L’enregistrement continu du flux sanguin rénal chez les rats instrumentés nous permet de déterminer temporairement la séquence des événements qui mènent au processus pathologique que nous étudions. Dans notre cas, c’est l’hypertension et nous essayons de déterminer si une réduction du débit sanguin rénal, qui se produit dans l’hypertension, précède ou est une conséquence de l’hypertension artérielle. Le système que nous allons démontrer aujourd’hui et la préparation de l’animal est vraiment conçu pour permettre une détermination continue 24 heures sur 24 du débit sanguin rénal pendant plusieurs semaines à la fois pour étudier les événements chroniques et étudier le rat dans son environnement domestique, les cages.
Comme pour toutes les techniques chirurgicales, la pratique, la patience et le souci du détail, nous devrons maîtriser ces procédures jusqu’à ce que l’outil puisse être effectué à temps. Pour commencer à raser tout l’abdomen dans une région de la sieste autour de la septième vertèbre cervicale d’un rat anesthésié avec une tondeuse électrique. Après le rasage, essuyez la zone trois fois en alternant avec 10% de povidone iode et 70% d’éthanol.
Placez le rat en position couchée. Faites une coupe d’un centimètre avec le scalpel sur la sieste et le flanc gauche. Ensuite, effectuez une dissection contondante avec une pince hémostatique dans un espace sous-cutané dégagé de l’incision du flanc à l’arrière du cou.
Fixez le bouton cutané à la sonde d’écoulement et passez la sonde d’écoulement à travers ce tunnel sous-cutané du cou à l’incision du flanc avec une pince hémostatique. Ensuite, placez le rat en décubitus dorsal et faites une incision abdominale médiane de quatre à cinq centimètres. Disséquer la zone autour de l’artère rénale gauche à l’aide d’une pince à microdissection incurvée exposant l’espace suffisant pour placer la sonde d’écoulement.
Ensuite, franchement, percez le muscle lombaire quadratus gauche avec la pince hémostatique et tirez la tête de la sonde d’écoulement à travers l’artère rénale sous le tissu adipeux dans la cavité abdominale. Placez le filet de fibre de polyester sur la paroi abdominale. Accrochez l’extrémité de la sonde d’écoulement à l’artère rénale gauche et connectez-la au débitmètre.
Ajoutez un peu de gel autour de la pointe de la sonde et la valeur du débit apparaîtra sur le débitmètre. Collez le treillis de fibres de polyester attaché à la sonde à la paroi abdominale à l’aide d’un adhésif tissulaire et maintenez-le jusqu’à ce qu’il soit sec et collé. Une fois la sonde en place, débranchez la sonde de débit du débitmètre et couvrez l’abdomen avec de la gaze imbibée de solution saline.
Pour suturer la sonde, tournez le rat en position couchée. Fixez le bouton de peau à la sonde d’écoulement et faites une boucle circulaire de la sonde d’écoulement par voie sous-cutanée sur le flanc. Suturer l’incision au niveau du cou et le bouton à la peau.
Ensuite, suturez le flanc avec quatre sutures chirurgicales ott. Reconnectez la sonde de débit au débitmètre et retournez le rat en position dorsale pour vérifier le débit sanguin rénal. Effectuer les derniers ajustements de la sonde de débit pour optimiser sa position sur l’artère rénale.
Enfin, suturez le muscle avec trois soies ott dans la peau avec quatre sutures chirurgicales ott. Lorsque le rat est complètement rétabli de l’anesthésie, il retourne à un système de cage de réponse au mouvement, connectez la sonde de débit au débitmètre sanguin et laissez une période de récupération d’environ une semaine pour stabiliser la sonde et la mesure du débit. La pression artérielle moyenne et le débit sanguin ont été mesurés en continu chez des rats sensibles au sel terne tout en passant d’un régime pauvre en sel à un régime riche en sel.
Ces données représentatives d’un rat mâle ont été enregistrées sur une période de quatre semaines et sont présentées avec une moyenne infime. Une nette différence diurne a été observée dans la pression artérielle moyenne et le débit sanguin. Alors que la pression artérielle augmente avec un régime riche en sel, le flux sanguin a tendance à diminuer plutôt qu’à augmenter, ce qui suggère une résistance vasculaire rénale accrue.
Le grand avantage de cette technique est qu’elle peut étudier le débit sanguin rénal sur de longues périodes de temps, et surtout dans des conditions non anesthésiées. Ceci est d’une grande importance lorsque vous étudiez la réponse à divers stimuli où vous pouvez utiliser le même animal dans des conditions contrôlées non anesthésiées et suivre ce même animal sur de courtes périodes ou de très longues périodes pour voir quelle est la réponse à un stimulus particulier ou à une maladie pathologique.
