يستخدم إعداد الجهاز المكون من غرفتين لدراسة تفضيل درجة حرارة الحشرات ويمكن تعديله لدراسة حالات تفضيل الاختيار الثنائي الأخرى مثل الضوء مقابل الظلام أو الرطوبة العالية مقابل الرطوبة المنخفضة. تتمثل المزايا الرئيسية لهذه التقنية في الإعداد البسيط ، والمساحة الواسعة التي تسمح للحشرات بإظهار طبيعتها الطائرة عند اختيار درجة الحرارة المفضلة لديها ، وسهولة التسجيل بدون معدات خارجية. أصعب جزء في البروتوكول هو إزالة خرق الأكريليك بعد التجربة.
هذا لأن هناك فرصة كبيرة لهروب الحشرات. وبالتالي ، من الأهمية بمكان بالنسبة لنا استخدام ثاني أكسيد الكربون لتخدير الحشرات. سيوضح الإجراء كينغا ستوبيرسكا ولورنا جلين ، وكلاهما طالبان ماجستير من مختبري.
للبدء ، قم بإعداد 2 أقفاص فارغة من البعوض مع فتحات كم 12 سم وتأكد من عدم وجود ثقوب أو أضرار أخرى. ثم باستخدام شفاط ميكانيكي ، انقل 30 حشرة إلى قفص منفصل لتسهيل التعامل معها والتخلص منها بعد التجربة. اضبط الحاضنات على درجات الحرارة المطلوبة واسمح لها بالتسخين والاستقرار.
يستغرق حوالي 30 دقيقة للوصول إلى درجة حرارة في حدود 25 إلى 30 درجة مئوية. ثم ضع قفص البعوض فارغ في حاضنة وإطعام الأكمام من القفص من خلال الفتحة الأمامية للحاضنة. تأكد من درجة حرارة الهواء الداخلي للحاضنة باستخدام مسبار درجة الحرارة.
بعد ذلك ، ضع رفرف قابل للفتح معد بشريط لاصق فوق الفتحة الموجودة في أنبوب الأكريليك. نشمر الأكمام البارزة من خلال الفتحة الموجودة أمام الحاضنة الأولى ، وقم بتثبيتها على أحد طرفي أنبوب الأكريليك بشريط مطاطي. ثم ضع الحاضنات في مواجهة بعضها البعض وأدخل أحد طرفي أنبوب الأكريليك في غلاف فتحة الحاضنة الثانية.
تأكد من أن قطر أنبوب الأكريليك أكبر من الفتحة الموجودة في مقدمة الحاضنات بحيث يغطي الفتحة بالكامل. تأكد من أن أنبوب الأكريليك ليس فضفاضا ومتدليا بين الحاضنات. إذا كان الأمر كذلك ، اسحب أكمام القفص لإزالة المواد الزائدة بين القفص والشريط المطاطي.
لوضع البعوض في الداخل ، افتح رفرف الشريط اللاصق. ضع قمعا في فتحة أنبوب الأكريليك ثم أفرغ الحشرات في الأنبوب من خلال القمع. بعد إفراغ الحشرات ، قم بإزالة القمع وتغطية فتحة الأنبوب بغطاء شريط لاصق.
اتركيه لمدة 30 دقيقة للحشرات لاختيار الغرفة المفضلة. في نهاية وقت الاستقرار ، راقب بصريا واكتب عدد الحشرات التي شوهدت في جسر أنبوب الأكريليك. ثم اضغط أو نفخ جميع الحشرات في الجسر على جانبي الحاضنة أو عن طريق إطلاق ثاني أكسيد الكربون في الجسر.
بعد ذلك ، قم بقرص وإغلاق الأكمام من أنبوب الأكريليك على كلا الجانبين عن طريق تثبيتها بسرعة بعقدة ضيقة. ثم قم بإزالة الأقفاص من كل من الحاضنات وعد الحشرات بصريا في كل قفص. تأكد من أن الأرقام من كل من الحاضنات والجسر تصل إلى 30.
في هذه الدراسة تم تحديد درجة الحرارة المفضلة للبعوض وذباب الفاكهة باستخدام نموذج الغرفتين. أظهرت النتائج عدم وجود فرق كبير عندما تم الحفاظ على كلا الأقفاص عند 27 درجة مئوية ، مما يشير إلى قدرة البعوض على الاختيار بحرية بين الأقفاص التي تظهر سلوكياتها الطبيعية. على العكس من ذلك ، عندما تم ضبط الغرفتين على درجات حرارة مختلفة ، اختار البعوض باستمرار درجة الحرارة المثلى البالغة 27 درجة مئوية على 30 درجة مئوية.
وبالمثل ، عندما تم اختبار الإعداد باستخدام Drosophila Melanogaster ، وهو نموذج آخر للأديم الظاهر ، تجنب ذباب الفاكهة الغرفة الأكثر دفئا وفضل درجة الحرارة المثلى البالغة 25 درجة مئوية. تأكد من أن الإعداد مغلق تماما مع عدم وجود مساحات للاختباء ولا شبكة تعطل منطقة الطيران بحيث يمكن للحشرات الاختيار بحرية بين غرف 2.
