تصميم وتنفيذ نموذج تروية الرئة خارج الجسم الحي للفئران

نوضح طريقة بسيطة لإنشاء وتنفيذ إعداد الرئة خارج الجسم الحي من البداية. يتيح ذلك إعدادا معياريا وميسور التكلفة يمكن تنفيذه لمجموعة متنوعة من الإعدادات. التقنية المعروضة هنا ميسورة التكلفة ومعيارية وقابلة للتكيف مع المختبرات التي تنشئ البروتوكول.

يمكن استخدام العملية خارج الجسم الحي لاستكمال النماذج في الجسم الحي للمساعدة في توضيح الآليات الجديدة. تم تصميم إعداد DIY هذا لدراسة الرئتين في بيئة خاضعة للرقابة. يتماشى مع التركيز البحثي الرئيسي لمختبرنا ، وهو التحقيق في الأساليب المختلفة لتحسين النتيجة بعد الإنعاش القلبي الرئوي.

ومع ذلك ، يمكن تكييف الإعداد ليناسب أهداف البحث المختلفة ، مما يجعله متعدد الاستخدامات للغاية ، وتتطلب الجراحة معرفة أساسية بتشريح الجهاز التنفسي وعلم وظائف الأعضاء ويمكن إتقانها بسرعة باتباع البروتوكول. ومع ذلك ، من الضروري اتباع الخطوات الموضحة في بروتوكولنا بجد ، والأهم من ذلك كله ، حماية الرئتين ، خاصة عند إزالة الأضلاع. لإجراء فغر القصبة الهوائية ، قرصة جلد الفئران المخدرة فوق القصبة الهوائية بالملقط وقطع الجلد.

تشريح العضلات والأنسجة بصراحة للوصول إلى القصبة الهوائية ، وضمان عدم حدوث نزيف. ثم مرر ملقط منحني أسفل القصبة الهوائية وافتحه لإفساح المجال لتمرير 3-0 خيوط تحته. ثم اربط الغرز مسبقا في عقدة صندوقية.

قم بعمل شق صغير بين حلقات الغضاريف في القصبة الهوائية وأدخل قنية القصبة الهوائية. اربط الخيط لمنع الهواء من الهروب من شق القصبة الهوائية وللتأكد من أن القنية لا تضغط على القصبة الهوائية. بمجرد تأمين قنية القصبة الهوائية ، ابدأ في تهوية الفئران.

باستخدام مقص جراحي كبير وملقط ، قم بإزالة الفراء من بطن الفئران. أمسك عملية الخنجري بالملقط وقم بعمل شق أفقي صغير أسفل الأضلاع ، مع الحرص على الحفاظ على الحجاب الحاجز سليما. قم بتوسيع القطع الأفقي لكشف الحجاب الحاجز بأكمله.

باستخدام حقنة قياس 22 ، قم بحقن الهيبارين في الوريد الأجوف السفلي ، مع الحرص على عدم ثقب الرئتين. فهم عملية الخنجري بالملقط وقطع الجمجمة على طول القص ، وتصور الرئتين باستمرار لمنع قطعها. انشر القفص الصدري بعيدا باستخدام ملقطين كبيرين واقطع الوريد الأجوف السفلي للقتل الرحيم للفأر عن طريق الاستنزاف.

قم بقص أي الغدة الصعترية الزائدة للسماح بتصور أسهل للأوعية الدموية الرئوية. حدد موقع الشريان الرئوي ومرر ملقط منحني صغير تحته. مرة أخرى ، مرر خياطة 3-0 تحتها واربطها مسبقا في عقدة صندوقية.

ثم قم بعمل شق صغير في البطين الأيمن للقلب وأدخل قنية PA. قم بتأمين القنية باستخدام الخيط وابدأ في التعطير بمعدل 1.5 ملليلتر في الدقيقة. استئصال قمة القلب على الفور لمنع تراكم الضغط في الرئتين.

باستخدام ملقط منحني صغير ، تمزق الصمام التاجي وتأكد بصريا من أن الملقط يمكن أن يدخل الأذين الأيسر دون انسداد. لف بإحكام خياطة 3-0 حول القلب أسفل الأذين ، وأدخل القنية الكهروضوئية في الأذين الأيسر ، مما يضمن تدفق المخزن المؤقت منه قبل ربط الخيط. بعد ذلك ، باستخدام مقص طرف حاد ، قم بقص أي أنسجة زائدة بين التجويف الصدري وشق القصبة الهوائية لتجنب إتلاف القصبة الهوائية.

تأكد من أن القصبة الهوائية أسفل قنية القصبة الهوائية وكتلة القلب والرئة بأكملها مرئية. لإزالة كتلة القلب والرئة والقصبة الهوائية ، أمسك قنية القصبة الهوائية واستخدم مقص الطرف الحاد المنحني لاستئصال النسيج الضام خلف القصبة الهوائية. يتم تقديم صلاحية الرئة بعد نقص التروية والتروية.

كان أطول وقت لنقص التروية للسماح ب 150 دقيقة من إعادة التروية ثماني دقائق. من الضروري تقنية الأوعية الدموية بشكل صحيح حتى تظل الرئتان المعزولتان قابلتين للحياة طوال التجربة. تظل الرئتان سليمتين بعد العملية ، مما يسمح بإجراء القياسات الأساسية مثل الوزن الرطب أو الجاف أو الأنسجة بعد التجربة.