계측 된 쥐의 신장 혈류를 지속적으로 기록하면 우리가 연구중인 질병 과정으로 이어지는 사건의 순서를 일시적으로 결정할 수 있습니다. 우리의 경우, 그것은 고혈압이고 우리는 고혈압에서 발생하는 신장 혈류의 감소가 고혈압보다 선행하는지 또는 고혈압의 결과인지 확인하려고 노력하고 있습니다. 우리가 오늘 시연 할 시스템과 동물의 준비는 만성 사건을 연구하고 가정 환경 인 케이지에서 쥐를 연구하기 위해 한 번에 몇 주 동안 신장 혈류를 24 시간 지속적으로 측정 할 수 있도록 설계되었습니다.
모든 수술 기술, 연습, 인내 및 세부 사항에 대한 관심과 마찬가지로 도구가 제 시간에 수행 될 때까지 이러한 절차를 마스터해야합니다. 시작하려면 전기 클리퍼로 마취 된 쥐의 일곱 번째 자궁 경부 척추 주위의 낮잠 부위에서 복부 전체를 면도하십시오. 면도 후 10 % 포비돈 요오드와 70 % 에탄올로 번갈아 가며 해당 부위를 세 번 닦습니다.
쥐를 경향이있는 위치에 놓습니다. 낮잠과 왼쪽 옆구리에 메스로 1 센티미터를 자릅니다. 그런 다음 옆구리 절개에서 목 뒤쪽까지 깨끗한 피하 공간에서 지혈 겸자로 둔한 해부를 수행하십시오.
피부 버튼을 플로우 프로브에 부착하고 지혈 겸자로 목에서 옆구리 절개로이 피하 터널을 통해 플로우 프로브를 통과시킵니다. 그런 다음 쥐를 앙와위 자세에 놓고 4-5 센티미터의 정중선 복부 절개를하십시오. 유동 프로브를 배치하기에 충분한 공간을 노출시키는 구부러진 미세 해부 집게로 왼쪽 신장 동맥 주변 영역을 해부합니다.
그런 다음 지혈 겸자로 왼쪽 사변형 요추 근육을 관통하고 지방 조직 아래의 신장 동맥을 통해 흐름 프로브의 머리를 복강으로 당깁니다. 폴리 에스테르 섬유 메쉬를 복벽에 놓습니다. 유량 프로브의 끝을 왼쪽 신장 동맥에 걸고 유량계에 연결합니다.
프로브 팁 주위에 젤을 추가하면 유량 값이 유량계에 나타납니다. 프로브에 부착 된 폴리 에스테르 섬유 메쉬를 조직 접착제를 사용하여 복벽에 붙이고 건조 될 때까지 누르고 접착됩니다. 프로브가 제자리에 있으면 유량계에서 유량 프로브를 분리하고 식염수에 적신 거즈로 복부를 덮습니다.
프로브를 봉합하려면 쥐를 경향이있는 위치로 돌리십시오. 스킨 버튼을 플로우 프로브에 부착하고 측면에서 피하로 플로우 프로브의 원형 루프를 만듭니다. 목의 절개와 버튼을 피부에 봉합하십시오.
그런 다음 4 개의 ott 수술 봉합사로 측면을 봉합하십시오. 유량 프로브를 유량계에 다시 연결하고 쥐를 등 위치로 되돌려 신장 혈류를 확인합니다. 신장 동맥에서의 위치를 최적화하기 위해 최종 흐름 프로브를 조정합니다.
마지막으로, 4 개의 ott 외과 봉합사로 피부에 3 개의 ott 실크로 근육을 봉합합니다. 래트가 마취로부터 완전히 회복되면 래트를 운동 반응 케이지 시스템으로 복귀시켜 유동 프로브를 혈류 측정기에 연결하고 약 일주일의 회복 기간을 두어 프로브를 안정화시키고 유량 측정을 허용한다. 평균 동맥압과 혈류는 저염 식단에서 고염 식단으로 전환하는 동안 둔한 염에 민감한 쥐에서 지속적으로 측정되었습니다.
수컷 쥐로부터의 이러한 대표적인 데이터는 4주에 걸쳐 기록되었고, 분 평균으로 도시된다. 평균 동맥압과 혈류에서 명확한 일주 차이가 관찰되었습니다. 높은 염분 식단으로 혈압이 증가하는 동안 혈류는 증가하기보다는 감소하는 경향이 있어 신장 혈관 저항이 증가함을 시사합니다.
이 기술의 가장 큰 장점은 장기간에 걸쳐 신장 혈류를 연구 할 수 있으며 가장 중요한 것은 마취되지 않은 상태에서 연구 할 수 있다는 것입니다. 이것은 통제된 마취되지 않은 상태에서 동일한 동물을 사용하고 특정 자극이나 병리학적 질병에 대한 반응이 무엇인지 확인하기 위해 단기간 또는 매우 오랜 기간 동안 동일한 동물을 추적할 수 있는 다양한 자극에 대한 반응을 연구할 때 매우 중요합니다.
