حركة الأسنان التقويمية هي عملية بيولوجية معقدة تنطوي على قوى خارجية وإعادة عرض الأنسجة الرخوة والثابتة على حد سواء. من أجل فهم هذه العمليات ، من المهم دراسة الأسنان وأنسجة اللثة داخل السياق ثلاثي الأبعاد. نموذج مورين هو مرشح جيد لمثل هذه الدراسات بسبب حجمها، وارتفاع معدل الأيض والمعلومات الوراثية واسعة لدينا.
ومع ذلك ، فإن إنشاء حركة الأسنان التقويمية في الفئران ليس سهلا نظرا لصغر حجمها. بالإضافة إلى ذلك ، عادة ما تنطوي طرق التحليل الهيكلي على تقسيم ، مما يعطل البنية ثلاثية الأبعاد وسياق الأنسجة. بالنسبة للأنسجة غير الموحدة ، مثل PDL ، فإن الحفاظ على الهيكل والسياق ثلاثي الأبعاد له أهمية حاسمة.
لمعالجة هاتين العوائق، نقدم بروتوكولا لتوليد حركة الأسنان التقويمية المتوسطة لأول ضرس انسديلي في الفئران ووصف طريقتين تمكنان من التصور ثلاثي الأبعاد للأربطة اللثة دون تقسيم الأنسجة. لوضع الماوس تخدير لإدراج جهاز تقويم الأسنان، ربط القاطع العلوي على حلقة مشبك الورق. شل القواطع السفلية باستخدام سلسلة الطاقة وفتح الفم كذلك مع مصغرة القولونية الماوس المتراجع.
ضعي قطرة صغيرة من المحلول الملحي على كل عين لمنع جفاف القرنية. هذه هي الأدوات المستخدمة في إدراج الجهاز. قطع قطعة من سلك الألومنيوم إلى سنتيمتر واحد في الطول.
باستخدام حامل الإبرة المجهرية، قم بتمرير السلك من الجانب البوكال لغويا في المنطقة بين البروكسية أسفل نقطة الاتصال بين الأضراس الأولى والثانية. سحب السلك من الجانب اللغوي نحو الجانب الساذج من الضرس. تويست نهايات حرة من السلك مرتين إلى ثلاث مرات لتأمين.
قطع قطعة من التيتانيوم النيكل أو NiTi لفائف الربيع حوالي سبعة إلى تسعة خيوط في الطول. إدراج لفائف بين أول الضرس السفلي والقواطع، وتمرير نهاية واحدة حرة من السلك من خلال اثنين من المواضيع من لفائف، ثم تحريف طرفي السلك بإحكام لإصلاح لفائف إلى الضرس. إزالة سلسلة الطاقة باستخدام زوج من ملاقط.
حلقة اثنين إلى ثلاثة خيوط من لفائف على القاطع لترسيخ لفائف. ترك بالضبط ثلاثة خيوط نشطة بين أول الضرس والقاطع. الشريحة التهديدات وصولا الى هامش gingival الحرة القاطعة.
وضع طبقة من الراتنج مركب قابلة للتدفق على الحدود القاطعة لللفائف وعلاجه مع ضوء علاج الأسنان. استبدال سلسلة الطاقة بعد علاج الراتنج. تقليم الأسلاك الزائدة حول الضرس لتجنب الإصابات.
باستخدام نفس ضوء المعالجة، قم بتسخين لفائف NiTi لمدة 20 ثانية. هذا سوف تشديد الملف، والانتهاء من التنسيب ينبغي أن تبدو مثل هذا. يمكن إزالة الأنسجة الرخوة على الفك السفلي هيمي تشريح مع مسح خالية من الوبر.
مع عينة بين إصبعين، وفرك الخارج في حركة دائرية حتى تتم إزالة معظم الأنسجة الرخوة. ويمكن قطع بقية باستخدام زوج من مقص. يظهر الفك السفلي النظيف هنا على اليمين.
لتركيب تشريح هيمي الفك السفلي في غرفة العينة من الأشعة المقطعية الدقيقة، وتشكيل حبة الأرز الحجم راتنج الأسنان معبأة في سجل. ثم وضعه في فتحة عينة من المرحلة. ضع الفك السفلي الهيمي على المركب.
ضبط الموقف حتى يتم توسيط الضرس الأول في الأخدود خط الوسط وسطح الانسداد الأفقي. علاج المركب عندما راض عن تحديد المواقع. هذا مثال على الفك السفلي في الوضع الصحيح.
خذ كرة صغيرة من راتنج الأسنان القابل للحزم. يجب أن يكون قطرها حول عرض الضرس. ضع الراتنج على سطح الانسداد من الضرس الأول.
ترطيب مسح خالية من الوبر مع الماء. ضع المسحة المثبطة داخل برك الرطوبة في مرحلة العينة. أغلق غرفة العينة وألصقها على المحوسبة الدقيقة بالمسامير.
