本研究的主要目标是演示干根腐病检测的详细方法,如印迹纸技术和病锅技术。这些技术将有助于研究鹰嘴豆植物和Rhizoctonia蝙蝠菌丝之间的相互作用。了解鸡草植物与真菌病原体Rhizoctonia巴塔蒂奥拉的相互作用在农业上很重要。
为此,需要多种用途和高度可重复的检测。在这里,演示了在我们的实验室中广泛使用的两种检测方法。其中一个是印迹纸为基础的,另一个是生病的锅为基础的测定。
要执行印迹纸测定,准备Rhizoctonia巴塔蒂奥拉真菌接种,从倾斜培养到培养,然后到液体培养。准备鹰嘴豆苗圃,在一个大锅播种。把它们连根拔起,放在液体的花尿中,放在印迹纸上。
观察疾病症状,即根部坏死、根部腐烂和接种8天后叶黄。这里显示的是一个简言之,在印迹纸技术的步骤。要执行生病的锅检测,接种鹰嘴豆粉与真菌。
在30摄氏度下孵育15天后,获得病育。然后,粉他们和混合锅混合。在控制锅和病锅上播种。
在以下几天,观察症状,即根部坏死,根腐烂,感染植物上的叶子发黄,播种后10天。病锅可以放大,并可用于大规模筛查。这里展示的是病锅技术中的步骤。
里佐克托尼亚巴塔蒂奥拉是一种正在发育的病原体。这种真菌产生催眠和微细胞,在植物感染期间作为原生性。通过隔离法应用的纯文化用于测定。
这些成功测定的关键点是最佳的中分负荷。印迹纸技术的演示从这里开始。为了准备液体Rhizoctonia巴塔提奥拉注射液,用三天前新鲜盘培养物的真菌加糖塞接种500毫升肉汤,并在28摄氏度的培养箱中孵化烧瓶5天。
过滤出深灰色真菌菌体与微腹腔。悬浮在自 <3>分水中并取出介质。再次,过滤掉我的西莉亚,并去除水分通过印迹干燥我的西莉亚几分钟。
将100克真菌注射在200毫升的自功能化水中,放在果酱瓶中,并正确混合。通过播种表面消毒种子来发展鹰嘴豆苗圃。播种8天后,将植物连根拔起,清洗并用自洗RO冲洗。拿一张印迹纸,折叠一次,放在纸盒上。
用自动处理的水把它弄湿。采取植物和浸入孵化30秒间歇性向上和向下运动。将植物放在一个方式,根覆盖在薄板内,佛利亚留在外。
折叠另一半,弯曲纸张。为了控制,将植物浸入自 <3> <3>化水中,将托盘放在生长室中八天。结果。观察叶黄、根腐烂、根部坏死和侧根数减少等症状。
生病的锅技术的演示从这里开始。拿一公斤商业鹰嘴豆种子。用自来水清洗种子,再用RO水清洗。
浸泡种子五个小时。再次,用RO水洗涤种子,在果酱瓶中加入300克。在 121 LVS 下连续两次进行 15 分钟的自动保存。
冷却后,将瓶子通过层流转移。用三个真菌加子塞为瓶子接种大约四毫米的平方大小,并摇动它,以正确混合。将瓶子包裹在30摄氏度的孵化器中孵化15天。
观察鹰嘴豆种子周围有深色木花生长的瓶子,并取出种子。在室温下干燥并粉粉。将Rhizoctonia巴塔蒂奥拉粉与索洛里特混合,并在室温下保持五天。
表面对GT62种子进行消毒,并在两厘米深的地方播种。结果。观察病锅中90%死亡率。播种后10天,观察症状,如根坏死和减少侧根数和叶发黄在随后几天。
病锅也可以在田间土壤中准备。干旱和里佐克托尼亚巴塔蒂奥拉感染。通过扣水在病锅中施加干旱压力。
这里展示的植物受到控制,干旱,病原体,以及同时干旱和病原体压力。观察症状,即与仅使用病原体的治疗相比,在联合应激治疗中,多坏死、根腐和侧根数减少,根长。结论。膨胀纸技术可以在振动条件中进行。
病锅技术可以在Vivvo条件下执行。在病港,非生物性压力,即干旱压力,可以随病原体感染一起施加。利用这些技术,可以研究病原体感染模式。
大多数生理变化发生在鹰嘴豆-瑞佐克托尼亚巴塔蒂奥拉相互作用期间,还筛选鹰嘴豆基因型的耐药性。印迹纸测定对于生成用于显微镜和分子生物学研究的质量样品非常有用。病锅测定,模仿自然感染条件,适用于筛查鹰嘴豆种质。