Notre technique convient à divers types d’expériences, mais notre modèle de souris est nécessaire pour nourrir les tiques et est nécessaire pour garder les tiques dans la zone fermée pour une collecte facile et la surveillance. L’avantage de cette méthode simple est l’efficacité, la courte durée, et la capacité de surveiller ou de recueillir des tiques à différents moments d’une expérience. Notre système est adapté pour étudier la biologie des tiques, les interactions hôte-vecteur pathogène ou d’évaluer différentes mesures de contrôle de ces arthropodes médicalement importants.
Cette méthode exige la précision et l’attention aux détails car les stades immatures de tiques sont petits et les nourrir sur des souris nécessite que la capsule fermée soit fermement attachée à la souris pendant plusieurs jours. Commencez par coller ensemble une mousse EVA de deux millimètres, une mousse collante double adhésif. Utilisez un poinçon trou en cuir de 20 millimètres de diamètre pour couper un cercle des morceaux de mousse.
Ensuite, utilisez un poinçon trou de 12 millimètres pour couper l’intérieur. Peler la bande de papier protectrice de la mousse collante double adhésif et fixer un cercle en plastique transparent de 20 millimètres à la mousse. Si vous nourrissez les larves, n’enlevez pas la bande de papier protectrice de la mousse adhésive et procédez directement à l’attache de la capsule.
Faire une fente d’un centimètre dans le plastique transparent, puis utiliser une broche entomologique pour créer au moins 10 petits trous pour l’évaporation de l’humidité au cours de l’expérience. Après que la souris a été anesthésiée placez-la sur le tampon de manipulation et fixez un cône de nez pour l’approvisionnement continu d’isoflurane. Assurez-vous que le taux respiratoire est inférieur à 80 respirations par minute en ajustant le niveau d’isoflurane.
Raser la partie antérieure de la souris derrière les omoplates jusqu’à la zone juste derrière les oreilles créant une zone rasée qui est supérieure à la surface de la capsule. Appliquez de la colle au latex non irritante sur l’ensemble du site de mousse EVA de la capsule et attendez une minute. Placez la capsule sur le dos de la souris et appliquez une pression constante pendant trois minutes, surtout sur le côté gauche et droit de la capsule.
Soulevez légèrement la capsule pour vérifier visuellement son attachement à la peau. Pour assurer l’attachement ferme de la capsule appliquer une légère pression constante de trois minutes avec les doigts en particulier sur le côté gauche et droit de la capsule. Si des régions non attachées sont trouvées, appliquer plus de colle à l’aide d’une spatule et presser encore trois minutes.
Si une région de non-attachement se forme pendant l’expérience, corrigez-la de la même manière. Introduire des nymphes individuelles dans la capsule par l’intermédiaire de la fente d’un centimètre. Presser légèrement la capsule de deux côtés pour permettre au plastique transparent de se plier puis pousser la nymphe à l’intérieur de la capsule.
Tournez les forceps à 90 degrés et retirez-les. Pour l’infestation des larves, retirer le glissement de papier de la capsule attachée et placer la seringue avec les larves directement à l’intérieur. Déposez les tiques en poussant le piston de seringue puis tournez doucement le piston vers la peau pour enlever les larves attachées restantes.
Une fois que les larves sont déposées sur la peau fermer la capsule en attachant le cercle en plastique transparent. Couper une bande de 3,5 millimètres de la bande de plastique protectrice et appliquer la bande de plastique protectrice autour de la capsule, puis retourner la souris à la cage. Pour recueillir les tiques, créer une coupe en forme de croix dans le plastique avec un scalpel et utiliser des forceps pour recueillir les tiques.
Si nécessaire, refermer la capsule en collant un patch en plastique adhésif sur le plastique transparent. le même patch en plastique peut être utilisé si la collecte des tiques à plusieurs moments est nécessaire. Alternativement, la souris peut être euthanasiée et les tiques recueillies ou détachées manuellement après l’enlèvement de la capsule.
Pour une récupération réussie des souris, gardez-les dans une cage pendant une semaine supplémentaire et laissez les capsules se détacher naturellement. Une fois la capsule éteinte, vérifiez les réactions anormales sur la peau. Appliquer n’importe quelle lotion émolliente en cas d’irritation.
Ce protocole permet d’alimenter les tiques dures immatures dans des capsules de mousse EVA appliquées sur le dos d’une souris. L’utilisation du séchage rapide et de la colle au latex non irritante garantit que la capsule est fermement attachée dans les trois minutes et reste attachée pendant au moins sept jours. L’attachement de deux capsules permet de nourrir deux groupes différents de tiques sur le même animal.
En outre, le rétablissement complet des souris après les expériences, permet de réutiliser les animaux et d’éviter l’euthanasie. Ce système a été utilisé avec succès pour nourrir les nymphes ixodes ricinus. Un taux de réussite modéré à élevé d’engorgement a été réalisé dans deux souches différentes de souris.
Dans les deux souches, toutes les nymphes ont terminé l’alimentation dans les quatre à cinq jours tandis que la majorité est tombée le quatrième jour. Lorsque vous essayez ce protocole, il est important de raser une zone suffisante de la peau de la souris et d’attacher efficacement la capsule pour éviter son détachement accidentel pendant l’expérience. Outre l’étude de la biologie fondamentale des tiques, cette méthode peut être utilisée pour explorer la transmission des pathogènes de la tique à l’hôte ou de l’hôte aux tiques.
En outre, la possibilité de réutiliser la souris offre une possibilité de réinfestations multiples qui peuvent être bénéfiques pour des études immunologiques ou l’étude de différentes transmissions pathogènes transmises par les tiques.
