يسمح لنا التسجيل المستمر لتدفق الدم الكلوي في الفئران الآلية بتحديد تسلسل الأحداث التي تؤدي إلى عملية المرض التي ندرسها مؤقتا. في حالتنا ، إنه ارتفاع ضغط الدم ونحاول تحديد ما إذا كان انخفاض تدفق الدم الكلوي ، الذي يحدث في ارتفاع ضغط الدم ، يسبق أو ينتج عن ارتفاع ضغط الدم. النظام الذي سنعرضه اليوم وإعداد الحيوان مصمم حقا لتمكين تحديد مستمر على مدار 24 ساعة لتدفق الدم الكلوي لعدة أسابيع في كل مرة لدراسة الأحداث المزمنة ودراسة الفئران في بيئتهم المنزلية ، الأقفاص.
كما هو الحال مع جميع التقنيات الجراحية والممارسة والصبر والاهتمام بالتفاصيل ، سنحتاج إلى إتقان هذه الإجراءات حتى يمكن تنفيذ التنفيذ في الوقت المحدد. لبدء حلق البطن بالكامل في منطقة على القيلولة حول الفقرات العنقية السابعة من الفئران المخدرة مع المقص الكهربائية. بعد الحلاقة ، امسح المنطقة ثلاث مرات بالتناوب مع 10٪ بوفيدون اليود و 70٪ من الإيثانول.
ضع الجرذ في وضعية الانبطاح. اصنع قطعا سنتيمترا واحدا باستخدام المشرط الموجود في القيلولة والجناح الأيسر. ثم إجراء تشريح حاد مع ملقط مرقئ في مساحة واضحة تحت الجلد من شق الجناح إلى الجزء الخلفي من الرقبة.
قم بتوصيل زر الجلد بمسبار التدفق ومرر مسبار التدفق عبر هذا النفق تحت الجلد من الرقبة إلى شق الجناح باستخدام ملقط مرقئ. ثم ضع الجرذ في وضع الاستلقاء وقم بعمل شق في البطن من أربعة إلى خمسة سنتيمترات. تشريح المنطقة المحيطة بالشريان الكلوي الأيسر باستخدام ملقط تشريح دقيق منحني يعرض المساحة الكافية لوضع مسبار التدفق.
ثم بصراحة ، اخترق العضلة القطنية الرباعية اليسرى بالملقط المرقئ واسحب رأس مسبار التدفق عبر الشريان الكلوي تحت الأنسجة الدهنية إلى تجويف البطن. ضع شبكة ألياف البوليستر على جدار البطن. قم بتوصيل طرف مسبار التدفق بالشريان الكلوي الأيسر وقم بتوصيله بمقياس التدفق.
أضف بعض الجل حول طرف المسبار وستظهر قيمة معدل التدفق على مقياس التدفق. قم بلصق شبكة ألياف البوليستر المرفقة بالمسبار على جدار البطن باستخدام مادة لاصقة للأنسجة وامسكها حتى تجف وتستعبد. بمجرد وضع المسبار في مكانه ، افصل مسبار التدفق عن مقياس التدفق وقم بتغطية البطن بشاش منقوع بالمحلول الملحي.
لخياطة المسبار ، أدر الجرذ إلى وضعية الانبطاح. قم بتوصيل زر الجلد بمسبار التدفق وقم بعمل حلقة دائرية لمسبار التدفق تحت الجلد على الجناح. خياطة شق في الرقبة وزر على الجلد.
ثم خياطة الجناح بأربعة خيوط جراحية. قم بتوصيل مسبار التدفق بمقياس التدفق مرة أخرى ، وأعد الجرذ إلى الوضع الظهري للتحقق من تدفق الدم الكلوي. قم بإجراء تعديلات مسبار التدفق النهائي لتحسين موضعه على الشريان الكلوي.
أخيرا ، قم بخياطة العضلات بثلاثة حرير أوت في الجلد بأربعة خيوط جراحية. عندما يتعافى الجرذ تماما من التخدير ، أعد الجرذ إلى نظام قفص استجابة الحركة ، قم بتوصيل مسبار التدفق بمقياس تدفق الدم والسماح بفترة نقاهة مدتها أسبوع تقريبا لتثبيت المسبار وقياس التدفق. تم قياس متوسط الضغط الشرياني وتدفق الدم بشكل مستمر في الفئران الحساسة للملح الباهت أثناء التحول من نظام غذائي منخفض إلى نظام غذائي عالي الملح.
تم تسجيل هذه البيانات التمثيلية من ذكر الفئران على مدى أربعة أسابيع ويتم عرضها بمتوسط دقيقة. لوحظ اختلاف نهاري واضح في متوسط الضغط الشرياني وتدفق الدم. بينما يزداد ضغط الدم مع اتباع نظام غذائي عالي الملح ، يميل تدفق الدم إلى الانخفاض بدلا من الزيادة مما يشير إلى زيادة مقاومة الأوعية الدموية الكلوية.
الميزة الكبيرة لهذه التقنية هي أنها يمكن أن تدرس تدفق الدم الكلوي على مدى فترات طويلة من الزمن ، والأهم من ذلك في الظروف غير المخدرة. هذا له أهمية كبيرة عند دراسة الاستجابة للمحفزات المختلفة حيث يمكنك استخدام نفس الحيوان في ظل ظروف غير مخدرة خاضعة للرقابة ومتابعة نفس الحيوان على مدى فترات قصيرة أو فترات طويلة جدا لمعرفة ما هي الاستجابة لبعض المحفزات أو الأمراض المرضية المعينة.
