Author Spotlight: Detecting Low-Abundant Host Cell Proteins in Drug Products Using Enrichment Beads and Limited Digestion

لقد طورنا طريقة حساسة للغاية للكشف عن بروتين الخلية المضيفة منخفض الوفرة من منتج الدواء باستخدام حبات إثراء البروتين. يساعدنا هذا النهج في العثور على السبب الجذري والمخاطر المرتبطة بمنتج الدواء. هناك طرق متعددة لتحسين حد الكشف عن تحليل HCP ، والطريقة غير المستهدفة بما في ذلك على سبيل المثال لا الحصر استنفاد البروتين A ، والهضم المحدود ، وقطع الوزن الجزيئي ، والترسيب المناعي.

الطريقة المستهدفة للكشف عن بروتين الخلية المضيفة ، بما في ذلك الكروماتوغرافيا السائلة ، ومراقبة التفاعل المتعدد ، ومراقبة التفاعل المتوازي للكروماتوغرافيا غير السائلة. التحدي الرئيسي المرتبط بتحليل HCP هذا هو النطاق الديناميكي الكبير بين دواء الأجسام المضادة وبروتينات الخلية المضيفة. لذلك تهدف معظم الطرق إلى تقليل كمية الأجسام المضادة وإثراء HCP قبل تحليل LCMS لتقليل النطاق الديناميكي بين ببتيدات الأجسام المضادة وببتيدات HCP.

لذا فإن تقنية ProteoMiner وبروتوكول الهضم المحدود يحسنان بشكل كبير من حد الكشف عن تحليل HCP مقارنة بالطرق الأخرى. إنه غير متحيز مقارنة بالترسب المناعي ويمكن تطبيقه على وحدة دوائية مختلفة مقارنة بطريقة استنفاد البروتين أ. هذا البروتوكول بسيط ومباشر أيضا.

لذا فإن تقنية ProteoMiner وبروتوكول الهضم المحدود يساعداننا في تحديد العديد من HCPs التي تحلل polysorbate وعقار الأجسام المضادة للشظايا. بالاقتران مع طريقة nano LCMPRM ، يمكن أن توفر طريقة التخصيب أيضا نتائج كمية للعثور على التركيز البيولوجي ذي الصلة لبروتينات الخلايا المضيفة الإشكالية.