基于胶囊的模型，用于在实验鼠身上的不成熟硬滴答阶段侵扰

我们的技术适用于各种类型的实验，但我们的鼠标模型是喂养滴答声所必需的，并且是保持滴答声在封闭区域，以便于收集和监控所必需的。这种简单方法的好处是效率高、持续时间短，以及在实验的不同时间点监控或收集刻度的能力。我们的系统适用于研究滴答声生物学、宿主-载体病原体相互作用或评估这些医学上重要的节肢动物的不同控制措施。

这种方法要求准确性和注重细节，因为不成熟的滴答声阶段很小，在小鼠身上喂养它们需要将封闭的胶囊牢牢地附着在小鼠身上几天。首先将两毫米 EVA 泡沫粘在一起，这是一种粘合的双粘性泡沫。使用直径为 20 毫米的皮革孔孔从泡沫件上切出一个圆圈。

然后，使用 12 毫米孔冲头切割内部。从粘合剂双粘性泡沫中剥下保护纸条，并在泡沫上安装 20 毫米透明塑料圈。如果给幼虫喂食，请勿从粘合剂泡沫中取下保护纸条，直接与胶囊连接。

在透明塑料中形成一厘米的缝隙，然后使用昆虫学销在实验中创建至少 10 个小孔进行水分蒸发。在小鼠麻醉后，将其放在操作垫上，并附加一个鼻锥，用于连续的异氟烃供应。通过调整异氟水平，确保呼吸速率低于每分钟 80 次呼吸。

将鼠标前部从肩部刀片后部剃到耳朵后面的区域，形成比胶囊表面更大的剃光区域。将非刺激性乳胶涂抹到胶囊的整个 EVA 泡沫站点上，等待一分钟。将胶囊放在鼠标的背上，施加三分钟的恒定压力，特别是在胶囊的左右两侧。

稍微抬起胶囊，目视检查其附着在皮肤上。为确保胶囊的牢固附件施加轻微的三分钟恒定压力，手指，特别是在胶囊的左右两侧。如果发现未连接的区域，用铲子涂抹更多胶水，然后再按三分钟。

如果在实验期间形成非附件区域，请以相同方式修复它。通过一厘米的缝隙将单个仙女引入胶囊。从两侧稍微挤压胶囊，让透明塑料弯曲，然后将仙女推入胶囊内。

转动钳子 90 度，然后拉出。对于幼虫的侵扰，从附着的胶囊上取下纸条，将注射器与幼虫直接放在体内。通过推动注射器柱塞沉积滴答声，然后轻轻地将柱塞转向皮肤，以去除剩余的附着幼虫。

一旦幼虫沉积到皮肤上，通过连接透明塑料圈关闭胶囊。切割一条 3.5 毫米的保护性塑料带，在胶囊周围涂抹保护性塑料带，然后将鼠标返回到笼子。要收集滴答声，请用手术刀在塑料中创建十字形切口，并使用钳子收集滴答声。

如有必要，在透明塑料上粘上粘合塑料片，重新合合胶囊。如果需要在多个时间点收集滴答声，可以使用相同的塑料贴片。或者，小鼠可以安乐死和滴答声收集或手动分离后，胶囊删除。

为了成功恢复小鼠，请将它们关在笼子里一周，让胶囊自然分离。一旦胶囊关闭，检查皮肤上是否异常反应。如果有任何刺激化妆水任何润肤剂。

该协议使得在适用于小鼠背部的 EVA 泡沫胶囊中喂养未成熟的硬滴答声成为可能。使用快速干燥和非刺激性乳胶，确保胶囊在三分钟内牢固连接，并保持附加至少七天。附加两个胶囊可以在同一动物上喂养两组不同的虱子。

此外，实验后完全恢复小鼠，使得动物能够重复使用，避免安乐死。该系统已成功用于喂养克索德斯里西努斯仙女。在两种不同的小鼠菌株中实现了中到高的感染成功率。

在这两种菌株中，所有仙女在四到五天内都完成了喂养，而大多数仙女在第四天就脱落了。尝试此协议时，重要的是剃掉足够的小鼠皮肤区域，并有效地连接胶囊，以避免在实验中意外分离。除了基础滴答声生物学的研究，这种方法可用于探索病原体从滴答声到宿主或宿主到滴答声的传播。

此外，重复使用小鼠的选项为多种再感染提供了可能性，这些感染对免疫学研究或研究不同的滴答声传播的病原体传播是有益的。