачи мешок одноразовый комплект обработки. Затем подключите ранее подготовленный мешок буфера для мытья к одно используется комплект обработки. Чтобы настроить автоматизированный буферный обмен, откройте графический пользовательский интерфейс устройства и нажмите кнопку "Пуск".
Нажмите новый, чтобы создать новый протокол, и нажмите управление, чтобы выбрать клапаны, которые будут открыты и закрыты, центробежные и насос скорости, направление насоса, и действие триггеров. Когда все параметры будут установлены, нажмите сохранить. Повесьте подключенные соответствующие мешки на устройство и поместите одноразовый комплект обработки на машину.
Затем нажмите кнопку подключения и загрузите сохраненную программу. Когда кнопка воспроизведения загорается, протокол готов к началу. Для выполнения автоматизированного буферного обмена откройте ручные зажимы для трубки сумки передачи и нажмите кнопку, чтобы начать инициировать программу буферного обмена.
В конце шестого шага автоматизации процесс приохлопнится из-за срабатывания датчика пузыря воздухом в теперь уже пустом мешке. Если сумка действительно пуста, нажмите рядом, чтобы переместить процесс на следующий шаг. Когда автоматизированный процесс будет закончен, закройте все зажимы для труб и откройте дверь устройства.
Затем удалите одноразовый комплект с устройства и отключите шприц, чтобы клетки были собраны для последующего анализа. Как правило, жидкостные клетки кровать будет отображаться как представлено на этом изображении с клетками, накапливающиеся в середине и к передней части конуса, небольшое пространство на кончике камеры, в которой клетки не накапливаются, и видимое отверстие в клетке загрузки входе. Текучесть клеток кровать может быть сжата при введении нового буфера, который находится на различные вязкости или плотности.
Высокая скорость потока может быть применена для выбора живых клеток, так как мертвые клетки меньше и легче и могут быть вытеснены из камеры за счет увеличения скорости потока. Автоматизированный процесс обработки буферного обмена короче, чем процесс ручного обмена буферами. В этом анализе показатели восстановления между руководством и автоматизированными процессами были схожими для обоих типов протестированных ячеек, и на жизнеспособности клеток не повлиял ни один из процессов.
Восстановленные клетки продемонстрировали аналогичные темпы распространения, способность производить цитокины и идео-деятельности, независимо от типа обработки. Важно помнить, что этот протокол служит только в качестве ориентира, и поэтому пользователи должны программировать скорость потока и скорость центрифугации в зависимости от их типа ячейки и буфера. Буферный обмен является промежуточным шагом в производстве клеток, которые могут следовать расширению клеточной культуры или криоконсервации и формулировки.
Цель состоит в том, чтобы разработать способы, чтобы приложить весь процесс. Центрифугация контрпотока является очень универсальной платформой. Будущие исследования будут изучать приложения в выборе клеток, таких как удаление мертвых клеток и мононуклеусной изоляции клеток от продукта chorisis.
