Nous avons mis au point une méthode très sensible pour détecter les protéines de cellules hôtes peu abondantes du produit médicamenteux à l’aide des billes d’enrichissement du protéome. Cette approche nous aide à trouver la cause profonde et le risque associé au produit médicamenteux. Il existe de multiples façons d’améliorer la limite de détection de l’analyse HCP, la méthode non ciblée, y compris, mais sans s’y limiter, l’épuisement de la protéine A, la digestion limitée, la limite de poids moléculaire, l’immunoprécipitation.
La façon ciblée de détecter la protéine de la cellule hôte, y compris la chromatographie en phase liquide, la surveillance des réactions multiples et la surveillance des réactions parallèles par chromatographie non liquide. Le principal défi associé à ces analyses HCP est la plage dynamique importante entre les protéines des anticorps, des médicaments et des cellules hôtes. Ainsi, la plupart des méthodes visent à réduire la quantité d’anticorps et l’enrichissement du HCP avant l’analyse LCMS afin de diminuer la plage dynamique entre les peptides d’anticorps et les peptides HCP.
Ainsi, la technologie ProteoMiner et le protocole de digestion limitée améliorent considérablement la limite de détection de l’analyse HCP par rapport à d’autres méthodes. Il est non biaisé par rapport à l’immunoprécipitation et peut être appliqué à différents modules de médicaments par rapport à la méthode d’épuisement de la protéine A. Ce protocole est également simple et direct.
Ainsi, la technologie ProteoMiner et le protocole de digestion limité nous aident à identifier plusieurs HCP qui dégradent le polysorbate et le médicament anticorps fragmenté. En combinaison avec la méthode nano LCMPRM, la méthode d’enrichissement peut également fournir des résultats quantitatifs pour trouver la concentration biologiquement pertinente de protéines de cellules hôtes problématiques.
