普通狨猴层流皮层活动的电生理学

摘要

定制的微型驱动器能够通过线性硅阵列实现皮质记录位点的亚毫米级靶向。

摘要

狨猴因其光滑的皮质表面，为检查层流皮层回路提供了理想的模型，便于使用线性阵列进行记录。狨猴最近越来越受欢迎，因为它的神经功能组织与其他灵长类动物相似，而且在记录和成像方面具有技术优势。然而，由于体积小且缺乏作为解剖标志的脑回，该模型中的神经生理学带来了一些独特的挑战。使用定制的微型驱动器，研究人员可以将线性阵列放置控制到亚毫米级精度，并在记录日内在相同的视网膜定位位置可靠地记录。该协议描述了微驱动定位系统的分步构建和硅线性电极阵列的神经生理记录技术。通过精确控制整个记录会话中的电极位置，研究人员可以轻松地遍历皮层，根据其视网膜组织和记录神经元的调谐特性来识别感兴趣的区域。此外，使用这种层流阵列电极系统，可以应用电流源密度分析（CSD）来确定单个神经元的记录深度。该协议还演示了层流记录的示例，包括在 Kilosort 中分离的尖峰波形，这些波形跨越阵列上的多个通道。

引言

近年来，普通狨猴（Callithrix jacchus）作为研究大脑功能的模型迅速流行起来。这种日益普及的原因是狨猴光滑皮层的可及性，与人类和其他灵长类动物的神经功能组织的相似性，以及体积小、繁殖速度快¹。随着这种模式生物越来越受欢迎，适用于狨猴大脑的神经生理学技术得到了迅速发展。电生理学方法在神经科学中被广泛用于研究啮齿动物和灵长类动物皮层中单个神经元的活动，从而实现无与伦比的时间分辨率和位置访问。由于狨猴作为视觉神经科学模型的相对新颖性，清醒行为电生理学技术的优化仍在不断发展。先前的研究表明，在麻醉制剂中建立了稳健的电生理学方案²，早期觉醒行为神经生理学研究表明了单通道钨电极³ 的可靠性。近年来，研究人员已经确定了硅基微电极阵列在清醒行为神经生理学中的应用⁴。然而，狨猴由于大脑体积小且缺乏解剖学标志，因此提出了独特的目标挑战。该协议概述了如何构建和使用适用于狨猴的微型驱动器记录系统，该系统允许使用硅线性阵列记录大量神经元，同时产生最小的组织损伤。

与狨猴一起工作是一个挑战，因为与较大的灵长类动物相比，视觉皮层中视网膜图的比例较小。电极稍偏移 1 mm 即可导致图谱发生重大变化。此外，研究人员经常需要在记录会话之间改变电极的位置，以获得视觉皮层中更广泛的视网膜位置。目前的半慢性制剂不允许每天调整电极位置，也无法以足够的精度以亚毫米级⁵瞄准特定位置。考虑到这一点，所提出的微驱动系统利用X-Y电极级，该电极级将轻量级微驱动安装到记录室中，并允许对皮质部位进行亚毫米级靶向。可移动的 X-Y 载物台组件允许线性阵列的垂直和水平移动，以便系统地遍历皮质区域，这是识别感兴趣区域（通过 视网膜位和调谐特性）所必需的。在录制过程中，研究人员还可以手动调整 X-Y 载物台以移动区域内的目标站点。与使用半慢性记录制剂的替代技术相比，这是一个关键优势，后者没有简单的电极靶向机制。

微型驱动器是一种多功能工具，可以安装各种硅阵列以降低到皮层中。在该协议中，使用具有两个间隔 200 μm 的 32 通道线性阵列的定制探针来研究跨越皮层深度的层流电路。大多数探测神经回路的方法通常对大脑皮层所有层的平均电位或单个单元进行采样。然而，最近的研究揭示了关于皮层层流微电路的有趣发现⁶.通过利用微型驱动器，研究人员可以使用层流探头并对记录深度进行微调，以确保在所有层中进行全面采样。

该系统可以使用市售组件构建，并且很容易针对不同的实验技术或探针进行修改。这种制备的主要优点是能够以亚毫米级精度改变X-Y记录位置，并控制皮层内记录的深度。该协议提供了构建X-Y阶段微驱动器和神经生理学记录技术的分步说明。

