El registro continuo del flujo sanguíneo renal en ratas instrumentadas nos permite determinar temporalmente la secuencia de eventos que conducen al proceso de la enfermedad que estamos estudiando. En nuestro caso, es hipertensión y estamos tratando de determinar si una reducción del flujo sanguíneo renal, que ocurre en la hipertensión, precede o es una consecuencia de la presión arterial alta. El sistema que demostraremos hoy y la preparación del animal está realmente diseñado para permitir una determinación continua de 24 horas del flujo sanguíneo renal durante muchas semanas a la vez para estudiar eventos crónicos y estudiar a la rata en su entorno doméstico, jaulas.
Al igual que con todas las técnicas quirúrgicas, la práctica, la paciencia y la atención al detalle, tendremos que dominar estos procedimientos hasta que el implemento se pueda llevar a cabo a tiempo. Para comenzar a afeitarse todo el abdomen en una región en la siesta alrededor de la séptima vértebra cervical de una rata anestesiada con un cortapelos eléctrico. Después del afeitado, limpie el área tres veces alternando con 10% de povidona yodada y 70% de etanol.
Coloque la rata en posición prona. Haz un corte de un centímetro con el bisturí en la siesta y el flanco izquierdo. Luego realice una disección contundente con fórceps hemostáticos en un espacio subcutáneo libre desde la incisión del flanco hasta la parte posterior del cuello.
Conecte el botón de piel a la sonda de flujo y pase la sonda de flujo a través de este túnel subcutáneo desde el cuello hasta la incisión del flanco con pinzas hemostáticas. Luego coloque la rata en posición supina y haga una incisión abdominal de cuatro a cinco centímetros en la línea media. Diseccionar el área alrededor de la arteria renal izquierda con pinzas microdisectadoras curvas que expongan el espacio suficiente para colocar la sonda de flujo.
Luego, sin rodeos, perfore el músculo lumbar cuadrado izquierdo con los fórceps hemostáticos y tire de la cabeza de la sonda de flujo a través de la arteria renal debajo del tejido graso hacia la cavidad abdominal. Coloque la malla de fibra de poliéster en la pared abdominal. Enganche la punta de la sonda de flujo a la arteria renal izquierda y conéctela al medidor de flujo.
Agregue un poco de gel alrededor de la punta de la sonda y el valor del caudal aparecerá en el medidor de flujo. Pegue la malla de fibra de poliéster unida a la sonda a la pared abdominal con adhesivo tisular y manténgala hasta que esté seca y adherida. Una vez que la sonda esté en su lugar, desconecte la sonda de flujo del medidor de flujo y cubra el abdomen con una gasa salina empapada.
Para suturar la sonda, gire la rata a la posición prona. Conecte el botón de piel a la sonda de flujo y haga un bucle circular de la sonda de flujo por vía subcutánea en el flanco. Suturar la incisión en el cuello y el botón en la piel.
Luego suture el flanco con cuatro suturas quirúrgicas ott. Conecte la sonda de flujo al medidor de flujo nuevamente y vuelva a colocar la rata en la posición dorsal para verificar el flujo sanguíneo renal. Realice ajustes finales de la sonda de flujo para optimizar su posición en la arteria renal.
Finalmente, suture el músculo con tres ott de seda en la piel con cuatro ott de sutura quirúrgica. Cuando la rata esté completamente recuperada de la anestesia, devuelva la rata a un sistema de jaula de respuesta de movimiento, conecte la sonda de flujo al medidor de flujo sanguíneo y permita un período de recuperación de aproximadamente una semana para estabilizar la sonda y la medición del flujo. La presión arterial media y el flujo sanguíneo se midieron continuamente en ratas sensibles a la sal mientras cambiaban de una dieta baja a alta en sal.
Estos datos representativos de una rata macho se registraron durante un período de cuatro semanas y se muestran con un promedio de minutos. Se observó una clara diferencia diurna en la presión arterial media y el flujo sanguíneo. Mientras que la presión arterial aumenta con una dieta alta en sal, el flujo sanguíneo tiende a disminuir en lugar de aumentar, lo que sugiere un aumento de la resistencia vascular renal.
La gran ventaja de esta técnica es que puede estudiar el flujo sanguíneo renal durante largos períodos de tiempo, y lo más importante en condiciones no anestesiadas. Esto es de gran importancia cuando se estudia la respuesta a diversos estímulos donde se puede utilizar el mismo animal bajo condiciones controladas no anestesiadas y seguir a ese mismo animal durante períodos cortos o períodos muy largos para ver cuál es la respuesta a algún estímulo particular o enfermedad patológica.
