計装されたラットの腎血流の継続的な記録により、私たちが研究している疾患プロセスにつながる一連のイベントを一時的に決定することができます。私たちの場合、それは高血圧であり、高血圧で発生する腎血流の減少が高血圧に先行するか、高血圧の結果であるかを判断しようとしています。今日デモンストレーションするシステムと動物の準備は、慢性イベントを研究し、家庭環境であるケージでラットを研究するために、一度に何週間も腎血流を24時間連続的に測定できるように設計されています。
すべての手術技術、練習、忍耐、細部への注意と同様に、道具が時間通りに実行できるようになるまで、これらの手順を習得する必要があります。電気バリカンで麻酔をかけたラットの7番目の頸椎の周りの昼寝の領域で腹部全体を剃り始める。剃った後、10%ポビドンヨードと70%エタノールで交互に3回拭きます。
ラットを腹臥位にします。昼寝と左脇腹にメスで1センチカットします。次に、脇腹切開から首の後ろまでの透明な皮下空間で止血鉗子で鈍的解剖を行います。
皮膚ボタンをフロープローブに取り付け、フロープローブを首から止血鉗子で脇腹切開までの皮下トンネルに通します。次に、ラットを仰臥位に置き、4〜5センチの正中線腹部切開を行います。フロープローブを配置するのに十分なスペースを露出させる湾曲したマイクロ解剖鉗子で左腎動脈の周りの領域を解剖します。
次に、鈍く、止血鉗子で左方形腰筋を突き刺し、フロープローブの頭を脂肪組織の下の腎動脈を通して腹腔内に引っ張ります。ポリエステル繊維メッシュを腹壁に置きます。フロープローブの先端を左腎動脈に引っ掛け、流量計に接続します。
プローブの先端の周りにゲルを追加すると、流量計に流量の値が現れます。ティッシュ接着剤を使用してプローブに取り付けられたポリエステル繊維メッシュを腹壁に接着し、乾燥して接着されるまで保持します。プローブが所定の位置に配置されたら、流量計からフロープローブを外し、生理食塩水を浸したガーゼで腹部を覆います。
プローブを縫合するには、ラットを腹臥位に向けます。皮膚ボタンをフロープローブに取り付け、フロープローブの皮下を側面に円形のループを作ります。首の切開部と皮膚へのボタンを縫合します。
次に、4本のOTT外科用縫合糸で脇腹を縫合します。フロープローブを流量計に再度接続し、ラットを背側の位置に戻して腎血流を確認します。最終的なフロープローブの調整を行い、腎動脈上の位置を最適化します。
最後に、4つのオット外科用縫合糸で皮膚の3つのオットシルクで筋肉を縫合します。ラットが麻酔から完全に回復したら、ラットを運動応答ケージングシステムに戻してフロープローブを血流計に接続し、プローブおよび流量測定を安定させるために約1週間の回復期間を許容する。平均動脈圧と血流は、低塩食から高塩食に切り替えながら、鈍い塩に敏感なラットで継続的に測定されました。
雄ラットからのこの代表的なデータは、4週間の期間にわたって記録され、分平均で示されている。平均動脈圧と血流に明確な日周差が認められた。高塩分食で血圧が上昇する一方で、血流は増加するのではなく減少する傾向があり、腎血管抵抗の増加を示唆しています。
この技術の大きな利点は、長期間にわたって、そして最も重要なことに、麻酔されていない状態で腎血流を研究できることです。これは、制御された麻酔されていない条件下で同じ動物を使用し、同じ動物を短期間または非常に長期間追跡して、特定の刺激または病理学的疾患に対する反応が何であるかを確認できるさまざまな刺激への反応を研究する場合に非常に重要です。
