Bu çalışmanın temel amacı, kağıt tekniği ve hasta saksı tekniği gibi kuru kök çürüklüğü hastalıklarının ayrıntılı bir metodolojisini göstermektir. Bu teknikler nohut bitki ve Rhizoctonia bataticola arasındaki etkileşimi incelemek için yararlı olacaktır. Mantar patojeni Rhizoctonia bataticola ile chickweed bitki etkileşimini anlamak tarımsal açıdan önemlidir.
Bunun için çok yönlü ve son derece tekrarlanabilir testlergereklidir. Burada, laboratuarımızda yaygın olarak kullanılan iki tahlil gösterilmiştir. Bunlardan biri kağıt tabanlı lekeleme, ve diğer hasta pot tabanlı test.
Leke kağıt analizi yürütmek için, katkı kültüründen Petri plaka ve daha sonra sıvı kültür kadar ölçekleme tarafından Rhizoctonia bataticola mantar inoculum hazırlamak. Büyük bir tencerede tohum ekim, nohut fidanlık hazırlayın. Onları kökünden ve sıvı inoculum koyun ve blotting kağıt üzerine yerleştirin.
Hastalık belirtileri için gözlemlemek, yani, kök nekroz, kök çürümesi, ve inogülasyon sekiz gün sonra yaprak sarar. Burada gösterilen bir özet, kağıt tekniği lekeleme adımları. Hasta pot testini yürütmek için nohut yemeğini mantarla aşılamak.
15 gün boyunca 30 derecede kuluçkadan sonra hasta kültürü elde edilir. Sonra, onları toz ve pot karışımı ile karıştırın. Kontrol pot ve hasta tencere üzerinde tohum ekin.
İlerleyen günlerde, semptomlar için gözlemlemek, yani kök nekroz, kök çürümesi, ve enfekte bitkilerüzerinde yaprak sarar, ekim 10 gün sonra. Hasta pot kadar ölçeklendirilebilir ve büyük ölçekli gösterimleri için kullanılabilir. Burada gösterilen hasta pot tekniğinde adımların bir özet.
Rhizoctonia bataticola gelişmekte olan bir patojendir. Bu mantar hyphae ve microsclerotia üretir, hangi bitki enfeksiyonu sırasında birincil inuclum olarak hareket. İzolatif yöntemle uygulanan saf kültür tahliller için kullanılır.
Bu başarılı tahliller için anahtar nokta optimum inoculum yüktür. Lekeleme kağıt tekniğinin gösterimi burada başlar. Sıvı Rhizoctonia bataticola inoculum hazırlamak için, üç günlük taze plaka kültüründen fungal agar fişi ile 500 ml suyu aşılayın ve beş gün boyunca 28 santigrat derece bir kuvöz de şişe kuluçka.
Mikrosclerotia ile koyu gri mantar misel filtre. Otoklavlı suda askıya alın ve ortamı çıkarın. Yine miseli filtreleyin ve birkaç dakika misel kurutarak nemi çıkarın.
Bir reçel şişesinde otoklavlı su 200 ml mantar inokül 100 gram askıya alın ve düzgün karıştırın. Tek taban da yüzey sterilize tohumlar ekim tarafından nohut kreş geliştirin. Ekimden sekiz gün sonra bitkileri sökün, yıkayın ve otoklavlı RO ile durulayın. Bir leke kağıt alın ve bir kez katlayın ve tepsiye yarısını yerleştirin.
Otoklavlı su ile ıslak olun. Bitkileri alın ve aralıklı yukarı ve aşağı hareket ile 30 saniye boyunca inoculum içine daldırma. Kökleri levha içinde kaplı ve folia dışında kalır şekilde bitkiler yerleştirin.
Diğer yarısını katlayın ve kağıdı bükün. Kontrol için, otoklavlı suya bitkiler daldırma, sekiz gün boyunca bir büyüme odasında tepsileri tutun. Sonuç -ları. Yaprak sararma, kök çürümesi, kökne nekroz ve lateral kök sayısında azalma gibi belirtiler için gözlemleyin.
Hasta saksı tekniğinin gösterimi burada başlıyor. Bir kilo ticari nohut tohumu alın. Tohumları musluk suyuyla yıkayın ve RO suyuyla tekrar yıkayın.
Tohumları beş saat bekletin. Yine, RO su ile tohumları yıkayın bir reçel şişesinde 300 gram ekleyin. 121 LVS'de 15 dakika boyunca iki kez sürekli olarak otoklavlayın.
Soğuttuktan sonra, lamina akışı ile şişe aktarın. Üç mantar agar fişleri ile şişe aşılamak yaklaşık dört milimetre kare boyutları ve düzgün karıştırmak için iyi sallayın. Şişeleri sarın ve 15 gün boyunca 30 derecede bir kuluçka makinesinde kuluçkaya yatırın.
Nohut tohumları etrafında koyu misel büyüme ile şişeler için gözlemlemek ve tohumları kaldırın. Oda sıcaklığında kurulayın ve toz. Mix Rhizoctonia bataticola toz solorite ile ve beş gün oda sıcaklığında saklayın.
Yüzey GT62 tohumlarını sterilize eder ve iki santimetre derinlikte ekin. Sonuç -ları. Hasta tencerede %90 mortalite gözönünden. Ekimden 10 gün sonra, köklerde nekroz ve lateral kök sayısında azalma ve sonraki günlerde yaprak sarargibi semptomları gözlemleyin.
Hasta tencere tarla toprağında da hazırlanabilir. Kuraklık ve Rhizoctonia bataticola enfeksiyonu. Suyu tutarak hasta tencereye kuraklık stresi uygulayın.
Burada kontrol, kuraklık, patojen ve eşzamanlı kuraklık ve patojen strese maruz kalan bitkiler gösterilmiştir. Semptomlar için gözlemlemek, yani, daha fazla nekroz, kök çürümesi, ve lateral kök sayısında azalma, ve kombine stres tedavisinde kök uzunluğu patojen sadece tedavi ile karşılaştırıldığında. Sonuç. Blotting kağıt tekniği In Vitro koşullarında yapılabilir.
Hasta pot tekniği In Vivo koşullarında yürütülebilir. Hasta limanda, abiyotik stres, yani, kuraklık stres, patojen enfeksiyonu ile birlikte empoze edilebilir. Bu teknikleri kullanarak, bir patojen enfeksiyon desen inceleyebilirsiniz.
Fizyolojik değişikliklerin çoğu nohut-Rhizoctonia bataticola etkileşimi sırasında meydana gelir ve ayrıca direnç için nohut genotipleri tarar. Leke kağıt analizi çok mikroskopi ve moleküler biyoloji çalışmaları için kaliteli örnekler oluşturmak için yararlıdır. Doğal enfeksiyon koşullarını taklit eden hasta pot atabi nohut germplazmı taraması için geçerlidir.
