提出的方案将促进对蛋白质的跨代效应和多代效应的研究，这些蛋白质可以在环境中长期存在。我们使用了一种具有 99.5 的免费线虫作为草本虫，以节省研究跨代和多代效应的时间和精力。这种技术可以用来证明最终药物的长期影响，因为本协议中的线虫与人类有许多保守的机制或通路。
这种方法可以提供对药物合成和环境管理领域的见解，因为它们需要对化学品的潜在危害的反馈。该方法可应用于达芙尼亚磁石，更注重水生毒性。此外， 德罗斯菲拉黑色素， 以进一步探索对性别的影响。
他或她会坚持这样的想法，即研究几代人的影响是耗费时间和精力的。一开始不要害怕。遵循协议将赢得您丰硕的成果。
为了培养大肠杆菌，移液器200微升从细菌悬浮液到50毫升的LB介质在烧瓶。或者使用接种回路从NGM agars中挑选一个小菌群，并放在LB介质中。为了培养C.elegans，在显微镜下，数一数之前准备的堆叠NGM阿加的线虫。
当数字接近2000时，使用无菌尖端切割1/6的NGM阿加，并转移到新准备的NGM阿加与细菌草坪。将 NGM 阿加在 22 摄氏度的培养箱中倒置，以进行后续培养。大约36小时后，线虫变得格格不长。
使用两毫升无菌水将每个NGM阿加上刚生产的麦线虫和新生产的鸡蛋冲洗到无菌离心管中。将管子放在架子上 30 分钟，以安定线虫，然后通过移液丢弃 85% 的超自然剂。判断线虫是否足够高，可以同步是非常重要的。
否则，年龄同步操作将徒劳无功。将颗粒与七卷次氯酸钠溶液混合，每两分钟摇动离心管五至八次，以解液分离幼虫和成年线虫。在20摄氏度下以700倍G离心管3分钟，然后通过移液将超级钠丢弃。
将颗粒重新悬浮在五卷无菌水中，以清洗年龄同步的鸡蛋。在 20 摄氏度下以 700 倍 G 离心三分钟。用无菌水重复洗涤两次。
接下来，在管子中加入一卷无菌水，重新悬浮与年龄同步的鸡蛋。通过移液 50 微升将鸡蛋悬浮液分发到每个新的 NGM 阿加子上，并配有细菌草坪。将NGM阿加在20摄氏度的培养箱中保持顶部，30分钟，让水蒸发或被细菌草坪吸收。
然后，翻转NGM阿加，倒置，为随后的文化，并标记时间作为鸡蛋时间。卵子时间36小时后，线虫到达L3幼虫阶段。使用两毫升无菌水将线虫从每个NGM气量中冲洗到离心管中。
沉淀30分钟后，用K中等液替换85%的超级钠，消化肠道中的食物两小时。然后，丢弃超级纳特。使用 K 中等将线虫悬浮液调整为每 100 微升约 200 线虫，以便进行后续实验。
为了避免边缘效应，在96孔无菌微孔板的中间区域，将100微升的准备好的对照或化学溶液加入10孔，如6组复制。在60口井中，每口加入100微升的准备好线虫K介质。将时间标记为 T0。执行曝光 24 至 96 小时。
曝光后，使用移液器从每组5个孔中收集线虫，进入6个1.5毫升离心管。将线虫沉淀30分钟，然后移液器丢弃超钠。用一毫升消毒水清洗底部的线虫。
将线虫沉淀30分钟。丢弃超超自然剂，并使用底部的线虫进行暴露父代的指示器测量，标记为 F0。从每组剩余的五口井中收集线虫。如前所述，沉淀和清洗线虫。
接下来，加入100微升无菌水，重新悬浮每个管中的线虫，并将线虫悬浮液均匀地转移到三个新准备的NGM加糖上，用细菌草坪。孵育线虫36小时，成为格拉维德，并执行年龄同步，如前所述。在NGM agars上用细菌草坪孵育同步的卵子36小时后，将线虫冲洗成6个离心管。
使用一毫升灭菌水进行沉降和洗涤后，使用底部的线虫对标记为 T1 的后代进行指示器测量。将 99 毫升温暖的 NGM agar 与一毫升的控制或化学溶液混合。根据手稿，在用细菌悬浮物准备阿加斯后，在生物安全柜中，将培养皿的上盖放在一边，将细菌草坪暴露在紫外线下 15 分钟。将年龄同步的鸡蛋移到经过紫外线处理的糖上。
将父代 F0 的曝光的开始标记为天零。在20摄氏度下孵育三天。然后，使用成熟的线虫测量F0的效果。此外，第三天，使用装有人造纤维线弯曲成环的玻璃棒来挑选F0成熟的线虫，然后滑到新的经过紫外线处理的NGM阿加的表面上。
第四天，从NGM agars中挑选并丢弃成熟的F0线虫。第六天，使用经过三天暴露的F1成熟线虫进行指数测量。在该协议中，镉、铜、铅和锌对身体弯曲频率的跨代效应表明，产前接触后线虫亲亲F0的抑制作用小于其后代T1。磺胺多代残留对线虫寿命和生殖的影响表明，生殖在病菌线暴露中受到显著影响，毒性在T3代至T6代无暴露的代代中持续存在。
林丹对线虫生化和遗传指数的多代接触和多代残留效应表明，胰岛素信号调节中的干扰作用有致畸作用。此外，sgk-1和 akt-1 信号之间的变化表明，不同接触代的线虫表现出不同的耐受和避免反应策略。在每次操作前检查线虫的生活状态，并相应地修改以下步骤。
其他影响，例如，化学品的肥胖效应，可以包括进一步回答肥胖在几代人中日益普遍的问题。在此基础上，可以探索出进一步的机制。例如，世代之间的遗传表观遗传信号。
氯溶液具有很强的氧化能，避免皮肤直接接触。
