Hemos desarrollado un método altamente sensible para detectar esas proteínas de células huésped de baja abundancia del producto farmacéutico utilizando las perlas de enriquecimiento del proteoma. Este enfoque nos ayuda a encontrar la causa raíz y el riesgo asociado con el producto farmacéutico. Hay varias formas de mejorar el límite de detección del análisis de HCP, el método no dirigido que incluye, entre otros, la depleción de la proteína A, la digestión limitada, el límite de peso molecular y la inmunoprecipitación.
La forma específica de detectar la proteína de la célula huésped, incluida la cromatografía líquida, el monitoreo de reacciones múltiples y el monitoreo de reacciones paralelas por cromatografía no líquida. El principal desafío asociado con estos análisis de HCP es el rango dinámico significativo entre el fármaco de anticuerpos y las proteínas de la célula huésped. Por lo tanto, la mayoría de los métodos tienen como objetivo reducir la cantidad de anticuerpos y enriquecer el HCP antes del análisis de LCMS para disminuir el rango dinámico entre los péptidos de anticuerpos y los péptidos de HCP.
Por lo tanto, la tecnología ProteoMiner y el protocolo de digestión limitada mejoran significativamente el límite de detección del análisis de HCP en comparación con otros métodos. No está sesgado en comparación con la inmunoprecipitación y se puede aplicar a diferentes módulos de fármacos en comparación con el método de depleción de proteína A. Este protocolo también es simple y directo.
Por lo tanto, la tecnología ProteoMiner y el protocolo de digestión limitado nos ayudan a identificar varios HCP que degradan el polisorbato y el fármaco de anticuerpos fragmentados. En combinación con el método nano LCMPRM, el método de enriquecimiento también puede proporcionar resultados cuantitativos para encontrar la concentración biológicamente relevante de proteínas problemáticas de la célula huésped.