研究方案

实验程序遵循美国国立卫生研究院实验动物护理和使用指南。实验和行为程序的协议已获得罗切斯特大学机构动物护理和使用委员会的批准。

1. 包含用于记录的电极的微型驱动器的结构（图 1）

注意:定制的 X-Y 载物台包含多通道线性硅阵列，允许对记录站点进行亚毫米级目标定位。

1. 收集 图 1 中概述的所有微型驱动器部件。使用透明丙烯腈丁二烯苯乙烯 （ABS） 塑料 3D 打印定制零件。这包括保护套、底座、X 载物台和 Y 载物台。3D 零件的设计可在线获取 （https://marmolab.bcs.rochester.edu/resources.html）。此外，收集电极、塑料矩形平台、网格、显微操纵器、钢管和六个不锈钢螺钉（螺钉尺寸:00）。
   1. 使用带有金刚石砂轮切割附件的旋转工具，以 1 mm x 1 mm 的孔间距切割出 4 mm x 3 mm x 3 mm 的塑料网格截面。
   2. 使用环氧树脂将小切口网格部分固定到 Y 形载物台的顶部。然后，用螺钉将微型驱动器安装在该网格上。在其底部添加环氧树脂以提高稳定性。
   3. 将小型 3D 打印矩形平台连接到带有环氧树脂的 28 G 钢管上。这将在以后的步骤中用于固定硅电极。
   4. 将 23 G 导管穿过网格。然后，将连接到塑料平台的钢管穿过 23 G 导管。将 28 G 钢管放入微型驱动器的一个插槽中。
   5. 然后，使用不锈钢六角螺钉（尺寸:00，长度:1/8 英寸）组装 3D 零件（底座、X 级、Y 级）以构建驱动器底座。
      1. 首先，使用手动敲击工具敲击底座和 X 载物台上的预制螺丝孔。然后，首先将四个螺钉插入 X 级的长槽中，并将它们固定到底座中预制的相应螺丝孔上。
      2. 将可移动的 X 载物台固定到底座后，将两颗螺钉穿过 Y 载物台的长槽，并将它们固定到 X 载物台的预制螺丝孔上。
         注意: X 级和 Y 级都应保持可移动状态，直到螺钉完全拧紧。
2. 确保显微操纵器驱动器配备一个塑料平台来连接电极连接器，以及一个延长的聚酰亚胺管来固定电极。使用胶带将 64 针连接器连接到显微操纵器上的平台上。
3. 小心地将少许杆菌肽（无菌软膏）放在显微操纵器上的塑料管上，然后 通过 柔性带状电缆连接连接到 64 针连接器的电极。
4. 使用显微操纵器驱动器固定硅电极及其连接器，同时将塑料管穿过 Y 级上的孔。电极将悬挂在探头的载物台下方，等待连接到塑料矩形平台上（步骤7，第1节）。
5. 从显微操纵器驱动器上拆下 64 针连接器，并使用胶凝胶将连接器固定到 X 台上的平台上。一旦胶水将其固定到位，可以添加额外的环氧树脂以加强连接器的粘合。放置过夜晾干。
6. 小心地将电极从塑料管上拆下，然后从组件中取出显微操纵器驱动器。
   注意: 此时，驱动器仅使用"帮助之手"的鳄鱼夹固定，并且电极未固定在驱动器结构内。
7. 小心地移动鳄鱼夹，将驱动器翻转过来，以查看未固定的电极。使用钝头镊子将电极放在 Y 载物台下方的塑料支架上，并用少量硅弹性体（硅橡胶）固定。等待 5 分钟，直到粘合剂固化。
8. 使用微型驱动器上的螺钉控制装置缩回电极。
9. 将保护套放在微型驱动器上的电极上。该保护套的尺寸与定制印刷的记录室相同，可牢固地安装在驱动器组件的底座中。
10. 使用平头螺丝刀拧紧微型驱动器底座组件上的三个侧面螺钉，以将保护套固定到位。将用于录音的头级连接到 64 针连接器上。