الآن التقاط صور 2D في حين خفض سندان عموديا حتى غيض من سندان محاطة المركب. قم بإيقاف تشغيل مصدر الأشعة السينية بأمان، وافتح غرفة التصوير المقطعي الدقيقة وعالج المركب من خلال نافذة الزجاج الزجاجي الواضحة. الآن يتم تحميل العينة بشكل صحيح ويمكن تصويرها حسب الحاجة.
لتوليد عينة من الهيمي الفك السفلي مسح بصريا، وإعداد الحلول التالية في أنابيب الطرد المركزي 1.5 ميل. 4٪ بارافورمالديهايد، 50٪ و 70٪ إيثانول في المياه المؤينة. أنبوبين من الإيثانول 100٪ والإيثيل سينامات.
مكان تشريح هيمي الفك السفلي في 4٪ بارافورمالديهايد. تغطية أنبوب مع رقائق الألومنيوم ووضع على الروك على إعداد لطيف لمدة ست ساعات في درجة حرارة الغرفة. بعد ست ساعات، نقل العينة إلى 50٪ الإيثانول.
ضع العينة مرة أخرى على الروك لمدة 16 ساعة مغطاة من الضوء. كرر الخطوة السابقة مع عينة في الإيثانول 70٪ لمدة 16 ساعة تليها الإيثانول 100٪ مرتين لمدة 16 ساعة في كل مرة. أخيرا نقل العينة إلى إيثيل سينامات لمدة لا تقل عن 12 ساعة.
يتم إنشاء حركة تقويم الأسنان موثوق بها من قبل جهاز لفائف NiTi في الضرس الأول المارد مورين. في الفئران الذكور البالغ من العمر تسعة أسابيع ، يبلغ متوسط المساحة بين الكواكب 40 ميكرون بعد سبعة أيام. مرحلة تعزيز الأشعة المقطعية الصغيرة يسمح التصور من PDL.
بعد ثلاثة أيام من حركة تقويم الأسنان الوضيعة ، يتم تقليل كثافة PDL. واجهة PDL العظام هو أكثر خشونة بسبب تطور الحفر في سطح العظام، والتي تدل على النشاط العظمي وا ارتشاف العظام. ويمكن رؤية سطح خشن على جميع مستويات الجذور.
وهذا يدل على أن الحركة هي ترجمة بدلا من حركة البقشيش. في اليوم السابع ، تكون مساحة PDL أضيق مما كانت عليه في اليوم الثالث وحدود PDL العظمية على سطح الجذر البعيدة أكثر سلاسة وهي علامات على معارضة العظام كما هو متوقع عند حدوث حركة الأسنان التقويمية. نظرا لوقت التصوير المقطعي الدقيق الطويل ودوران المرحلة ، فإن التركيب الآمن للعينة أمر ضروري.
عينة غير مستقرة حيث يؤدي إلى مسح ضبابي حيث يمكن رؤية صورة ظلية حول التاج ولا ينظر إلى ألياف PDL. المقاصة البصرية باستخدام إيثيل سينامات يوفر طريقة أخرى لعرض PDL دون تقسيم. يمكن رؤية الركيزة من خلال راموس عينة مسح كافية تظهر هنا على اليمين.
هذه الطريقة، يحافظ على الفلورة الذاتية ويمكن استخدامها دون تثبيت الكيميائية. يمكن استخدام المجهر ورقة الضوء على عينات مسح. مع الماوس المعدلة وراثيا، يمكن ملاحظة بطانات الأوعية الدموية الفلورية.
إذا لم يتم مسح العظام بشكل صحيح ، فإن الأوعية الدموية في PDL غير مرئية كما هو موضح في لوحة F.This البروتوكول وصف كيفية التغلب على اثنين من التحديات الرئيسية في توليد وتحليل حركة الأسنان التقويمية في أسنان الضرس المانع الرجولي مورين. بمجرد إتقان تقنية حركة الأسنان التقويمية ، يمكن الانتهاء منها في 15 دقيقة. هذه العملية صعبة بسبب الأبعاد الصغيرة لأسنان الماوس ووجود اللسان.
ومع ذلك، فإننا نقدم جميع الحلول اللازمة للتغلب على هذه التحديات. يتطلب التصوير المقطعي الدقيق قدرة على تحسين المرحلة. أظهرنا تقنيتنا باستخدام CT صغيرة على مقاعد البدلاء. ومع ذلك، أي إعداد يمكن إنشاء مرحلة تحسين سوف تفعل، على سبيل المثال، سينكروترون.
تعتمد نتائج مسح ECi على عملية الجفاف. إذا كانت العينة غير شفافة بما فيه الكفاية، اقتراحنا هو زيادة الوقت من خطوات الجفاف. يمكن استخدام طريقة المقاصة الخاصة بنا على عينات غير مثبتة أيضا.
يمكن مسح الأنسجة الواضحة في التصوير المقطعي الدقيق لأن عملية التطهير لا تؤثر على المحتوى المعدني للأنسجة. لذلك توفر طريقتنا نهجا مترابطا للمعلومات الفلورية والهيكلية لتوليد تحليل ثلاثي الأبعاد كامل.
