一种用于小鼠肾移植的改良手术技术

小鼠肾移植对于研究急性和慢性同种异体移植物排斥反应的机制至关重要。在这里，我们介绍一种新的手术技术，用于小鼠腹部肾移植模型中的血管吻合术和输尿管植入术。在传统的小鼠肾移植模型中，主动脉的上部与肾动脉近似连接。

供体的左肾静脉在腔静脉处横切，供体主动脉在肾动脉下方平分，以便稍后吻合受者的腹主动脉。在这种改进的小鼠肾移植技术中，供体左肾静脉也在腔静脉处横切，但供体主动脉在肾动脉的后代上方被切除，并且其吻合口到受体腹主动脉。当主动脉的供体末端结扎时，输尿管动脉被故意保留。

现在我们开始演示外科手术。对于麻醉，将小鼠放入盒子中吸入异氟醚约40至60秒，以诱导意识不清。一旦鼠标被麻醉，称量鼠标。

根据小鼠体重，腹腔注射氯胺酮，甲苯噻嗪，乙酰丙嗪给予麻醉小鼠。当麻醉效果时，夹住腹部皮毛。然后，将鼠标固定并消毒在手术台上。

使用交叉腹部切口切开皮肤。切开腹壁的肌肉。接下来，用盐水吸入纱布小心地移开内脏。

暴露左肾、主动脉和下腔静脉。仔细烧灼左腰静脉，包括其下部分支和其他小血管（包括左肾上腺血管）。调动左右肾动脉之间的主动脉区域，长度约为两毫米。

分离红外线下腔静脉和主动脉。并在主动脉下方通过弯曲的镊子，在该血管周围放置一个松散的7.06缝合线。使用两个五毫米微血管夹交叉钳夹右肾动脉下方的主动脉区域和下腔静脉。

从腔静脉切开左肾静脉。用一毫升肝素溶液冲洗主动脉。收紧结扎，将主动脉切开到结扎下方以及近端钳位下方。

精心准备，使脆弱的输尿管动脉完全保存。通过谨慎地烧灼组织周围的所有血管，完全释放左肾和相关血管。取出肾脏并将其以四度储存在细胞系溶液中。

初始操作步骤类似于先前显示的供体小鼠的操作步骤，包括麻醉和消毒。通过正中切口打开腹部，然后用盐水溶液用湿纱布覆盖腹部器官。小心保存红外线主动脉，并确保每个大血管分支都经过烧灼。

使用电灼术在肾盆近端的位置仔细解剖左输尿管。然后，切除左肾。暴露下腔静脉和腹主动脉，并将其与周围脂肪组织分离，长度约为四毫米。

然后交叉钳夹每个与两个微血管钳夹大致和远端。使用微型针座引导10/0单丝缝合针，该针从近端到远端穿过主动脉壁放置。通过轻柔向上牵引缝合线，同时用细弯曲的剪刀直接在针的下表面下方切割，实现约一毫米的椭圆形动脉切开术。

以端到端的方式进行供体-受体主动脉吻合术。缝合吻合口的近端和远端。最后一针使用两个单独的10.0缝合线。

绑扎后，将两条长缝合线（包括针头）留在原位。在远端 - 近端方向上用两条均匀间隔的缝线连续缝合吻合口的主动脉壁的左侧。最后一次缝合后，引导缝合线穿过上部缝合线领带上方的血管壁的部分厚度，同时对下部缝合线扎带的短端施加轻柔的牵引力。

请注意，在这种新的无结技术中，最后一针没有绑在上领带的短端。将移植的肾脏翻转至正常位置。现在，使用近端到远端的三针以近端到远端的方式连续缝制主动脉吻合口的右壁。

请注意，与传统的手术技术相比，最后一条缝合线与附近的远端领带合并。不要将其绑在下缝线的末端，将其切割成大约两到三毫米的自由长度。纵向切割下腔静脉，长度足够约1.5毫米。

将此切口定位在略低于其主动脉对应物的位置。使用与前面描述相同的缝合程序进行静脉吻合术，不同之处在于吻合口的每一侧需要四到五针。最后的缝线留作与上述主动脉吻合口相似的长度的自由末端。

而新的无结吻合技术，最后一针不绑，而是自由。这缩短了手术时间，并允许外科医生增加或减少吻合口的大小。这种改善降低了血管吻合术的难度和术后并发症。

完成两次吻合后，使用干拭子对缝合区域施加轻柔的压力约10至20秒。之后，可以移除两个夹子。使用带有10.0缝合线的直针穿透接受者的尿腔，并将其插入21 G针腔进行指导。

现在引导21 G针在上一个针应用的位置缝合一个孔，然后拉出针。缝合修剪过的输尿管末端，并在其进入处再次用这种10.0缝合线穿孔膀胱。将10.0细丝和输尿管通过构造的孔拖入尿囊。

将供体的输尿管吻合到接受者的尿囊。在这里，将输尿管的外膜连接到膀胱壁的外膜，并用三到四针进行间歇缝合。拉出牵引缝合线。

将肠道放回腹腔。进行两层缝合，首先是腹部肌肉，然后是皮肤以关闭腹部伤口。将移植的小鼠放入氧气和温度受控的腔室中，以便在手术后恢复。

术后连续四天给予充分的术后镇痛。在移植麻醉后五天对受体小鼠进行对侧肾切除术。抬起并记录鼠标的状态。

我们通过评估移植的等移植肾与天然受体对侧肾的组织学变化来比较传统和改进的移植技术。肾小管和肾间质纤维化的奖杯程度在移植后4周和12周没有发现显着差异。我们之前研究了这种新的无结技术的结果，并在程序互操作和术后并发症的技术方面将其与经典方法进行了比较。

这里显示的改良技术与移植内动脉静脉血栓形成的发生率较低有关。进行狭窄的时间明显减少，并且实现了出色的肾脏等移植物，实现了长期生存。小鼠肾移植是一个复杂而尖端的过程。

这是一种用于血管吻合术和肾植入术的新型手术技术，致力于提高整体成功率，使其成为研究肾移植后自身免疫反应的可靠工具。