研究小鼠创伤性脑损伤后凯库姆微生物群的改动

大脑和肠道微生物群之间的同步性和线相互作用仍然未知。使用这种技术，可以检查小鼠脑外伤后肠道微生物群的改变。这种技术的主要优点是相对简单和高效。

演示这个程序的将是文东你，一个研究生从我实验室。对于创伤性脑损伤诱导，确认麻醉小鼠对手趾捏缺乏反应，并给动物的眼睛涂抹软膏。剃须后，用70%乙醇对裸露的头皮皮肤进行消毒，然后再将头皮在下垂平面中倾斜。

使用钳子，收回两侧的切口，并稍微分离周分。使用标记在头骨的右侧区域绘制一个三毫米直径的圆，该圆离中线两毫米远。使用电钻小心地穿透头骨，而不会损坏杜拉。

取出骨瓣，露出三毫米骨窗，并在颅骨切除术上放置一个塑料损伤管。用牙科丙烯酸将牙管粘合到头骨后，使用五毫升注射器用无菌 0.9% 的正常盐水填充管，注意避免气泡。打开示波器和放大器。

确认横向流体打击损伤装置的高压管无气泡，并提供约10个测试脉冲，直到该装置发出稳定信号。调整钟摆起始位置的角度，达到约两个标准大气的脉冲强度，将损伤管连接到横向流体打击损伤装置。扣动扳机释放钟摆，诱发脑损伤。

然后通过整个封闭的、充满液体的管道系统获取脉冲并将其传输到 dura。脑损伤诱导后，取出牙管，缝合切口。然后将鼠标放在加热垫上，进行监测，直到它被流动，然后将动物返回到其家庭笼子，并获取食物和水。

在指示的实验时间点，根据标准方案暴露肠道，并使用创伤钳轻轻地将肠子与其他肠道分离。当组织被定位时，用锋利的剪刀切割表，并手动将表骨内容物提取到无菌敷料上。然后将内装物转移到1.5毫升微离心管中，用于零下80摄氏度的储存，直到微生物群分析。

16S重组DNA测序显示，在创伤性脑损伤三天后，小鼠的caecum微生物群多样性降低，图中所示的虚假和创伤性脑损伤组中，最丰富的分类。此外，非公制、多维结垢显示创伤性脑损伤后，小细胞微生物群的组成发生变化。记住在钻头骨时保持杜拉完好无损，在定位和分离其他肠道时要保持温和。

按照这个程序，血氧素和 eosin 染色和分析可以执行，以检查创伤性脑损伤后肠道内的组织学变化和炎症反应。