蚊やその他の外温線の温度選好性の決定

この2つのチャンバー装置のセットアップは、昆虫の温度選好を研究するために使用され、明対暗または高湿度対低湿度などの他の二者択一選好状況を研究するために変更することができる。この技術の主な利点は、簡単なセットアップ、昆虫が好みの温度を選択するときに飛行特性を示すことを可能にする広々とした領域、および外部機器なしで簡単にスコアリングできることです。プロトコルの最も難しい部分は、実験後にアクリルの破損を取り除くことです。

これは、昆虫が逃げる可能性が高いためです。したがって、二酸化炭素を使用して昆虫を麻酔することが重要です。手順を実演するのは、私の研究室の修士課程の学生であるキンガ・ストビエルスカとローナ・グレンです。

まず、12センチのスリーブ開口部を持つ空の蚊帳を2つ用意し、穴やその他の損傷がないことを確認します。次に、機械式吸引器を使用して、実験後の取り扱いと処分を容易にするために、30匹の昆虫を別のケージに移します。インキュベーターを希望の温度に設定し、加熱して安定させます。

摂氏30〜25度の範囲の温度に達するには約30分かかります。次に、空の蚊ケージをインキュベーターに入れ、ケージのスリーブをインキュベーターの前穴に通します。温度プローブでインキュベーターの内気温を確認します。

次に、ダクトテープで用意した開閉式フラップをアクリルチューブの穴の上に置きます。最初のインキュベーターの前の穴から突き出ているスリーブを巻き上げ、ゴムバンドでアクリルチューブの一端に固定します。次に、インキュベーターを互いに向かい合わせに配置し、アクリルチューブの一端を2番目のインキュベーター穴のスリーブに挿入します。

アクリルチューブの直径がインキュベーターの前面の穴よりも大きいことを確認して、穴を完全に覆ってください。アクリルチューブが緩んでインキュベーターの間にぶら下がっていないことを確認してください。そうである場合は、ケージスリーブを引っ張って、ケージと輪ゴムの間の余分な材料を取り除きます。

蚊を中に入れるには、ダクトテープフラップを開きます。アクリルチューブの穴に漏斗を置き、漏斗を通してチューブに昆虫を空にします。昆虫を空にした後、漏斗を取り外し、チューブの穴をダクトテープフラップで覆います。

昆虫が好みの部屋を選択するために30分間放置してください。沈降時間の終わりに、アクリル管橋に見られる昆虫の数を目視で観察して書き留めます。次に、インキュベーターの両側にブリッジ内のすべての昆虫をタップまたは吹き飛ばすか、二酸化炭素をブリッジに放出します。

次に、両側のアクリルチューブからスリーブをしっかりと結び目ですばやく固定してつまんで閉じます。次に、両方のインキュベーターからケージを取り外し、各ケージ内の昆虫を視覚的に数えます。インキュベーターとブリッジの両方からの数字が合計30になることを確認してください。

本研究では、蚊とショウジョウバエの温度選好性を2室モデルを使用して決定しました。結果は、両方のケージを摂氏27度に維持した場合、有意差を示さず、蚊が自然な行動を示すケージを自由に選択できることを示しています。逆に、2つのチャンバーが異なる温度に設定されている場合、蚊は一貫して摂氏30度よりも摂氏27度の最適温度を選択しました。

同様に、ショウジョウバエの別の外胚葉モデルであるショウジョウバエでセットアップをテストしたとき、ショウジョウバエはより暖かいチャンバーを避け、摂氏25度の最適温度を好みました。昆虫が2つのチャンバーから自由に選択できるように、隠れスペースや飛行エリアを乱すメッシュがなく、セットアップが完全に密閉されていることを確認してください。