2. 电极的多极电镀以降低总阻抗 （图2）

注意:为了获得最佳记录质量，用聚（3,4-乙烯二氧噻吩）溶液（PEDOT）对硅电极阵列进行电极镀层是有用的。该方法已被证明可以提高信噪比^7,8。

1. 要制备 PEDOT 溶液，将 0.075 mL 3,4-乙烯二氧噻吩 （EDOT） 和 1.4 g 聚（4-苯乙烯磺酸钠）（PSS）混合在 70 mL 蒸馏水中。短暂涡旋该溶液以确保组分完全溶解。在使用前一天混合此溶液以获得最佳溶解效果。
2. 启动阻抗测试仪软件（参见材料表）后，使用所选电极制备准备设置。使用软件窗口左上角的上下拉菜单，选择正在使用的适配器 （N2T A32）。使用第二个下拉菜单，选择正在使用的电极 （NLX-EIB-36）。如果下拉菜单中未列出电极，请参阅手册以了解如何定义新电极。确保通道数正确。
3. 通过连接器将探头连接到阻抗测试仪系统，并将探头放入接地的盐水中以获得基线读数。
   1. 在阻抗测试仪系统中，按左侧 的"测试阻抗 "按钮，并确保设置正确（设置: 测试频率:1,004 Hz， 周期:100， 暂停:0）。 然后，按右下角 的测试探针 按钮。
   2. 阻抗测试仪运行时将出现探针报告窗口，将结果存储在电子表格中。保存这些结果以备将来用于电极的两个柄的参考（将电极安装到烧杯中以与阻抗测试仪一起使用如 图2D所示）。如果使用具有多个柄的探头，请确保对每个柄重复步骤 3。
4. 通过降低固定烧杯的基座（即实验室千斤顶）从盐水中取出探针。用蒸馏水更换烧杯液。抬起实验室插孔浸没电极，冲洗掉剩余的盐水溶液，然后再次放下实验室插孔。
5. 用PEDOT溶液替换烧杯中的蒸馏水，并抬起实验室插孔，直到电极浸没在溶液中。
6. 选择软件窗口左侧 的 DC 电镀 按钮，并确保使用正确的设置（设置: 自动电镀:0.004 μA，350 Hz， 持续时间:5，暂停:1）。 然后，按右下角 的自动电镀 按钮。再次，将出现一个探针报告窗口，其中包含电镀结果。保存这些结果以备将来参考。如果使用具有多个柄的探头，请确保对每个柄重复此步骤。
7. 通过降低实验室千斤顶从 PEDOT 溶液中取出探头，并按照之前执行的步骤用蒸馏水冲洗探头（步骤 4）。冲洗后，用盐水溶液填充烧杯，然后抬起实验室插孔，直到电极浸没。
8. 按软件窗口左侧的 "测试阻抗 "按钮，并确保使用正确的设置（设置: 测试频率:1,004 Hz， 周期:100， 暂停:0）。 按右下角 的"测试探针 "按钮。保存这些结果以备将来参考。如果使用具有多个柄的探头，请确保对每个柄重复此步骤。
   注意: 将电镀后值与电镀前值进行比较。阻抗值应该降低。
9. 随着持续使用，探头可能会在 6 个月后显示阻抗值增加。如果对记录信号的阻抗值有疑虑，请按照步骤 3 重新测试探头阻抗。如果阻抗值比初始值增加，则重复电镀（步骤 6）。

3. 头帽、腔室和开颅手术的手术放置（图 3A-C）

注意:在这项工作中，在研究结束时，动物在异氟醚下麻醉并接受氯胺酮肌肉注射 （IM），然后腹膜内 （IP） 注射安沙醇。用生理盐水经心灌注后提取脑，然后用 10% 福尔马林。

