明胶湿纺成型工艺促进组织再生

该协议改进了湿纺的基本概念，将材料从单个纤维条开发成各种条状材料，可用于任何首选医疗应用。该技术简单、价格低廉，无需添加合成聚合物，将天然聚合物定制为感兴趣的材料的蛋白质资源。该技术可推广至生物材料开发，用于杀死感冒治疗，如中枢或外周神经系统治疗、血管置换或直接尿路重建。

此方法用于医疗应用，包括作为组织神经化或再生医学的策略。这种技术可以很容易地由初学者实现。请注意，经过几次成型重复后，应始终检查溶液的质量，以保持最佳形成。

要形成湿纺管，首先将一个 24 表由三英寸外周静脉导管浸入新鲜准备的明胶溶液中三秒钟，然后浸入新鲜准备的丙酮溶液中浸泡一分钟。重复这些步骤 20 次。最后一次丙酮浸入后，让成型管在室温下干燥五分钟，并使用 hemostat 小心地将明胶管从导管转移到玻璃巴斯德移液器中，并采用 2.5%聚丙酮二氯甲烷溶液，在室温下进行过夜下浸渍孵化。

第二天早上，在紫外线下对明胶进行两个小时的消毒，然后短暂地将管子淹没在75%乙醇中。然后用干细胞培养器清洗管两次，去除残留乙醇。要培养与细胞培养的明胶管，用一毫升0.25%的三氯丁二和5%的二氧化碳，将培养方的人类脂肪干细胞的末端替换为0.25%的三氯丁二。

当细胞分离后，用一毫升胎儿牛血清停止反应，将细胞悬浮液转移到微离心管中。通过离心收集细胞，将颗粒重新塞在一毫升干细胞培养中等物中。然后将明胶管放在含有三毫升干细胞培养的六井板的一个井中。

在计算细胞后，将四倍十至四分之一的人类脂肪干细胞植入管中，在细胞培养箱中孵化两周。在确认适当的水平的解合后，对雌性8周大的Sprague Dawley大鼠的"手趾捏"反应不足，剃掉梯形区域的头发，用波维酮碘溶液对暴露的皮肤进行消毒。用无菌手术窗帘盖住大鼠，以减少手术部位的细菌污染，并使用手术剪刀制作浅两厘米长的皮肤切口。

将明胶管直接放入筋膜和肌肉之间的层中，并使用尼龙缝合线关闭伤口。然后用波维酮碘溶液对切口进行消毒。通过肌肉注射酮普罗芬和西法佐林诱导大鼠，并在无菌条件下保持动物七天。

这种用户友好的湿纺概念可用于将明胶开发成纤维和管。通过扫描电子显微镜对明胶管进行形态学观察，发现表面不太光滑，内径大于200微米，厚度约为20微米。为神经细胞标记表达而染色人类脂肪干细胞培养明胶管，表明标记物的正染色以及多个检测到的核表明细胞可以穿透并粘附在明胶管上，并分化成神经祖细胞。

将明胶管植入筋膜层可证实其安全性和生物相容性，因为在局部组织内未观察到发红、肿胀或其他炎症症状的迹象，且管内被发育良好的结缔组织包围。在尝试两点一的这一步骤时，确保模具在每个溶液的特定涂层时间浸入，对于建立精确的管形非常重要。按照这个程序，我们的实验利用人类疾病的动物模型可以进行，以准确调查生物材料的结果，组织再生策略。

该技术开发后，为研究人员将简单的相关性质聚合物开发成任何类型的材料，用于确定的医疗应用铺平了道路。在正常使用条件下，聚丙酮二氯甲烷溶液被认为对环境危害最小，但不要忘记在适当的生物安全柜中对这种化学品执行任何步骤。