单关节膝关节疼痛小鼠模型疼痛的自发性和诱发性测量

在关节炎的临床前模型中测量疼痛是困难的，但它对于再生和镇痛治疗的评估至关重要。我们的协议是敏感和可重复的测量唤起和自发的疼痛行为。而且它简单且相对便宜。

关节炎是造成残疾的最大因素，而疼痛是造成残疾的主要原因。关节炎的治疗目前是不够的。临床前模型是治疗发展的重要组成部分。

演示这个程序的将是克里斯托弗·多曼，一个技术员，和桑德拉·弗里泽尔，一个工作人员科学家从我的实验室。为了防止针头入太深，并退出关节后部，用聚乙烯管的护套盖住一个点 5 英寸的针，直到只有 2 . 5 毫米的针头伸出护套。接下来，从麻醉小鼠的膝盖上剃毛，用波维酮碘磨砂对裸露的皮肤进行消毒。

然后通过低于小套的跟腱将护套针插入中线关节，并注射感兴趣的物质。在评估诱发的关节疼痛之前，使用高度计 4 练习使用每厘米平方的七百克力，以一致和坚定的压力。当施加适当的压力水平时，设备将发出 4 声蜂鸣音。

当可以可靠地施加适当的压力时，用食指和拇指将鼠标用紧闭在脖子上，以防止随意移动。并且用第四个和第五根手指来约束尾巴。鼠标应该能够作出离散的，短暂的运动与努力和刺激时，但不应该能够自由或连续移动。

用自由手的拇指和食指在大约关节线上同时对每个膝盖的侧侧和中侧进行反复的坚定的心，1分钟。并且让观察者计算动物在这 1 分钟的压力应用期间为逃避约束而发声和战斗次数。叮咬和发声的总和被认为是唤起疼痛分数。

打开高级动态承重软件程序，选择"鼠标"作为传感器类型。在每次实验之前，在校准菜单下选择"完全校准"。并输入零"为皮重值。

而以泡沫垫、中密度纤维板、塑料烧杯、水为标定重量。选择下一个"和皮"，用泡沫垫、中等密度纤维板和水的塑料烧杯盖住传感器垫。当所有材料都放在传感器垫上时，选择增益预览"并调整校准重量，直到校准重量均匀地分布在各个传感器上。

当校准指示器的值高于 95 时，选择增益定义"，为各个传感器生成规范化均值并确认传感器的完整性。然后，选择下一个"，然后将校准文件保存在校准文件夹中。选择"新"并输入要测试的第一个鼠标的项目和动物名称。

选择"浏览"并打开为项目创建的校准文件。然后，选择下一个"确认启用视频捕获"被选中，然后选择确定"下一步，称量动物。选择捕获"并在软件中记录重量。

选择"确定"后，将鼠标放在腔室中 5 分钟。并选择启动"该软件将记录动物的活动，捕获视频，并同步传感器数据，并自动分区视频到可分析和非分析段。在测定期结束时，选择简单的评分"和独立的暂停设置"，并选择快进"移动到第一个可分析的段。

如果稳定区域没有识别正确的爪子，请将光标放在该区域上，然后按与正确身体部位对应的相应快捷键。高级动态承重软件将自动计算所花费时间的百分比，以及四肢中每个四肢上的体重百分比。然后选择结果"导出"和"是"将前 5 行汇总数据导出到相应的电子表格程序中。

对于同一组中的每种附加动物，选择"新"并输入唯一的动物名称，而不更改项目名称。然后像刚才演示的，捕捉每个动物在室内的活动。急性炎症护理-基因-诱导性关节炎、慢性炎症完全f-roy-nes添加-jav-ent诱导性关节炎和慢性非炎症性小肠诱导性关节炎的疼痛评分比所有三种关节疼痛的天真未注射动物的疼痛评分增加。

女性，但不是患有慢性退行性关节疼痛的男性，在提前动态承重措施上与急性和慢性炎症性关节疼痛的天真小鼠相比，表现出类似的减少。患有急性炎症性关节疼痛的男性比天真的动物更重地向四肢转移。与天真的动物相比，雌性小鼠的四肢重量增加，但慢性退行性关节疼痛的雄性小鼠体重增加。

在患有慢性退行性关节疼痛的男性和女性中，与天真的动物相比，左后肢的时间花费没有差别。与未注射的小鼠相比，患有慢性退行性关节疼痛的女性花更多的时间在非关节炎右后肢上。最后，患有急性炎症性关节疼痛的雄性小鼠和患有慢性退行性关节疼痛的雌性小鼠，在四肢上花费的时间明显超过天真动物。

正确识别动物脚后侧相对于其身体非常重要。专注于动物的后部，而不是它的头部。通过这种方法，我们能够测试新型关节间镇痛剂的具有情感性。