1. 在手术前 2 个月按照先前描述的方法^{3、9、10、11} 训练狨猴（至少 1.5 岁）坐在小灵长类动物椅子上。
2. 手术当天，肌肉注射氯胺酮（5-15 mg/kg）/右旋多（0.02-0.1 mg/kg）（咪达唑仑 0.25 mg/kg 作为肌肉松弛剂），诱导受试者，并根据心率、呼吸和脚趾捏反射确认适当的麻醉。在整个手术过程中，对动物进行连续异氟醚（0.5%-2%在100%氧气中）给药，同时监测其生命体征。手术时在眼睛上使用兽医软膏，以防止麻醉时干燥。
3. 外科医生穿上无菌个人防护装备后，使用无菌窗帘准备无菌手术区域，以覆盖表面和手术区域。使用无菌技术，让外科医生植入带有钛柱和螺钉的亚克力头帽，以使用 Nummela 等人之前详细描述的方法^{稳定头部11}。
4. 在种植手术期间，根据立体定位^{坐标 12} 计划在感兴趣区域（例如，视觉区域、中颞区 [MT] 和初级视觉皮层 [V1]）上放置记录室。
5. 放置接地线。
   1. 首先在计划记录室区域附近的头骨上钻一个 1.1 毫米的毛刺孔。将一根 36 G 不锈钢丝弯曲到距尖端约 0.075-1 毫米处，然后将金属丝的弯曲部分滑入毛刺孔底部的头骨和硬脑膜之间。
   2. 首先用骨蜡密封金属丝和孔，然后在放置腔室时用水泥和丙烯酸密封。确保在腔室附近留出一部分以连接接地。
6. 在放置一层快速粘接水泥以覆盖记录站点和接地线的整个区域后，使用快速粘接水泥将记录室（由定制的 3D 打印部件组成）粘附在头骨上，并在构建头部植入物时用丙烯酸加固。
7. 用 3D 打印的腔室盖密封腔室，该腔室盖设计为紧密贴合在腔室内（并且不能被与受试者成对安置的笼子伙伴移除）。
   1. 使用随附的混合吸头在腔室内边缘周围分配少量硅酮弹性体（硅橡胶），然后插入腔室盖，直至与腔室外壁齐平。
   2. 腔室设计有检修孔（直径 1 mm），以确保腔室盖易于拆卸。使用硅橡胶密封这些检修孔，从而形成气密腔室密封。
      注意: 要取下腔室盖，请先使用镊子取下密封检修孔的硅橡胶密封件，以破坏腔室的气密密封。然后，可以使用销钉将腔室盖从腔室中撬出。
8. 将动物从麻醉中恢复，在它们恢复足够的意识以维持胸骨卧位之前，不要让它们无人看管。术后用抗生素（阿莫西林-克拉维酸，13.75mg / kg）治疗动物7天，抗炎药（美洛昔康0.1mg / kg）治疗3天。在恢复前给予缓释止痛药，术后持续72小时，并独立饲养动物，直到完全康复。
9. 手术后两到三周，开始训练头部约束和视觉行为。将狨猴放在灵长类动物的椅子上，并让其适应头枕。一旦感到舒适，训练狨猴执行几项基本任务，包括中央视觉注视¹³，以及朝向外围检测到的Gabor光栅的扫视任务，该光栅用于测量它们的视力¹¹。
10. 经过充分的行为训练后，在记录室内进行开颅手术。在无菌技术下，进行第二次手术，在记录室中对感兴趣区域（例如，MT 区域）进行开颅手术（直径 2-3 毫米）。用约1毫米或开颅手术深度的厚厚硅橡胶密封开颅手术，以保护大脑免受感染并减少肉芽生长¹⁴。确保硅橡胶密封件的边缘在所有侧面至少抓住至少 2 毫米或更多的牙科粘接剂。按照步骤 7 中的说明更换腔室盖。
11. 如果在手术后的几天内发生任何出血或硅橡胶密封泄漏透明液体，则需要清洁腔室。
    1. 如果硅橡胶密封件完好无损，请使用无菌技术用 10% 甜菜碱清洁，并在取下密封件之前用无菌盐水清洗。如果硅橡胶密封件不完整，只能在无菌技术下用无菌盐水清洁。
    2. 去除硅橡胶后，用无菌盐水冲洗硬脑膜数次，然后用棉尖涂抹器擦干。在涂上一层新的硅石之前，使用棉尖涂抹器进一步彻底干燥腔室。通常，腔室在几天到 1 周后稳定并保持干燥并紧密密封。
12. 一旦开颅手术稳定且没有出血迹象，就进行硬脑膜刮擦以去除硬脑膜上的多余组织。然后，涂上一层薄薄的 （<1 mm） 硅橡胶（薄到足以使电极通过记录），并使用 1/4 毛刺钻头将硅橡胶吸到开颅手术壁上，如 图 3C 所示，用于机械购买。
    注意: 这也将允许更容易地拆卸以进行清洁。硅橡胶可以在研究期间保持在原位，并且可以用线性阵列电极刺穿以进行记录。

