探头电喷电镀质谱的样品制备

因此，这是独特的环境质谱，特别适用于分析生物样品，包括体外和体内。由于这不需要定期对样品进行特殊的预处理，如细胞分馏、分馏和浓度，因此它可以分析一个样本，使生物成分损失最小，尤其是那些以非常少量存在的生物成分。此技术允许您通过质谱法在一分钟内直接分析原始组织材料。

快速是系统鲁棒性不受阻碍，这是该技术固有的主要优势。所有你需要做的只是准备二氧化硅，10毫克的组织标本，和10微升的增殖。并把它们放进一次性墨盒里。

它设置为 PESI-MS 计算机，几分钟后即可获得结果。通过选择适当的质谱仪，您可以注释分子标识。首先，从冰柜中取出肝脏或肾脏组织。

在软木板上，用手术刀或刀将组织标本切成大约两两毫米。或者，用Trepan冲出样品，将柱的长度修剪到两毫米。如果组织被血液污染，用冰冷磷酸盐缓冲盐水短暂清洗。

将大约 10 毫克的切口或冲孔样品放入塑料微管中，并加入 100 微升 50%乙醇。使用微甲虫使样品均质化。然后与移液器一起，将10微升的均质剂放入质谱仪的弹夹的井中。

将墨盒放在直接探针电离质谱仪的电离室中，并安装用于样品电离的不锈钢针探针。牢固地合上室盖，自动激活安全装置。通过单击"开始"图标开始板机，使用屏幕面板分析，对针头施加 2.3 千伏的电压以生成电胶，并确保针头的频率为 3 赫兹。

等待 30 秒钟，完成测量。测量每个样品后，将墨盒和针头处置在生物危害处置器中。要分析质谱，请打开与质谱仪相关的软件。

单击软件的数据文件浏览器窗口中的 L-C-D 文件。选择单击质量谱窗口的单个峰值，并自动描绘 E-I-C。检查 T-I-C 和 E-I-C，然后单击平均频谱图标以选择生成质量谱的时间窗口范围。

导出质量光谱文本数据。要分析体液，应绘制多达10微升的血清样本，并配入1.5毫升微管。将190微升50%乙醇加入管中，然后在室温下涡流两分钟。

为了消除所有的红血球，在摄氏4度下将液体在15，000倍G下离心1至5分钟。将 10 微升的上一液转移到墨盒的井中，然后像以前一样在质谱仪上测量。该协议显示了固体样品、液体样品和活动物的PESI-MS样品制备。

人类肾细胞癌显示中性脂质的特征峰。光谱中具有相对强的峰，其质量-电荷比为900，来自人类肾细胞癌组织，在周围非癌组织中未被识别。这些峰值主要代表三甲基甘油。

在正常肝脏组织中获得的数据示例描述了慢性肝炎和肝硬化患者的肿瘤病变。利用PESI-MS对三个个体的人体血清进行了分析，个体的光谱模式存在明显差异。对于5-FdU内注射到小鼠尾血管中的代谢变化，在原位肝脏中实现了5-FdU钠的非常快速和灵敏的检测。

由于针尖的深度从组织的网站，发挥最重要的电离作用，读取成功的数据采集，一定要按照说明。您可以通过查看商业数据库来识别分子物种。这是一种限定疾病分子机制的方法。

许多研究人员对应用这种技术来预测疾病的繁荣及其预后感兴趣。特别是使用里基特活检。只要确保不要被探针刺破。

使用用于从机器上取下针头的特定仪器可以简单地避免这种情况。