Мы разработали высокочувствительный метод обнаружения белка клетки-хозяина с низким содержанием в лекарственном препарате с помощью гранул обогащения протеома. Такой подход помогает нам найти первопричину и риск, связанный с лекарственным препаратом. Существует несколько способов улучшить предел обнаружения при анализе HCP, нетаргетный метод, включая, но не ограничиваясь, истощение протеина А, ограниченное переваривание, отсечку молекулярной массы, иммунопреципитацию.
Таргетный способ обнаружения белка клетки-хозяина, включающий жидкостную хроматографию, мониторинг множественных реакций и параллельный мониторинг реакций методом нежидкостной хроматографии. Основной проблемой, связанной с этим анализом HCP, является значительный динамический диапазон между препаратом антител и белками клетки-хозяина. Таким образом, большинство методов направлены на уменьшение количества антител и обогащение HCP перед анализом LCMS, чтобы уменьшить динамический диапазон между пептидами антител и пептидами HCP.
Таким образом, технология ProteoMiner и протокол ограниченного разложения значительно улучшают предел обнаружения анализа HCP по сравнению с другими методами. Он непредвзят по сравнению с иммунопреципитацией и может быть применен к другому лекарственному модулю по сравнению с методом истощения протеина А. Этот протокол также прост и понятен.
Таким образом, технология ProteoMiner и протокол ограниченного пищеварения помогают нам идентифицировать несколько медицинских работников, которые разлагают полисорбат и препарат на основе фрагментных антител. В сочетании с методом nano LCMPRM метод обогащения также может обеспечить количественные результаты для определения биологически значимой концентрации проблемных белков клетки-хозяина.
