La mesure de la douleur dans les modèles précliniques de l’arthrite est difficile, mais elle est essentielle pour l’évaluation des traitements régénératifs et analgésiques. Notre protocole est sensible et reproductible pour la mesure des comportements de douleur évoqués et spontanés. Et c’est simple et relativement peu coûteux.
L’arthrite est le principal facteur contribuant à l’invalidité, et la douleur est la principale cause d’invalidité. Le traitement de l’arthrite est actuellement inadéquat. Les modèles précliniques sont une partie importante du développement du traitement.
Christopher Dorman, technicien, et Sandra Frizelle, scientifique de mon laboratoire, feront la démonstration de cette procédure. Pour éviter que l’aiguille ne soit insérée trop profondément et ne sorte de l’articulation postérieurement, recouvrez une aiguille de 5 pouces avec une gaine de tube de polyéthylène jusqu’à ce que seulement 2,5 millimètres de l’aiguille dépassent de la gaine. Ensuite, rasez la fourrure du genou de la souris anesthésiée à injecter, et stérilisez la peau exposée avec un gommage à l’iode povidone.
Puis insérez l’aiguille gainée dans l’articulation à la ligne médiane à travers le tendon rotulien juste inférieur au bord inférieur de la rotule, et injecter la substance d’intérêt. Avant d’évaluer la douleur articulaires évoquée, utilisez un niveau d’altimètre 4 pour pratiquer l’application de sept cents grammes de forces par centimètre au carré de pression constante et ferme. L’appareil émet 4 bips lorsque le niveau de pression approprié est appliqué.
Lorsque la pression appropriée peut être appliquée de manière fiable, débrailler la souris au cou avec l’index et le pouce assez serré pour empêcher les mouvements occasionnels. Et utilisez les quatrième et cinquième doigts pour retenir la queue. La souris doit être capable de faire des mouvements discrets et brefs avec effort et lorsqu’elle est stimulée, mais ne doit pas être en mesure de se déplacer librement ou continuellement.
Administrer des palpations fermes répétés simultanément aux côtés latéraux et médials de chaque genou avec le pouce et l’index de la main libre à environ la ligne articulaire une fois par seconde pendant 1 minute. Et avoir un observateur compter le nombre de fois que l’animal vocalise et se bat pour échapper à la retenue au cours de cette période d’application de pression de 1 minute. La somme des morsures et des vocalisations est considérée comme la partition de douleur évoquée.
Ouvrez le logiciel avancé de port de poids dynamique, et sélectionnez Souris « comme le type de capteur. Avant chaque expérience, sélectionnez étalonnage complet " dans le menu étalonnage. Et entrez zéro"pour la valeur d’ivraie.
Et le poids de la garniture de mousse, du panneau de fibre de densité moyenne, du bécher en plastique, et de l’eau comme poids d’étalonnage. Sélectionnez ensuite"et tare"Et couvrez le tampon de capteur avec le tampon de mousse, le panneau de fibre de densité moyenne, et le bécher en plastique de l’eau. Lorsque tous les matériaux ont été placés sur la garniture du capteur, sélectionnez l’aperçu de gain"Et ajustez le poids d’étalonnage jusqu’à ce qu’il soit réparti uniformément entre les capteurs individuels.
Lorsque la valeur de l’indicateur d’étalonnage est supérieure à quatre-vingt-quinze, sélectionnez la définition du gain " pour produire une moyenne normalisée pour les capteurs individuels et confirmer l’intégrité des capteurs. Ensuite, sélectionnez suivant » et enregistrez le fichier d’étalonnage dans le dossier d’étalonnage. Sélectionnez nouveau » et entrez le projet et les noms d’animaux pour la première souris à être testée.
Sélectionnez parcourir » et ouvrez le fichier d’étalonnage créé pour le projet. Ensuite, sélectionnez suivant « confirmer que activer la capture vidéo"est sélectionné, et sélectionnez ok"Suivant, peser l’animal. Sélectionnez capture » et enregistrez le poids dans le logiciel.
Après avoir sélectionné ok"placer la souris dans la chambre pendant 5 minutes. Et sélectionnez lancement"Le logiciel enregistrera l’activité de l’animal, capturera une vidéo, synchronisera avec les données du capteur, et divisera automatiquement la vidéo en segments analyzables et non analyzables. À la fin de la période d’essai, sélectionnez score facile « et réglage de pause indépendant"Et sélectionnez avance rapide"pour passer au premier segment analyzable.
Si une zone stable n’a pas la patte correcte identifiée, maintenez le curseur au-dessus de cette zone, et appuyez sur la clé de raccourci appropriée correspondant à la partie correcte du corps. Le logiciel avancé de port de poids dynamique calculera automatiquement le pourcentage de temps analysé passé, et le pourcentage de poids corporel placé sur chacun des 4 membres. Sélectionnez ensuite les résultats « export » et oui"pour exporter les 5 premières lignes de données sommaires dans le programme de feuille de calcul approprié.
Pour chaque animal supplémentaire dans le même groupe, sélectionnez nouveau » et entrez un nom animal unique sans changer le nom du projet. Puis capturer l’activité de chaque animal dans la chambre comme vient de le démontrer. Scores de douleur évoqués pour les soins inflammatoires aigus-un-gène-une arthrite induite, inflammatoire chronique complète f-roy-nes add-jav-ent arthrite induite, et chronique non inflammatoire cole-ag-in-a induit l’augmentation de l’arthrite sur ceux observés pour les animaux naïfs non injectés pour les trois types de douleurs articulaires.
Les femelles, mais pas les mâles avec la douleur commune dégénérative chronique, démontrent des réductions semblables des mesures dynamiques avancées de roulement de poids comparées aux souris naïves dans la douleur articulaires inflammatoire aiguë et chronique. Les mâles avec la douleur articulaires inflammatoire aiguë transfèrent plus de poids aux 4 membres que les animaux naïfs. Le poids portant sur les 4 membres augmente chez les souris femelles par rapport aux animaux naïfs, mais pas chez les mâles souffrant de douleurs articulaires dégénératives chroniques.
Chez les mâles et les femelles souffrant de douleurs articulaires dégénératives chroniques, il n’y a aucune différence dans le temps passé sur les membres postérieurs gauches par rapport aux animaux naïfs. Et les femelles souffrant de douleurs articulaires dégénératives chroniques passent plus de temps sur le membre postérieurs droit non arthritique par rapport aux souris non injectées. Enfin, les souris mâles souffrant de douleurs articulaires inflammatoires aiguës, et les femelles souffrant de douleurs articulaires dégénératives chroniques, passent beaucoup plus de temps sur leurs 4 membres que les animaux naïfs.
L’identification correcte du postérieur des pieds de l’animal par rapport à son corps est très importante. Concentrez-vous sur le postérieur de l’animal plutôt que sur sa tête. Avec cette méthode, nous sommes en mesure de tester l’affectivité de nouveaux analgésiques interhiculaires nouveaux.
