ابدأ بارتداء قناع وغطاء شعر ومعطف مختبر نظيف أو دعك. بعد ذلك ، ضع الفأر المخدر على سطح نظيف منفصل عن منطقة الجراحة وقم بتركيبه مع مخروط الأنف الذي يوفر 1.5٪ إيزوفلوران مع 21٪ أكسجين. ثم حقن البوبرينورفين تحت الجلد في المنطقة الصدرية العنقية الظهرية.
أيضا حقن الهيبارين داخل الصفاق لمنع تشكيل الجلطة خلال فترة الانسداد. ضع مرهما للعيون على العينين لمنع تلف القرنية وإزالة الشعر من البطن البطني باستخدام كليبرز . حرك الماوس إلى بطانية الماء الساخن في منطقة الجراحة.
مرة أخرى ، قم بتركيبه مع مخروط الأنف الذي يقدم الأيزوفلوران. بعد ذلك ، ضع الماوس في راقد ظهري وقم بتأمين الأطراف على الطاولة بشريط جراحي. مراقبة درجة حرارة جسم باستخدام مقياس حرارة المستقيم الخاص بالقوارض.
بعد تطهير البطن تماما ، قم بإجراء اختبار قرصة إصبع القدم لضمان تخدير بالكامل. أخيرا ، ارتد قفازات معقمة وقم بثني موقع الجراحة بشكل معقم. أولا ، قم بعمل شق بطني في خط الوسط البطني بطول ثلاثة إلى خمسة سنتيمترات في الجلد باستخدام شفرة مشرط رقم 15.
افصل 0.5 سم من حافة الجلد عن اللفافة العضلية الأساسية للسماح بوضع الدبابيس لاحقا. ثم استمر في شق جدار البطن على طول ألبا الخطي باستخدام مقص صغير محمل بنابض وضع مبعدة . ضع وسادات شاش معقمة مبللة بمحلول ملحي معقم دافئ حول منطقة العملية.
إزالة الأمعاء الدقيقة من تجويف البطن. اقلبها بشكل جمجمي وإلى يسار ، وضعها على الفوط المبللة. ضع ضمادة شاش مبللة أخرى على الأنسجة لمنع الجفاف.
حدد موقع الشريان المساريقي العلوي ، أو SMA ، البطني إلى الوريد الأجوف السفلي الذيلي إلى الشريان البطني والجمجمة إلى الشريان الكلوي. تشريحه بعيدا عن النسيج الضام المحيط. ضع مشبك الأوعية الدموية الدقيقة الرضحية على طول قاعدة ضمور العضلات الشوكي حيث يتفرع من الشريان الأورطي البطني.
تحقق من نقص تروية الأمعاء الدقيقة من خلال ملاحظة تغير اللون من اللون الوردي إلى الأبيض الباهت. أعد الأحشاء إلى موضعها الأصلي داخل تجويف البطن طوال فترة نقص تروية. إزالة المبعدة وتغطية شق مع الشاش الرطب.
بعد فترة 45 دقيقة من نقص التروية، قم بإزالة مشبك الانسداد. تحقق من استعادة تدفق الدم من خلال مراقبة النبض المساريقي واللون المتدفق. ضع محلول ملحي معقم دافئ داخل الصفاق للحفاظ على الترطيب المناسب.
ثم أغلق عضلات البطن بخياطة 6-0 polyglactin 910. يتم تطبيق بوبيفاكايين موضعيا على طول خط شق العضلات لتخفيف الألم. أغلق الجلد باستخدام الدبابيس الجراحية أو مشابك الجرح.
أعد الماوس إلى غرفة دافئة على بطانية ماء متداولة. دع الماوس يتعافى لمدة 90 دقيقة وراقب الماوس بحثا عن علامات الألم أو الضيق. بعد إجراء القتل الرحيم الإنساني ، اجمع الأنسجة المرغوبة مثل فصوص الكبد ، بما في ذلك الفصوص الجانبية اليسرى والوسطى اليسرى والمتوسطة.
ثم جمع كل من الكلى. قطع الكلية اليسرى طوليا والكلية اليمنى كمقطع عرضي. أخيرا ، اجمع كامل طول الأمعاء الدقيقة والكبيرة.
لتقسيم الأجزاء المعوية الدقيقة إلى أقسام متساوية الطول ، قم بطي الأمعاء الدقيقة إلى شكل Z حيث يكون الخط العلوي هو الاثني عشر ، والخط الأوسط هو الصائم ، والخط السفلي هو الدقاق. الجزء المتبقي من الأمعاء هو القولون. اغسل تجويف الأجزاء المعوية بالمحلول الملحي باستخدام حقنة سعة 10 ملليلتر ملصقة بقسطرة وعائية قياس 20.
بعد ذلك ، قم بقص طول الأمعاء باستخدام مقص تشريح دقيق ووضع كل جزء معوي مسطحا مع توجيه الجانب اللمعي لأعلى. باستخدام حقنة سعة ثلاثة ملليلتر مثبتة بإبرة قياس 27 ، ضع بسخاء 10٪ من الفورمالين المخزن بالتنقيط لتغطية طول الغشاء المخاطي بالكامل. ثم لف كل جزء بشكل محيطي حول عود أسنان ، مع التأكد من أن الجزء القريب يشكل الجزء الداخلي من اللفة وأن التجويف يواجه الداخل.
بعد التدحرج ، يجب أن تبدو الأمعاء مثل لفة سويسرية. ضع الوجه الحلزوني للفة السويسرية الفردية داخل أشرطة الأنسجة المنفصلة. أخيرا ، ضع المناديل في قوارير ملصقة مملوءة بنسبة 10٪ من الفورمالين المخزن لتثبيتها في درجة حرارة الغرفة.
بعد IRI المعوي ، أظهر تلطيخ H& E من الصائم والدقاق من الفئران في المجموعة الوهمية الزغابات الطويلة والرقيقة دون تشويه. في حين أظهرت أقسام من الفئران في مجموعة IRI مناطق نخر ونزيف مع تقشير وتشويه الزغابات المتبقية. علاوة على ذلك ، زاد الضرر المجهري لجميع الأجزاء المعوية الصغيرة الثلاثة للحيوانات التي تخضع ل IRI بشكل كبير مقارنة بتلك التي خضعت لبضع البطن الوهمي.