4.神经生理学记录设置（图3D-F）

注意:动物处理步骤因实验室和实验而异。以下步骤特定于微型驱动器的放置和录音硬脑膜的穿透。

1. 从记录室中取下盖子（在第 3 节步骤 7.2 中描述）。在录制过程中将盖子放入 91% 异丙醇中浸泡。确保腔室的边缘没有硅石。如果硅橡胶留在腔室的边缘，微型驱动器将无法正确放置。
2. 微型驱动器的底座有三个螺钉，用于将其拧紧到动物的腔室上。通常，这些螺钉在与腔室尺寸相同的保护套周围拧紧到位，以保护内部的硅探针不被击中。
   1. 首先，用螺丝刀松开将保护套固定在硅胶探头上的三颗螺丝，然后小心地取下套筒。将微型驱动器连接到记录室，注意不要碰到记录室壁上的硅电极（图3D，E）。
   2. 此外，在将驱动器放置到腔室之前，确保电极处于完全缩回的位置，以便它们在初始放置时位于皮层上方。
3. 放置后，使用螺丝刀拧紧微型驱动器侧面的每个螺钉（图 3F）。选择拧紧螺丝的顺序，每次都使用它来保持位置的稳定性。研究人员可能还想计算最初松开螺钉以将其拧紧相似量时的匝数。检查探头是否松动，并根据需要拧紧，但要注意不要因过度拧紧而剥离塑料中的螺纹。
4. 将微型驱动器固定到腔室后，放置所有需要的接地线。
   注意: 将头级插入连接器过夜，并且仅将串行外设接口 （SPI） 电缆插入头级进行录音，因为在动物身上时很难将头级插入连接器。
5. 小心地将 SPI 电缆插入头级（已连接到探头）。确保不要弯曲电线。使用 Open-Ephys GUI （https://github.com/open-ephs/plugin-GUI） 以 30 kHz 的频率放大和数字化头部阶段的所有神经生理学数据。以 0.1 Hz 的频率对来自头部级的宽带信号进行高通滤波，校正此滤波的相移，如前所述¹⁵.对于线性数组，通过公平均引用对生成的迹线进行预处理。
6. 输入记录系统中使用的特定电极阵列的通道图，以便在高通滤波记录信号视图中按深度对记录期间绘制的通道进行排序。在推进和缩回电极时将使用此视图。

5.进行神经生理学记录实验（图4）

注意:这里描述了将电极阵列降低到皮层中的方法;该方法经过优化，可避免下层组织过度凹陷。电生理记录中噪声的增加很好地表明在穿透硅橡胶并进入大脑之前发生了凹陷。一旦进入大脑，如果有太多的凹陷，即使没有操纵驱动器，研究人员也可能会注意到探针上的单位移动（单位逐渐在深度通道上移动），或者，研究人员可能会注意到神经活动受到抑制，特别是在探针的浅表位置。在这些条件下，驱动器被缩回以减轻凹陷并促进更好的录音。

1. 使用微型驱动器上的螺钉控制，降低硅探头，每 1-2 秒旋转一圈 （250 μm），直到在阵列尖端观察到单位。
   注意:在放置在硬脑膜上的硅橡胶穿透过程中，可能会观察到噪音略有增加。柄部会在弹出之前使硅橡胶凹陷，这会增加探头上的噪音。快速下降，直到单位的第一个迹象有助于渗透淤泥层。
2. 一旦观察到第一个神经元，缩回微驱动器（250μm）一圈，以降低进入速度，因为电极开始穿过硅橡胶和硬脑膜进入皮质组织。如果电极似乎在未进行显微操作的情况下随着时间的推移继续进入组织，则再缩回一圈，以减轻探针对其下方硅橡胶和组织的压力。
   注意:如果加载了线性阵列的正确通道图，则应该可以跟踪神经元的位置（通道将按其相对于皮层的深度排序）。
3. 继续非常缓慢地将阵列驱动到皮层中，在20-30分钟的持续时间内前进约4到6圈（1-1.5毫米），直到神经元均匀分布在探针的长度上。
4. 在开始记录之前，将阵列缓慢缩回一到两圈（0.25-0.5 毫米），以减少对组织的压力。
   注意:在这种回缩过程中，神经元通常不会改变线性阵列上的通道位置，这表明它主要作用于减轻组织上的压力。如果没有回缩，在记录过程中，随着组织松弛，可以看到连续的阵列偏移，从而破坏记录的稳定性（图4C）。
5. 缩回后，等待 20 分钟后再开始录制。这将限制录制中看到的移动量。利用这段时间为记录做准备（即校准眼动追踪并准备刺激呈现系统）。
6. 在录制软件上选择 录制 。
7. 实验完成后，再次选择录制按钮。这将在所选目的地创建完整的录制文件。在继续操作之前，请确保文件已正确保存。
8. 慢慢地开始以与以前相似的速度将阵列从皮层中缩回（在 20-30 分钟内转四到六圈）。通过观察神经元沿探针移动来可视化探针缩回。在缩回自第一次看到神经元以来的转数后，当探针上没有观察到更多的神经元时，继续更快地缩回，直到回到完全缩回的起始位置。
9. 要从记录室中取出探头，请以相反的顺序执行第 1 节中的步骤 3-4（即，首先执行步骤 3，然后是步骤 2，然后是步骤 1）。
10. 将探头从记录室中取出后，将其浸泡在隐形眼镜溶液中 20 分钟，以去除电极上的任何组织或血液。之后，将探头置于酒精中 1 分钟以除去隐形眼镜溶液，并让电极干燥。
11. 在记录系统进行初始过滤后，使用 Kilosort2 对数组数据进行尖峰排序（如前面第 4 节第 5 步所述）。
    1. 使用"phy"GUI （https://github/kwikteam/phy） 手动标记尖峰排序算法的输出。将具有微小或生理上不可信的波形的单元归类为噪声，并排除它们。
    2. 如果使用层流探头，请查看每个通道上的尖峰波形，以确保在通道上用峰值波形标记单个单元（图5A）。仅包括在 PCA 空间中具有清晰聚类、小于 1% 的尖峰间间隔违规和双相尖峰波形（应定位到线性阵列上的相邻通道）的单元。 图5B显示了一个示例单元，它显示了PCA空间中的清晰簇（右上）和随时间变化的稳定性（右下）。

