这是唯一可用于研究透析通路相关手部缺血机制的动物模型。该模型提供了一个强大的平台来检查尿毒症与动脉静脉瘘手术引起的血流动力学变化引起的神经肌肉扰动之间的复杂相互作用。通路相关的手部功能障碍影响多达60%的血液透析患者,并可能严重影响患者的生活质量。
该模型有助于我们了解残疾并测试新疗法。演示该程序的将是来自我们实验室的博士后研究员Raymond Kim博士。首先,将麻醉小鼠仰卧放在由无菌窗帘覆盖的手术台上,并涂抹眼部润滑剂以保护眼睛在手术过程中不会干燥。
使用笔式修剪器,剃掉手术用的腹毛和术后灌注测量的腿毛,然后清除手术区域的毛发。接下来,用橡皮筋和大头钉固定上肢和下肢。通过监测脚趾夹反射来检查麻醉深度,并根据需要滴定麻醉。
在整个手术过程中,每三到五分钟进行一次呼吸模式评估,以校准麻醉水平。从胸骨边缘下缘到耻骨联合进行中线剖腹手术,并解剖耻骨脂肪垫以获得更宽的手术区域。打开腹膜切开术以进入腹膜内容物,并用盐水浸泡的无纺布海绵覆盖肠道。
接下来,仔细解剖血管周围筋膜和脂肪组织,从主动脉分叉近端约一厘米处,使用直 Dumont 镊子和小双头硬尖棉签延伸到左髂分叉的水平。然后将倾斜的镊子尖端穿过左髂总血管束下方,轻轻张开多次,以从下面的腹膜后肌肉组织调动血管。在孤立的左髂总动脉静脉束周围放置两条 4-0 丝线,并将它们用作血管束的结扎线。
然后用每条 4-0 的真丝领带打一个结,并依次、近端和远端涂抹。接下来,以4-0丝缝合线为手柄,顺时针旋转左髂动脉静脉血管束,并微调位置以暂时定位动脉前方的静脉。用直的Vannas弹簧剪刀进行约1毫米的纵向静脉切开术,并用0.9%盐水轻轻冲洗出静脉腔内的残留血液。
然后,将牵连的 10-0 尼龙缝合线穿过静脉的后壁。之后,抓住牵连的缝合末端并将它们置于温和的张力下,以将前壁从髂动脉后壁移位。接下来,使用弯曲的Vannas弹簧剪刀制作一个约1.0×0.3毫米的椭圆形切口,去除髂动脉和静脉的粘附壁。
用0.9%盐水和肝素化盐水轻轻冲洗暴露的动脉腔的残留血液。在形成动脉静脉瘘后,使用两到三条10-0尼龙缝合线以中断方式修复初始前壁静脉切开术。之后,将血管束恢复到其原始解剖方向,并将一小块盐水浸泡的可吸收明胶海绵放在修复的静脉切开术附近,以促进止血。
然后,从远端到近端依次松开 4-0 单结交叉夹结扎,同时密切监测静脉切开部位是否有出血过多。用小的双头硬尖棉签轻轻擦拭血管束,进一步促进血流的恢复。接下来,使用脉动性鲜红色含氧血液进入髂静脉并与从后肢返回的深静脉血混合的可视化来确认手术的技术成功。
将肝素化盐水注入下腔静脉进行全身抗凝治疗,以改善动脉静脉瘘的通畅性结局,注射肝素化盐水后重新检查手术部位是否有止血。如果没有出血问题,请以跑步方式关闭中线筋膜,然后用可吸收的5-0 PGA缝合线关闭皮肤切口。多普勒超声用于验证动脉静脉瘘的通畅性。
彩色多普勒显示瘘管部位的湍流,脉搏波多普勒评估显示脉搏光谱展宽。如果瘘管不通,则主动脉收缩期峰值和舒张末期速度升高,而下腔静脉则出现搏动,峰值速度升高。主动脉和下腔静脉的血管扩张在术前和术后连续测量中很明显。
手术后的B型和脉搏波多普勒超声测量显示,与假动物相比,流入和流出血管扩张以及收缩压峰值速度增加。激光多普勒后肢评估显示,术后左侧POD灌注缺失约为对侧肢体的20%,并随着时间的推移逐渐恢复。术后胫骨前肌灌注缺失约60%,恢复情况相似。
通过握力测试和跑步机步态模式分析量化后肢神经运动功能,这些分析在整个恢复期间依次进行。术后第四天的预期单侧握力约为对侧肢体的 50%,并逐渐恢复。每个显微手术步骤都应格外小心,以避免潜在的神经或血管创伤,这些创伤可能导致血流动力学和肢体病理发生重大变化。
在模型表征之后,能够探索大量研究动静脉瘘放置引起的神经肌肉功能障碍的生物学驱动因素。