血管灌注固定的穆林肺的空气膨胀

这是一种廉价的方法，结合了空气膨胀和血管灌注固定的优势，以保存肺部进行结构和功能分析。这项技术的主要优点是保存细胞形态和肺空域内的位置。在将诱饵存根适配器放入气管和灌注针插入右心室时，应小心谨慎，以确保足够的通货膨胀和固定。

要设置充气装置，将水柱的注射器放入环架中，测量从动物平台到水柱 25 厘米的垂直高度。将水柱管的末端连接到空气室的塞孔上，并将空气室的女性诱饵中的管子连接到动物加工容器上的止流管。确认动物加工容器外部的气室盖和塞孔关闭，从水柱到空气膨胀室的管子上的止损孔打开。

然后将注射器装满水至25厘米大关。水会流过注射器和管子进入空气室。一旦压力被平衡，水就会停止流动。

为了使肺部为通货膨胀做好准备，在安乐死老鼠肋骨笼下的腹部壁上做一个横向切口，在臀部上方做第二个横向腹壁切口。沿着中线从内部切口切到高级切口，并用钝剪刀小心地切入隔膜的侧面。隔膜一被刺穿，肺就会塌陷。

沿着隔膜横向切割，打开胸腔，沿着胸骨从西福伊德过程切割到杂耍机腔，横向在肋骨笼上方，以充分暴露心脏和肺部。固定肋骨笼的两侧，在气管上方的颈部进行中线切口。去除气管周围的皮肤、肌肉、甲状腺和结缔组织，并使用弯曲的钳子在后气管下滑动两片缝合线。

使用一块缝合线将通货膨胀诱饵存根适配器保持到位，并使用 18 量表一英寸针在气管上打一个小孔。将一个20仪表的诱饵存根适配器插入孔中，并将缝合线系在气管周围，立即与诱导存根采用者进入孔的位置发生差。然后将动物转移到动物加工容器中，并将诱饵存根适配器连接到动物加工容器内部的女性诱饵上。

为了充气肺部，将附着在灌注装置管上的25个量表5/8英寸的针头放入心脏右心室，切开腹主动脉，让血液从心脏排出，促进香水通过肺部的流动。打开动物加工容器外部的塞子，在 25 厘米的水中充气 5 分钟，同时注意注射器中的水位不会迅速下降。在肺充膨胀的最后一分钟，打开渗透泵，流量为每分钟10毫升。

肝素溶液应从瓶子流经管子进入动物。在使肺部充气五分钟后，关闭泵，将香水从肝素切换到固定剂。将水柱注射器降低到 20 厘米。

当压力变化时，气泡在水柱内移动是正常的。检查注射器中的水位。它应该是在25厘米大关。

然后等待一分钟，让肺部从25至20厘米的水压下放气，然后以每分钟6.5毫升的流量重新启动泵，进行10至15分钟的血管固定灌注。要提取膨胀和固定的肺组织，请将第二根线紧紧系在气管周围，远距离到诱饵存根适配器，并从气管中取出诱饵存根适配器。从心脏取出针头，用钝剪刀切开结缔组织，后切至中性，将肺和心脏从胸腔中取出，避免刺穿肺部。

小心地从肺部取出心脏，在50毫升圆锥管中将肺放入20至25毫升的固定剂中。将支撑气管的缝合线拉过锥形管的开口，并通过盖子的螺纹固定缝合线。然后倒置管子，以确保浮力充气的肺在固定中保持完全淹没，并按照标准协议处理肺部进行组织学研究。

在解剖过程中输入隔膜时，胸膜空间的完整性将被废除，肺部应崩溃。应用25厘米的水压后，空气会通过气管进入肺部，并且应该很容易观察到通货膨胀。一旦肺部完全扩张，通货膨胀压力可以降低到20厘米，以保持肺部充气而不过度扩张。

气管连合和切除胸腔后，肺部应保持充气。如果肺在动物准备或肺提取过程中被刺穿，则可能发生通货紧缩。对充气肺部段的组织学分析表明，使用传统液体膨胀固定的组织气道流明中很少有免疫细胞。

相比之下，炎症细胞被保存在通过血管灌注与空气膨胀固定的组织空域内。在空气膨胀与大量固定后，肺组织可能嵌入正式组织分割和随后的分析通过组织学技术，包括染色，免疫造血术和免疫荧光成像。