我们在约翰霍普金斯大学的实验室一直在进行小动物肾脏和肝移植超过20年的经验。此特定协议概述了在大鼠中成功进行正畸肾移植所需的关键步骤。为了增加成功的概率和可重复性，我们的协议包括三个独特的步骤，通过门户静脉灌注供体肾脏，并使用袖口系统对肾脏静脉和输尿管进行抗剖。
演示这个程序的将是乐琪博士，一个研究生在我们的实验室。要开始此过程，请对捐赠大鼠进行麻醉，如文本协议所述。将大鼠放在一个苏皮位置，用无菌遮蔽胶带固定四肢。
应用眼部润滑剂，对手术场进行消毒，如文本协议中所述。在第一次切口之前，通过检查没有头趾捏戒反射，确保大鼠被充分麻醉。使用剪刀，首先做一个大的纵向中线皮肤和肌肉切口从交响乐到西腓，并进入腹腔。
用潮湿的无菌纱布盖住肠道，并转移到腹部的右侧，露出大肛门、维纳卡瓦和左肾。用一毫升的cc注射器涂抹一毫升预热盐水，以保持肠道和腹部器官的湿润和正常温度。应用第二个湿润的纱布覆盖和调动胃和脾颅到肾脏。
然后添加一个小的湿纱布，以覆盖暴露的肾脏。使用显微手术解剖钳，从结缔组织和相互分离和调动左肾动脉和静脉。现在通过烧灼左肾静脉来分离左肾静脉，通过烧灼性肾内动脉来隔离左肾动脉。
之后，通过解剖的钳子解剖结缔组织，调动大动脉和维纳卡瓦的优越和低于左肾的骨骼。使用解剖钳子从结缔组织中分割并调动尿管，然后使用微型剪刀在从肾脏骨盆中测量大约两厘米的长度进行对角切口。将聚酰胺袖口插入尿尿器的一半，通过放置 8-0 的结来固定袖口丝绸缝合线。
使用解剖钳或微型剪刀将其从肾上腺脂肪分离来调动左肾。保留肾脏附着的脂肪胶囊，并使用该站点处理肾脏。现在，使用注射器通过笔静脉用27针施用200个单位肝素。
用棉签对注射部位施加压力至少一分钟，以防止出血。识别门户静脉和劣质的维纳卡瓦。暴露劣等的维娜卡瓦。
使用 16 表针将 50 毫升与 500 单位肝素混合在门户静脉中，准备冲洗肾脏。冲洗前，在红外线水平上切割劣质静脉注射，在针头插入位点切开入口静脉，让血液排出血液循环。开始冲洗肾脏逐渐注入盐水溶液。
观察肾脏的颜色从深红色到均匀的灰色或淡色。冲洗后，将肾动脉和静脉近到主动脉和静脉注射。将冲洗过的肾脏放在含有冷盐水的培养皿中，然后将捐赠者的身体从手术场中移走。
一旦肾脏在冷盐水中，固定和固定静脉袖口的手柄，并轻轻地拉下袖口的肾静脉。然后使用 8 - 0 放置三节， 将肾静脉放在袖口上丝绸缝合线。要开始接收程序，请重复从捐赠程序到肝素管理的步骤。
然后将两个创伤微瓣夹放在左肾动脉和静脉近到主动脉和静脉卡瓦。将接受者肾静脉近到肾脏的入口。用肝素盐水冲洗肾静脉，将所有剩余的血液从血管中排出。
将连接的肾静脉滑过以前位于供体肾脏的袖口肾静脉。然后用 8 - 0 固定静脉丝绸缝合线。在将肾静脉固定到袖口上时，保持相同的位置方向。
将肾动脉近到接受者肾脏的入口。用肝素盐水冲洗，去除血管中多余的血液。现在将尿尿器在左肾的下极水平。
从肾上脂肪中调动肾脏，取出原生肾脏。使用 10-0 尼龙缝合线，用 8-10 个中断的缝合线对肾动脉进行端到端的动脉瘤。使用冒险层操纵动脉。
拆下容器夹以重新启动肾脏的再灌注。首先拆下静脉上的夹子，然后取下动脉上的夹子。使用无菌棉签为动脉瘤病区周围的任何渗出区域增加轻压。
几分钟应该足以获得专利的动脉瘤。简要观察肾脏，以评估足够的灌注。重新灌注后，肾脏应立即改变颜色，几分钟后逐渐恢复其自然深红色。
有时观察到尿尿和现场尿液生产的可见近位。将尿套的外露尖端插入接收器尿尿器，然后用 8-0 固定接收器尿修器。丝绸领带。为了保持供体和接收器的位置，将每个尿尿器的末端彼此系在一起。
可选地，用3-0丝线来绑下肾骨，使右肾切除。从腹腔中去除所有纱布，将所有器官返回其自然位置。然后喷一毫升盐水在肠道上，以保持他们潮湿。
在直肠肌肉上使用 4-0 可吸收的缝合线和 4-0 丝缝合线关闭腹部，以中断的方式关闭皮肤层。将动物放在一个干净的笼子里，可以接触到饮用水和食物，并允许在37摄氏度的加热垫上恢复。观察恢复一到两个小时，然后再将动物放回动物设施。
患有联合肾移植的动物无需任何免疫抑制治疗即可获得长期生存。相反，接受异体肾移植而不进行免疫抑制的动物则拒绝移植，以8天的中位存活期死于肾衰竭。平均血清肌氨酸在合成组中适度增加，而在异基因组增加14倍。
切除后，合成肾的宏观视图均未出现任何异常。肾的颜色和内部结构仍然完好无损。相比之下，被拒动物的肾脏所有图谱呈现红色出血斑块与内部结构的破坏。
血氧林和Eeosin的合成移植物的染色显示薄球状毛细血管循环与正常数量的内皮细胞和中分细胞。拒绝所有显示被破坏的球状结构与炎症和管状炎的迹象。CD8阳性染色，以确认T细胞中培养排斥。
虽然合成全图显示很少CD8阳性T细胞，但被拒绝的所有图谱显示，在球状细胞和图巴利周围，CD8阳性细胞的数量显著增加，证实了T细胞的抑制。该模型为排斥、耐受和供体-宿主相互作用的免疫学现象提供了重要见解，为固体器官移植治疗性临床干预的发展铺平道路。
