这种双室装置设置用于研究昆虫的温度偏好,并且可以修改以研究其他二元选择偏好情况,例如浅湿度与深色或高湿度与低湿度。这种技术的主要优点是设置简单,宽敞的区域允许昆虫在选择首选温度时展示其飞行性质,并且无需外部设备即可轻松划痕。该方案中最困难的部分是在实验后去除丙烯酸裂缝。
这是因为昆虫逃逸的可能性很高。因此,对我们来说,使用二氧化碳来麻醉昆虫至关重要。演示该程序的是Kinga Stobierska和Lorna Glenn,他们都是我实验室的硕士生。
首先,准备 2 个带有 12 厘米袖口的空蚊笼,并确保没有孔或其他损坏。然后使用机械吸气器,将30只昆虫转移到单独的笼子中,以便在实验后更容易处理和处置。将培养箱设置为所需的温度,并让它们加热并稳定。
达到 25 至 30 摄氏度的温度大约需要 30 分钟。然后将一个空蚊笼放入孵化器中,并通过孵化器的前孔喂食笼子的袖子。用温度探头确认培养箱的内部空气温度。
接下来,将用胶带准备好的可打开翻盖放在丙烯酸管的孔上。卷起从第一个培养箱前面的孔中伸出的套筒,并用松紧带将其固定在丙烯酸管的一端。然后将培养箱面对面放置,并将丙烯酸管的一端插入第二个培养箱孔的套筒中。
确保亚克力管的直径大于培养箱前面的孔,使其完全覆盖孔。确保亚克力管没有松动并在培养箱之间悬空。如果是,请拉动笼套以去除笼子和橡皮筋之间的多余材料。
要将蚊子放入其中,请打开胶带翻盖。将漏斗放入丙烯酸管的孔中,然后通过漏斗将昆虫倒入管中。清空昆虫后,取下漏斗并用胶带翻盖盖住管孔。
静置 30 分钟,让昆虫选择首选的房间。在沉降时间结束时,目视观察并记下在亚克力管桥中看到的昆虫数量。然后将桥中的所有昆虫轻拍或吹到培养箱的两侧,或者将二氧化碳释放到桥中。
接下来,用紧结快速固定两侧的亚克力管上的袖子并关闭袖子。然后从两个孵化器中取出笼子,并目视计数每个笼子中的昆虫。确保孵化器和桥梁的数量加起来为 30。
在本研究中,使用两室模型确定蚊子和果蝇的温度偏好。结果显示,当两个笼子都保持在27摄氏度时,没有显着差异,这表明蚊子能够在表现出自然行为的笼子之间自由选择。相反,当两个房间设置在不同的温度下时,蚊子始终选择27摄氏度而不是30摄氏度的最佳温度。
同样,当用黑腹果蝇(另一种外胚层模型)测试该装置时,果蝇避开了温暖的房间,并更喜欢25摄氏度的最佳温度。确保设置完全密封,没有隐藏空间,也没有网状物破坏飞行区域,以便昆虫可以在 2 个腔室之间自由选择。