不同植物种的射击顶端共聚焦活图

拍摄控制植物生长和繁殖的人工美士。这种方法不仅有助于我们研究模型物种，而且在不同的作物中，研究射向的形态和内部结构。这种技术是一个非常有效的过程。

拍摄脂肪可直接以高细胞分辨率可视化，无需任何劳动密集型样品固定和组织分割步骤。首先，种植阿拉伯植物、番茄和大豆植物，详见文本协议。从螺栓的阿拉伯植物中切开花序射尖。

握住主茎的基底部分，用钳子从主茎上去除尽可能多的旧花器官。继续去除立体显微镜领域中其余的花朵，直到从目镜中查看拍摄效果。要查看来自番茄或大豆的植物性射生，请解剖出植物中的青菜、叶子和根部。

在立体显微镜下保存植物的低叶，用钳子进一步解剖覆盖植物的叶子和叶原体。在干净空的培养皿中，移液 50 微升的碘化溶液。将整个解剖的射点浸入染料中两分钟。

在染色过程中，将整个花序拍摄成花膜或植物性花样，浸入碘化溶液中，实现均匀染色。在无菌、去维化的水中冲洗染色的射顶两次。现在，用钳子在准备好的成像盘的中心刺穿一个孔，并在介质中将染色的拍摄顶点直立。

将成像盘充满无菌、去化的水，以完全浸入样品。通过立体显微镜查看样品。上下移液，去除夹在梅里斯特姆周围的气泡。

然后，调整果糖中茎的角度，以确保从正上方完全可见射射。现在，将成像盘放在共合显微镜的样品阶段。降低浸水透镜，提高显微镜样品阶段，让透镜尖端浸入水中。

打开共聚焦显微镜软件，使用目镜定位并聚焦在明亮领域的拍摄中。在共合显微镜软件中操作采集功能。启动实时模式，从计算机屏幕查看样本，并设置激光扫描实验的所有参数。

调整参数时，使用范围指示器功能定义信号是否饱和。用于成像采集的相同软件可用于可视化三维透明投影。打开原始共和文件，单击 3D 菜单，然后选择"透明"以生成 3D 投影视图。

选择"透明度"可调整投影的三个参数，包括阈值、"渐变"和"最大值"，以提升 3D 图像的透明度。现在，选择"浅色"可调整 3D 图像的亮度。导出投影图像，并将它们保存为 TIFF 文件。

要可视化 3D 图像的深度编码视图，请使用同一软件。再次，单击 3D 菜单，然后选择"外观"。选择"特殊"，然后选择深度编码。

导出投影图像，并将它们保存为 TIFF 文件。这张从正交部分到阿拉伯细胞中间拍摄的面壁图像显示，在多个细胞层中几乎所有的细胞中，水平壁都沾满了碘化二甲二醇。通过花序拍摄球体内的一个横向部分的视图显示，来自 XY 平面的细胞也清晰成像。

3D投影视图显示，花序梅里斯特姆形成一个圆顶式结构，周围是正在发育的花香。这张从正交部分到番茄拍摄中间的图像也表明，水平墙壁上沾满了多个细胞层的碘化丙二，尽管来自深室内区域的碘化丙二信号略低。一张从一个横向部分穿过植物性射片的深层的图像揭示了来自XY平面的细胞和植物性梅里斯特姆和叶原体之间形成的边界。

3D投影视图可以进一步全面查看番茄植物形状和组织。这里显示的是一个正交视图，通过大豆拍摄阿普西姆和同一拍摄阿普里斯特梅里斯特姆的3D投影中间。圆顶一样植物性梅里斯特姆及其衍生的新叶原始也可观察到。

碘化丙二很容易被染色受损或死细胞，这将极大地影响图像的质量，因此在准备拍摄异体物质样本时，避免任何物理损伤非常重要。