Bu iki odacıklı aparat kurulumu, böceklerin sıcaklık tercihini incelemek için kullanılır ve aydınlığa karşı karanlık veya yüksek ila düşük nem gibi diğer ikili seçim tercih durumlarını incelemek için değiştirilebilir. Bu tekniğin temel avantajları, basit kurulum, böceklerin tercih ettikleri sıcaklığı seçerken uçan doğalarını sergilemelerini sağlayan geniş alan ve harici ekipman olmadan kolay puanlamadır. Protokolün en zor kısmı, deneyden sonra akrilik yarığın giderilmesidir.
Bunun nedeni, böceklerin kaçma şansının yüksek olmasıdır. Bu nedenle, böcekleri uyuşturmak için karbondioksiti kullanmak bizim için çok önemlidir. Prosedürü gösterenler, her ikisi de laboratuvarımdan yüksek lisans öğrencileri olan Kinga Stobierska ve Lorna Glenn olacak.
Başlamak için, 12 santimetre manşon açıklığına sahip 2 boş sivrisinek kafesi hazırlayın ve delik veya başka hasar olmadığından emin olun. Daha sonra mekanik bir aspiratör kullanarak, deneyden sonra daha kolay kullanım ve bertaraf için 30 böceği ayrı bir kafese aktarın. İnkübatörleri istenen sıcaklıklara ayarlayın ve ısınmalarına ve stabilize olmalarına izin verin.
25 ila 30 santigrat derece aralığında bir sıcaklığa ulaşmak yaklaşık 30 dakika sürer. Daha sonra bir inkübatöre boş bir sivrisinek kafesi yerleştirin ve kafesin manşonlarını inkübatörün ön deliğinden besleyin. İnkübatörün iç hava sıcaklığını bir sıcaklık probu ile onaylayın.
Daha sonra, akrilik tüpteki deliğin üzerine koli bandı ile hazırlanmış açılabilir bir kapak yerleştirin. İlk inkübatörün önündeki delikten çıkıntı yapan manşonu yuvarlayın ve akrilik tüpün bir ucuna elastik bir bantla sabitleyin. Daha sonra inkübatörleri birbirine bakacak şekilde yerleştirin ve akrilik tüpün bir ucunu ikinci inkübatör deliğinin manşonuna yerleştirin.
Akrilik tüpün çapının, inkübatörlerin önündeki delikten daha büyük olduğundan emin olun, böylece deliği tamamen kaplar. Akrilik tüpün gevşek olmadığından ve inkübatörler arasında sarkmadığından emin olun. Öyleyse, kafes ve lastik bant arasındaki fazla malzemeyi çıkarmak için kafes manşonlarını çekin.
Sivrisinekleri içine koymak için koli bandı kapağını açın. Akrilik tüpün deliğine bir huni yerleştirin ve ardından böcekleri huniden tüpe boşaltın. Böcekleri boşalttıktan sonra, huniyi çıkarın ve tüp deliğini bir koli bandı kapağı ile örtün.
Böceklerin tercih edilen odayı seçmesi için 30 dakika bekletin. Yerleşme süresinin sonunda, akrilik tüp köprüsünde görülen böceklerin sayısını görsel olarak gözlemleyin ve yazın. Ardından, köprüdeki tüm böceklere inkübatörün her iki tarafına veya karbondioksiti köprüye bırakarak dokunun veya üfleyin.
Daha sonra, her iki taraftaki akrilik tüpten manşonları sıkıca bir düğümle hızlı bir şekilde sabitleyerek sıkıştırın ve kapatın. Daha sonra kafesleri her iki inkübatörden çıkarın ve her kafesteki böcekleri görsel olarak sayın. Hem inkübatörlerden hem de köprüden gelen sayıların 30'a kadar olduğundan emin olun.
Bu çalışmada sivrisineklerin ve meyve sineklerinin sıcaklık tercihi iki odacıklı model kullanılarak belirlenmiştir. Sonuçlar, her iki kafes de 27 santigrat derecede tutulduğunda anlamlı bir fark göstermedi, bu da sivrisineklerin doğal davranışlarını sergileyen kafesler arasında serbestçe seçim yapma yeteneklerini gösterdi. Tersine, iki oda farklı sıcaklıklara ayarlandığında, sivrisinekler sürekli olarak 30 santigrat derecenin üzerinde 27 santigrat derecelik optimum sıcaklığı seçtiler.
Benzer şekilde, kurulum Drosophila Melanogaster ile test edildiğinde, başka bir ektoderm modeli meyve sinekleri daha sıcak odacıktan kaçındı ve 25 santigrat derecelik optimum sıcaklıklarını tercih etti. Kurulumun hiçbir saklanma alanı olmadan tamamen kapatıldığından ve uçan alanı bozan bir ağ olmadığından emin olun, böylece böcekler 2 oda arasında serbestçe seçim yapabilir.
