大鼠 离体 肺灌注模型的设计和实现

我们演示了一种从头开始创建和实施离体肺装置的简单方法。这允许经济实惠的模块化设置，可以针对各种设置实施。这里介绍的技术价格合理、模块化，并且适用于设置方案的实验室。

离体操作可用于补充体内模型，以帮助阐明新的机制。这种 DIY 设置旨在在受控环境中研究肺部。它与我们实验室的主要研究重点一致，即研究各种方法来改善 CPR 后的结果。

然而，该设置可以适应不同的研究目标，使其具有高度的通用性，该手术需要呼吸解剖学和生理学的基本知识，并且可以按照方案快速掌握。尽管如此，认真遵循我们协议中描述的步骤至关重要，最重要的是，保护肺部，尤其是在切除肋骨时。要进行气管切开术，请用镊子捏住气管上方麻醉大鼠的皮肤并切开皮肤。

钝性解剖肌肉和组织以到达气管，确保无出血。然后将弯曲的镊子穿过气管下方并打开它们，以便有空间在下面通过 3-0 缝合线。然后将缝合线预先打成一个箱形结。

在气管的软骨环之间做一个小切口，然后插入气管插管。系好缝合线，以防止空气从气管切口逸出，并确保套管不会对气管造成压力。固定气管插管后，开始给大鼠通气。

使用大手术剪刀和镊子，从大鼠腹部去除皮毛。用镊子抓住剑突，在肋骨下方做一个小的水平切口，注意保持隔膜完好无损。加宽水平切口以露出整个隔膜。

用 22 号注射器将肝素注射到下腔静脉，注意不要刺穿肺部。用镊子抓住剑突，沿着胸骨进行颅骨切割，不断观察肺部以防止割伤它们。用两个大镊子将胸腔分开，切开下腔静脉，通过放血对大鼠实施安乐死。

修剪任何多余的胸腺，以便更容易地观察肺血管系统。找到肺动脉并将弯曲的小镊子穿过下方。同样，在下面穿一根 3-0 缝合线，并预先打成一个箱结。

然后在心脏的右心室做一个小切口，插入 PA 插管。使用缝合线固定套管，并以每分钟 1.5 毫升的速度开始灌注。立即切除心尖，以防止肺部压力积聚。

使用小的弯曲镊子，打破二尖瓣，并目视确认镊子可以无阻塞地进入左心房。将 3-0 缝合线紧紧缠绕在心房下方的心脏上，并将 PV 套管插入左心房，确保在系扎缝合线之前缓冲液可以从中流出。接下来，使用钝头剪刀修剪胸腔和气管切开切口之间的多余组织，以避免损坏气管。

确保可以看到气管插管下方的气管和整个心肺块。要去除心肺块和气管，请握住气管插管并使用弯曲的钝头剪刀切除气管后面的结缔组织。介绍了缺血和再灌注后的肺活力。

允许再灌注 150 分钟的最长缺血时间为 8 分钟。正确插管血管系统以使孤立的肺在整个实验过程中保持活力至关重要。手术后肺保持完整，允许在实验后进行基本测量，例如湿重或干重或组织学。