Die kontinuierliche Aufzeichnung des renalen Blutflusses bei instrumentierten Ratten ermöglicht es uns, die Abfolge von Ereignissen, die zu dem von uns untersuchten Krankheitsprozess führen, vorübergehend zu bestimmen. In unserem Fall ist es Bluthochdruck und wir versuchen festzustellen, ob eine Verringerung des renalen Blutflusses, die bei Bluthochdruck auftritt, dem Bluthochdruck vorausgeht oder eine Folge davon ist. Das System, das wir heute demonstrieren werden, und die Vorbereitung des Tieres ist wirklich darauf ausgelegt, eine kontinuierliche 24-Stunden-Bestimmung des renalen Blutflusses für viele Wochen zu ermöglichen, um chronische Ereignisse zu untersuchen und die Ratte in ihrer häuslichen Umgebung, Käfigen, zu untersuchen.
Wie bei allen chirurgischen Techniken, Übung, Geduld und Liebe zum Detail müssen wir diese Verfahren beherrschen, bis das Gerät pünktlich ausgeführt werden kann. Um zu beginnen, rasieren Sie den gesamten Bauch in einer Region auf dem Nickerchen um die siebten Halswirbel einer anästhesierten Ratte mit einem elektrischen Haarschneider. Wischen Sie den Bereich nach der Rasur dreimal abwechselnd mit 10% Povidon-Jod und 70% Ethanol ab.
Stellen Sie die Ratte in die Bauchlage. Machen Sie einen Zentimeterschnitt mit dem Skalpell auf dem Nickerchen und der linken Flanke. Führen Sie dann eine stumpfe Dissektion mit einer hämostatischen Pinzette im klaren subkutanen Raum vom Flankenschnitt bis zum Nacken durch.
Befestigen Sie den Hautknopf an der Durchflusssonde und führen Sie die Durchflusssonde mit einer hämostatischen Pinzette durch diesen subkutanen Tunnel vom Hals bis zum Flankenschnitt. Dann legen Sie die Ratte in Rückenlage und machen Sie einen vier bis fünf Zentimeter großen Mittellinien-Bauchschnitt. Sezieren Sie den Bereich um die linke Nierenarterie mit einer gekrümmten Mikrosezierzange, die den Raum freilegt, der ausreicht, um die Strömungssonde zu platzieren.
Dann durchstechen Sie stumpf den linken Quadratus-Lendenmuskel mit der hämostatischen Pinzette und ziehen den Kopf der Durchflusssonde durch die Nierenarterie unter dem Fettgewebe in die Bauchhöhle. Legen Sie das Polyesterfasernetz auf die Bauchdecke. Haken Sie die Spitze der Durchflusssonde an die linke Nierenarterie und verbinden Sie sie mit dem Durchflussmesser.
Fügen Sie etwas Gel um die Sondenspitze hinzu und der Wert der Durchflussrate wird auf dem Durchflussmesser angezeigt. Kleben Sie das an der Sonde befestigte Polyesterfasernetz mit Gewebekleber an die Bauchdecke und halten Sie es, bis es trocken und verklebt ist. Sobald die Sonde an Ort und Stelle ist, trennen Sie die Durchflusssonde vom Durchflussmesser und bedecken Sie den Bauch mit salzhaltiger getränkter Gaze.
Um die Sonde zu nähen, drehen Sie die Ratte in die Bauchlage. Befestigen Sie den Hautknopf an der Durchflusssonde und machen Sie eine kreisförmige Schlaufe der Durchflusssonde subkutan an der Flanke. Nähen Sie den Schnitt am Hals und den Knopf an die Haut.
Vernähen Sie dann die Flanke mit vier chirurgischen Nähten. Schließen Sie die Durchflusssonde wieder an den Durchflussmesser an und drehen Sie die Ratte zurück in die dorsale Position, um den renalen Blutfluss zu überprüfen. Nehmen Sie letzte Anpassungen der Durchflusssonde vor, um ihre Position auf der Nierenarterie zu optimieren.
Zum Schluss nähen Sie den Muskel mit drei ott Seide in die Haut mit vier ott chirurgischen Nähten. Wenn sich die Ratte vollständig von der Anästhesie erholt hat, kehren Sie die Ratte in ein Bewegungsreaktionskäfigsystem zurück, verbinden Sie die Durchflusssonde mit dem Blutflussmesser und ermöglichen Sie eine Erholungsphase von etwa einer Woche, um die Sonde und die Durchflussmessung zu stabilisieren. Der mittlere arterielle Druck und der Blutfluss wurden kontinuierlich bei stumpfsalzempfindlichen Ratten gemessen, während von einer salzarmen zu einer salzreichen Diät gewechselt wurde.
Diese repräsentativen Daten einer männlichen Ratte wurden über einen Zeitraum von vier Wochen aufgezeichnet und sind mit einem winzigen Durchschnitt dargestellt. Ein deutlicher täglicher Unterschied wurde im mittleren arteriellen Druck und Blutfluss beobachtet. Während der Blutdruck bei einer salzreichen Diät ansteigt, neigt der Blutfluss eher dazu, zu sinken als zu steigen, was auf einen erhöhten renalen Gefäßwiderstand hindeutet.
Der große Vorteil dieser Technik ist, dass sie den renalen Blutfluss über lange Zeiträume und vor allem unter unnarshetisierten Bedingungen untersuchen kann. Dies ist von großer Bedeutung, wenn Sie die Reaktion auf verschiedene Reize untersuchen, bei denen Sie dasselbe Tier unter kontrollierten, nicht betäubten Bedingungen verwenden und demselben Tier über kurze oder sehr lange Zeiträume folgen können, um zu sehen, wie die Reaktion auf einen bestimmten Reiz oder eine pathologische Krankheit ist.
