Ce protocole réduit le temps de traitement osseux temporal de 9 à 10 mois à 10 à 14 jours. Le principal avantage de cette technique est qu’elle permet l’évaluation rapide de l’otopathologie, ce qui, dans notre cas, est pertinent pour l’évaluation de la pathologie de l’oreille moyenne associée à la COVID-19. Cette technique peut être particulièrement utile pour les études sensibles au temps de l’os temporal.
À l’avenir, il pourrait être optimisé davantage pour l’étude de la pathologie de l’oreille interne. Commencez la récolte pendant l’autopsie et divisez brusquement les nerfs crâniens dans le conduit auditif interne. Faites la première incision osseuse avec l’ostéotomie parallèle et juste médiale à la partie squameuse de l’os temporal.
Ensuite, effectuez la deuxième incision osseuse parallèle à la première à la bordure médiale de l’os temporal. Faites la troisième incision à trois à quatre centimètres avant et parallèlement à la crête pétreuse. Ensuite, faites la quatrième incision à peu près parallèle à la troisième à deux centimètres postérieur à la crête pétreuse.
Utilisez une dissection tranchante pour libérer les tissus mous attachés le long du bord inférieur de l’échantillon et enlever l’os temporal. Après la récolte, immergez immédiatement le tissu dans 200 à 300 millilitres de formol tamponné à 10%. Ensuite, réglez une micro scie de précision avec deux lames diamantées à une distance de cinq millimètres.
Pour une décalcification rapide des tissus, coupez chaque échantillon en trois sections de sorte que la section centrale de l’os temporal ait cinq millimètres d’épaisseur et que celles de chaque extrémité aient une épaisseur de trois à cinq millimètres. Placer les sections dans 200 à 300 millilitres d’EDTA de 0,37 molaire pendant sept à 10 jours à température ambiante pour le ramollissement. La coloration à l’hématoxyline et à l’éosine de la muqueuse de l’oreille moyenne et de la trompe d’Eustache a montré que le tissu est préservé après traitement à l’aide de ce protocole.
Les analyses immunohistochimiques ont montré la présence d’ACE2, de sérine protéase transmembranaire et de protéines furine dans ces tissus, fournissant une racine possible pour l’infection par le SRAS-CoV2 dans l’épithélium respiratoire de l’oreille moyenne. Il est important de positionner correctement le tissu osseux temporal dans la scie à diamant. Les techniques alternatives qui peuvent être combinées avec cette méthode comprennent l’immunohistochimie pour différentes protéines, différentes taches tissulaires et la transcriptomique.
Cette technique nous a permis d’évaluer rapidement la présence des protéines impliquées dans l’infection par le SRAS-CoV2 dans l’oreille moyenne pendant la pandémie de COVID-19.
