관절염의 전임상 모델에서 통증의 측정은 어렵지만 재생 및 진통 치료의 평가에 필수적입니다. 우리의 프로토콜은 유발된 및 자발적인 통증 행동을 측정하기 위해 민감하고 재현할 수 있습니다. 그리고 그것은 간단하고 상대적으로 저렴합니다.
관절염은 장애에 가장 큰 기여이며 통증은 장애의 주요 원인입니다. 관절염의 치료는 현재 부적당합니다. 전임상 모델은 치료 개발의 중요한 부분입니다.
이 절차를 시연하는 것은 기술자인 크리스토퍼 도먼과 제 실험실의 직원 과학자인 산드라 프리젤입니다. 바늘이 너무 깊게 삽입되고 관절을 후방으로 나가는 것을 방지하기 위해, 바늘의 2.5 밀리미터가 칼집밖으로 튀어 나올 때까지 폴리에틸렌 튜브의 칼집으로 점 5 인치 바늘을 덮습니다. 다음으로, 마취된 마우스의 무릎에서 털을 면도하여 주입하고, 포비도요오드 스크럽으로 노출된 피부를 살균한다.
그런 다음 슬개골 힘줄을 통해 중간선에 있는 관절에 피진 바늘을 삽입하여 슬개골의 하부 가장자리로 열등하고 관심 있는 물질을 주입합니다. 호출된 관절 통증을 평가하기 전에 고도계 레벨 4를 사용하여 일관되고 확고한 압력의 700 그램 힘을 1센티미터 로 적용하는 연습을하십시오. 적절한 수준의 압력이 가해지면 장치가 4개의 비프음을 방출합니다.
적절한 압력을 안정적으로 적용할 수 있는 경우, 검지 손가락과 엄지 손가락으로 목에 마우스를 가볍게 두르면 캐주얼한 움직임을 방지할 수 있습니다. 그리고 꼬리를 억제하기 위해 네 번째와 다섯 번째 손가락을 사용합니다. 마우스는 노력과 자극 할 때 이산, 짧은 움직임을 만들 수 있어야하지만, 자유롭게 또는 지속적으로 이동할 수 없습니다.
1분 동안 초당 1회 관절라인에서 프리핸드의 엄지손가락과 검지 손가락으로 각 무릎의 측면 및 내측에 동시에 반복된 단단한 심푸를 투여한다. 그리고 관찰자가 이 1 분 압력 적용 기간 동안 구속을 피하기 위해 동물의 보컬과 싸움의 수를 계산합니다. 물린 발성의 합계는 호출 통증 점수로 간주됩니다.
고급 동적 중량 베어링 소프트웨어 프로그램을 열고 마우스를 센서 유형으로 선택합니다. 각 실험에 앞서 교정 메뉴에서 전체 교정을 선택합니다. 그리고 tare 값에 대해 0"을 입력합니다.
그리고 폼 패드, 중간 밀도 섬유 보드, 플라스틱 비커 및 물의 무게는 교정 중량으로. 다음을 선택"과 tare"그리고 폼 패드, 중간 밀도 섬유 보드, 물의 플라스틱 비커와 센서 패드를 커버. 모든 재료가 센서 패드에 배치되었을 때 게인 미리 보기를 선택하십시오"그리고 개별 센서에 고르게 분포될 때까지 교정 중량을 조정합니다.
교정 표시기의 값이 95이상인 경우 게인 정의를 선택하여 개별 센서에 대한 정규화된 평균을 생성하고 센서의 무결성을 확인합니다. 그런 다음 다음을 선택하고 교정 폴더에 교정 파일을 저장합니다. 새 마우스를 선택하고 테스트할 첫 번째 마우스에 대한 프로젝트 및 동물 이름을 입력합니다.
찾아보기를 선택하고 프로젝트에 대해 만들어진 교정 파일을 엽니다. 그런 다음 다음 "비디오 캡처를 사용하도록 설정"이 선택되어 있는지 확인하고 확인을 선택합니다. 캡처를 선택하고 소프트웨어의 무게를 기록합니다.
확인을 선택한 후"5 분 동안 챔버에 마우스를 배치합니다. 그리고 시작"소프트웨어를 선택하면 동물의 활동을 기록하고 비디오를 캡처하고 센서 데이터와 동기화하고 비디오를 분석 가능하고 분석 할 수없는 세그먼트로 자동으로 분할합니다. 분석 기간이 끝나면 쉽게 득점할 수 있는 것을 선택합니다"라고 독립적인 일시 정지 설정"과 "빨리 선택하여 첫 번째 분석 가능한 세그먼트로 이동합니다.
안정 영역이 올바른 발이 식별되지 않은 경우 해당 영역에 커서를 잡고 올바른 신체 부위에 해당하는 적절한 바로 가기 키를 누릅니다. 고급 동적 중량 베어링 소프트웨어는 분석된 시간 의 백분율과 4개의 사지 각각에 배치된 체중의 백분율을 자동으로 계산합니다. 그런 다음 결과를 선택 "내보내기"와 예"적절한 스프레드 시트 프로그램에 데이터의 처음 5 요약 라인을 내보냅니다.
같은 그룹의 각 추가 동물에 대해 새 동물을 선택하고 프로젝트 이름을 변경하지 않고 고유한 동물 이름을 입력합니다. 그런 다음 방금 설명한 것처럼 각 동물의 활동을 챔버에서 캡처합니다. 급성 염증성 치료-a-유전자 유도 관절염에 대한 통증 점수, 만성 염증성 완전 f-roy-nes 첨가자드-자브-인 유도 관절염, 만성 비염증성 콜-ag-in-a 유도된 관절염은 3가지 유형의 관절통 모두에 대해 순진한 주입되지 않은 동물을 관찰한 관절염에 비해 증가한다.
만성 퇴행성 관절 통증을 가진 남성은 아니지만 여성은 급성 및 만성 염증 성 관절 통증의 순진한 마우스에 비해 사전 동적 체중 베어링 측정에서 유사한 감소를 보여줍니다. 급성 염증 성 관절 통증을 가진 남성은 순진한 동물보다 4 사지에 더 많은 무게를 전달합니다. 4 개의 사지에 무게 베어링은 순진한 동물에 비해 여성 마우스에서 증가하지만 만성 퇴행성 관절 통증을 가진 남성에서는 증가하지 않습니다.
만성 퇴행성 관절 통증을 가진 남성과 여성 모두에서, 순진한 동물에 비해 왼쪽 뒷다리에 보내는 시간에 차이가 없습니다. 그리고 만성 퇴행성 관절 통증을 가진 여성은 주입되지 않은 마우스에 비해 비 관절염 오른쪽 뒷다리에 더 많은 시간을 보낸다. 마지막으로, 급성 염증 성 관절 통증을 가진 남성 마우스, 만성 퇴행성 관절 통증을 가진 여성, 순진한 동물보다 그들의 4 사지에 훨씬 더 많은 시간을 보내고.
그것은 신체와 관련하여 동물의 발 의 후방을 올바르게 식별하는 것은 매우 중요합니다. 머리보다는 동물의 후방에 초점을 맞춥니다. 이 방법을 통해, 우리는 새로운 관절 간 진통의 정서를 테스트 할 수 있습니다.