结果

该协议描述了如何构建X-Y电极级（图1），该电极级允许对位点进行亚毫米级定位，并在单独的记录会话中保持可靠的定位。X-Y定位的可靠性如 图6所示，该图表明，相隔一周进行的两次记录会话显示其平均射频位置重叠70.8%（图6A）。此外，对微型驱动器定位的微小调整可以支持视网膜空间的精确运动。通过参考每个阶段中相距 2 ...

讨论

目前有几种方法（例如慢性、半慢性、急性）可用于在非人灵长类动物中进行神经生理学实验。普通狨猴因其体型小且缺乏作为解剖标志的脑回，对神经生理学实验提出了独特的挑战。这要求研究人员使用神经生理学标志，如感兴趣区域的视网膜和调谐特性来识别记录目标。因此，在最初绘制皮质区域时，可能需要每天调整电极位置。目前狨猴神经生理学的制剂通常使用半慢性探针定位，这不允?...

材料

Name	Company	Catalog Number	Comments
1/4 Hp burr drill bit	McMaster & Carr	Cat# 43035A32	Carbide Bur with 1/4" Shank Diameter, Rounded Cylinder Head, trade Number SC-1, single Cut(https://www.mcmaster.com/products/bur-bits/burs-7/?s=1%2F4%22+bur+bits)
1x1mm Crist Grid	Crist Instruments	1 mm x 1 mm Grid	https://www.cristinstrument.com/products/implant-intro/grids
91% isopropyl alcohol	Medline	N/A	https://www.medline.com/product/Medline-Isopropyl-Rubbing-Alcohol/Bulk-Alcohol/Z05-PF03807?question=91%25%20isopropyl%20alcohol
Acquisition Board	Open-Ephys	N/A	https://open-ephys.org/acquisition-system/eux9baf6a5s8tid06hk1mw5aafjdz1
Bacitracin Ointment	Medline: Cosette Pharmaceuticals Inc	N/A	https://www.medline.com/product/Bacitracin-Ointment/Antibiotics/Z05-PF86957?question=bacitr
Blunt straight Forceps	Medline	N/A	https://www.medline.com/category/Central-Sterile/Surgical-Instruments/Forceps/Z05-CA16_02_20/products
Bone wax	Medline	ETHW31G	https://www.medline.com/product/Ethicon-Bone-Wax/Bone-Wax/Z05-PF61528?question=bonewax
C&B Metabond Quick Adhesive Cement System	Parkell, Inc.	SKU: S380	https://www.parkell.com/C-B-Metabond-Quick-Adhesive-Cement-System
Clavamox	MWI Animal Health	N/A
Contact lens solution	Bausch and lomb		Various sources available
Custom Printed 3D printed parts	ProtoLab		https://marmolab.bcs.rochester.edu/resources.html
DB25-G2 25 Pin Male Plug Port Signal Connector	Various Sources	DB25-G2 25	DB25-G2 25 Pin Male Plug Port Signal 2 Row Terminal Breakout Board Screw Nut Connector
diamond saw attachment for dremel	Dremel	545 Diamond Wheel	https://www.dremel.com/us/en/p/545-26150545ab
Digitizing Head-stages	Intan	RHD 32channel (Part #C3314)	https://intantech.com/RHD_headstages.html?tabSelect=RHD32ch&yPos=120.80 000305175781
EDOT	Sigma Aldrich	Product # 483028	https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/483028
Helping Hands	Harbor Freight	N/A	https://www.harborfreight.com/helping-hands-60501.html
Hook Electrical Clips	Various Sources	N/A	Hook test Cable wires
Interface Cables (RHD 3-ft (0.9 m) ultra thin SPI cable)	Intan	Part #C3213	https://intantech.com/RHD_SPI_cables.html
