تقسيم العظام الصدغية البشرية عالي السرعة لتقييم أمراض الأذن الوسطى المرتبطة ب COVID-19

Please note that all translations are AI generated. Click here for the English version.

2.2K Views

•

03:42 min

•

May 18th, 2022

DOI :

10.3791/64012-v

May 18th, 2022

•

Nicholas S. Andresen¹, Megan K. Wood², Daniela Čiháková³, C. Matthew Stewart¹

¹Department of Otolaryngology - Head & Neck Surgery, Johns Hopkins University School of Medicine, ²W. Harry Feinstone Department of Molecular Microbiology and Immunology, Johns Hopkins University Bloomberg School of Public Health, ³Department of Pathology, Johns Hopkins University School of Medicine

Transcript

يقلل هذا البروتوكول من وقت معالجة العظام الصدغية من 9 إلى 10 أشهر إلى 10 إلى 14 يوما. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها تسمح بالتقييم السريع لأمراض الأذن ، والتي في حالتنا ذات صلة بتقييم أمراض الأذن الوسطى المرتبطة ب COVID-19. قد تكون هذه التقنية مفيدة بشكل خاص للدراسات الحساسة للوقت للعظم الصدغي.

في المستقبل ، قد يتم تحسينه بشكل أكبر للاستخدام في دراسة أمراض الأذن الداخلية. ابدأ الحصاد أثناء تشريح الجثة وقسم الأعصاب القحفية بشكل حاد إلى القناة السمعية الداخلية. قم بعمل أول شق عظمي باستخدام العظم العظمي الموازي والإنسي للجزء الحرشفي من العظم الصدغي.

ثم قم بإجراء الشق العظمي الثاني الموازي للأول عند الحدود الإنسية للعظم الصدغي. اجعل الشق الثالث عند ثلاثة إلى أربعة سنتيمترات أماميا وموازيا للتلال الصخرية. بعد ذلك ، اجعل الشق الرابع موازيا تقريبا للشق الثالث عند سنتيمترين خلف التلال الصخرية.

استخدم تشريحا حادا لتحرير الأنسجة الرخوة المرفقة على طول الحافة السفلية للعينة وإزالة العظم الصدغي. بعد الحصاد ، قم على الفور بغمر الأنسجة في 200 إلى 300 ملليلتر من الفورمالين المخزن مؤقتا بنسبة 10٪. ثم اضبط منشارا دقيقا مع شفرات ماسية مزدوجة على مسافة خمسة ملليمترات.

لإزالة تكلس الأنسجة بسرعة، قم بقطع كل عينة إلى ثلاثة أقسام بحيث يكون سمك القسم المركزي من العظم الصدغي خمسة ملليمترات وتلك الموجودة على كلا الطرفين بسماكة ثلاثة إلى خمسة ملليمترات. ضع الأقسام في 200 إلى 300 ملليلتر من 0.37-molar EDTA لمدة سبعة إلى 10 أيام في درجة حرارة الغرفة للتليين. أظهر تلطيخ الهيماتوكسيلين والإيوسين في الغشاء المخاطي للأذن الوسطى وأنبوب استاكيوس أنه يتم الحفاظ على الأنسجة بعد المعالجة باستخدام هذا البروتوكول.

أظهرت التحليلات الكيميائية النسيجية المناعية وجود ACE2 ، سيرين البروتياز عبر الغشاء ، وبروتينات الفورين داخل هذه الأنسجة ، مما يوفر جذرا محتملا لعدوى SARS-CoV2 في ظهارة الجهاز التنفسي للأذن الوسطى. من المهم وضع الأنسجة العظمية الصدغية بشكل مناسب داخل منشار الماس. تشمل التقنيات البديلة التي يمكن دمجها مع هذه الطريقة الكيمياء النسيجية المناعية للبروتينات المختلفة وبقع الأنسجة المختلفة والنسخ.

سمحت لنا هذه التقنية بإجراء تقييم سريع لوجود البروتينات المشاركة في عدوى SARS-CoV2 داخل الأذن الوسطى خلال جائحة COVID-19.

Summary

Explore More Videos

183

Chapters in this video

0:04

Introduction

0:47

Temporal Bone Harvest

1:40

Tissue Fixation, Decalcification, and Sectioning

2:27