Lab jack	Various Sources	N/A	https://www.amazon.com/Stainless-Steel-Scissor-Stand-Platform/dp/B07T8FM85H/ref=asc_df_B07T8FM85H/?tag=&linkCode=df0&hvadid=366343 827267&hvpos=&hvnetw=g&hvrand =2036619536500717246&hvpone =&hvptwo=&hvqmt=&hvdev=c&hv dvcmdl=&hvlocint=&hvlocphy=900 5674&hvtargid=pla-795933567991& ref=&adgrpid=71496544770&th=1
Meloxicam	MWI Animal Health	N/A
Micro-drive	Crist Instrument	3-NRMD	https://www.cristinstrument.com/products/microdrives/miniature-microdrive-3-nrmd
Multi-channel linear silicon arrays with 64 channel connector	NeuroNexus	A1x32-5mm-25-177	https://www.neuronexus.com/products/electrode-arrays/up-to-10-mm-depth/
NanoZ Omentics Adapter- 32 Channel	NeuraLynx	ADPT-NZ-N2T-32	https://neuralynx.com/hardware/adpt-nz-n2t-32
NanoZ System	Plexon	NanoZ Impedance Tester	https://plexon.com/products/nanoz-impedance-tester/
Narishige Micromanipulator	Narishige	Stereotaxic Micromanipulator	https://usa.narishige-group.com/
Open-Ephys GUI	Open-Ephys		https://open-ephys.org/
Polyimide Tubing (OD(in): 0.021 / ID(in) 0.018 )	Various Sources (Chamfr)	Chamfr Cat#HPC01895	https://chamfr.com/sellers/teleflex-medical-oem-llc/
Primate Chair	Custom made by University of Rochester Machine Shop	Designs online	https://marmolab.bcs.rochester.edu/resources.html
Poly(sodium 4-styrenesulfonate) (PSS)	Sigma Aldrich	Product # 243051	https://www.sigmaaldrich.com/US/en/product/aldrich/243051
RHD USB Interface board	Intan	RHD2000 Evaluation Board Version 1.0	https://intantech.com/RHD_USB_interface_board.html
Silastic gel	World Precision Instruments	# KWIK-SIL	Low Toxicity Silicone Adhesive ((https://www.wpiinc.com/kwik-sil-low-toxicity-silicone-adhesive)
Slow release buprenorphine	Compounding Pharmacy
Stainless steel wire 36 gauge	McMaster & Carr	Cat# 6517K11	Round Bend-and-Stay Multipurpose 304 Stainless Steel Wire, Matte Finish, 1-Foot Long, 0.008" Diameter
Stanley 6-Piece Precision Screwdriver Set	Stanley	1.4mm flathead screwdriver	https://www.amazon.com/Stanley-Tools-6-Piece-Precision-Screwdriver/dp/B076621ZGC/ref=sr_1_3?crid=237VSK5FNFP9N&keywords= stanley+66-052&qid=1672764369&sprefix= stanley+66-052%2Caps%2C90&sr=8-3
Steel Screws	McMaster & Carr	type 00 stainless steel hex screws and 1/8” in length	https://www.mcmaster.com/
Steel Tube	McMaster & Carr	28 gauge stainless steel tubing	https://www.mcmaster.com/tubing/multipurpose-304-stainless-steel-6/id~0-055/
Superglue	Loctite	SuperGlue Gel Control	https://www.loctiteproducts.com/en/products/fix/super-glue/loctite_super_gluegelcontrol.html