Questo è l'unico modello animale disponibile per studiare i meccanismi responsabili dell'ischemia della mano correlata all'accesso alla dialisi. Il modello fornisce una solida piattaforma per esaminare la complessa interazione tra uremia e perturbazioni neuromuscolari che derivano dai cambiamenti emodinamici derivanti dalla chirurgia della fistola venosa arteriosa. La disfunzione della mano correlata all'accesso colpisce fino al 60% dei pazienti in emodialisi e può influire gravemente sulla qualità della vita dei pazienti.
Questo modello ci aiuta a comprendere la disabilità e testare nuove terapie. A dimostrare la procedura sarà il Dr.Raymond Kim, un ricercatore post-dottorato del nostro laboratorio. Per iniziare, posizionare il topo anestetizzato in posizione supina su un lettino chirurgico coperto da un drappeggio sterile e applicare il lubrificante oculare per proteggere gli occhi dall'asciugatura durante l'intervento chirurgico.
Utilizzando un trimmer a penna, radersi i peli addominali per l'operazione e i peli delle gambe per le misurazioni della perfusione postoperatoria, quindi eliminare i capelli dal campo chirurgico. Quindi, fissare gli arti superiori e inferiori con elastici e chiodi. Controllare la profondità dell'anestesia monitorando il riflesso del pizzico della punta e titolare l'anestesia secondo necessità.
Eseguire la valutazione del modello respiratorio ogni tre-cinque minuti durante la procedura chirurgica per calibrare il livello di anestesia. Fare una laparotomia della linea mediana dal bordo inferiore del margine sternale alla sinfisi pubica e sezionare il cuscinetto di grasso pubico per ottenere un campo operatorio più ampio. Aprire la celiotomia per accedere al contenuto peritoneale e coprire le viscere con una spugna salina imbevuta di tessuto non tessuto.
Successivamente, sezionare attentamente la fascia perivascolare e il tessuto adiposo da circa un centimetro prossimale alla biforcazione aortica, estendendosi fino al livello della biforcazione iliaca sinistra usando una pinza di Dumont dritta e piccoli tamponi di cotone a punta affilata a doppia estremità. Quindi passare la punta della pinza angolata sotto il fascio vascolare iliaco comune sinistro e distribuire delicatamente più volte per mobilizzare i vasi dalla muscolatura retroperitoneale sottostante. Posizionare due suture di seta 4-0 attorno al fascio venoso arterioso iliaco comune isolato e usarli come legature al fascio vascolare.
Quindi crea un singolo nodo con ogni cravatta di seta 4-0 e applicali in sequenza, in prossimità e poi distale. Successivamente, utilizzando le corde di sutura di seta 4-0 come maniglie, ruotare il fascio vascolare venoso iliaco sinistro in senso orario e regolare la posizione per localizzare temporaneamente la vena anteriore all'arteria. Fare una venotomia longitudinale di circa un millimetro con una forbice a molla Vannas dritta e lavare delicatamente il sangue residuo dal lume venoso con lo 0,9% di soluzione salina.
Quindi, posizionare una sutura di nylon 10-0 implicante attraverso la parete posteriore della vena. Successivamente, afferrare le estremità di sutura implicate e metterle sotto una leggera tensione per spostare la parete anteriore dalla parete posteriore dell'arteria iliaca. Quindi, eseguire un'incisione ellittica di una dimensione di circa 1,0 per 0,3 millimetri utilizzando forbici a molla Vannas curve, rimuovendo le pareti aderenti sia dell'arteria iliaca che della vena.
Lavare delicatamente il sangue residuo del lume arterioso esposto con soluzione salina allo 0,9% ed eparinizzato. Dopo la creazione della fistola venosa arteriosa, riparare la venotomia iniziale della parete anteriore utilizzando da due a tre suture di nylon 10-0 in modo interrotto. Successivamente, ripristinare il fascio vascolare al suo orientamento anatomico originale e posizionare un piccolo pezzo di spugna di gelatina assorbibile imbevuta di soluzione salina adiacente alla venotomia riparata per facilitare l'emostasi.
Quindi, allentare le legature del morsetto incrociato a nodo singolo 4-0 in sequenza da distale a prossimale, monitorando attentamente il sito di venotomia per un eccessivo sanguinamento. Strofinare delicatamente il fascio vascolare con piccoli tamponi di cotone a doppia estremità e affilati che facilitano ulteriormente il ripristino del flusso sanguigno. Successivamente, confermare il successo tecnico dell'operazione utilizzando la visualizzazione del sangue ossigenato rosso vivo pulsatile che entra nella vena iliaca e si mescola con il sangue venoso scuro che ritorna dall'arto posteriore.
Iniettare soluzione salina eparinizzata nella vena cava inferiore per l'anticoagulazione sistemica per migliorare gli esiti della pervietà della fistola venosa arteriosa e ispezionare nuovamente il sito chirurgico per l'emostasi dopo l'iniezione di soluzione salina eparinizzata. Se non ci sono problemi di sanguinamento, chiudere la fascia mediana e quindi l'incisione cutanea con suture PGA 5-0 assorbibili in modo corrente. L'ecografia Doppler è stata utilizzata per convalidare la pervietà della fistola venosa arteriosa.
Il Color Doppler ha rivelato un flusso turbolento nel sito della fistola e l'allargamento spettrale pulsatile è stato visualizzato sulla valutazione Doppler a onde pulsate. Se la fistola è pervio, l'aorta ha un picco elevato di velocità sistolica e diastolica finale, mentre la vena cava inferiore sviluppa pulsatilità con elevata velocità di picco. La dilatazione dei vasi sia nell'aorta che nella vena cava inferiore è evidente con misurazioni seriali pre e postoperatorie.
Le misurazioni ecografiche Doppler in modalità B e onde di impulso dopo l'intervento chirurgico hanno rivelato la dilatazione dei vasi in entrata e in uscita e un aumento della velocità sistolica di picco rispetto agli animali fittizi. La valutazione laser doppler degli arti posteriori ha mostrato che i deficit di perfusione POD sinistra sono pari a circa il 20% dell'arto controlaterale dopo l'intervento chirurgico, con recupero graduale nel tempo. Il deficit di perfusione del muscolo tibiale anteriore è stato di circa il 60% dopo l'intervento chirurgico, con un recupero simile.
La funzione neuromotoria degli arti posteriori è stata quantificata tramite test di forza di presa e analisi del modello di andatura del tapis roulant, che sono stati eseguiti in sequenza durante il periodo di recupero. La forza di presa unilaterale prevista è di circa il 50% dell'arto controlaterale nel quarto giorno postoperatorio con recupero graduale. Ogni fase della microchirurgia deve essere eseguita con particolare attenzione per evitare potenziali traumi nervosi o vascolari che possono causare cambiamenti sostanziali sia nell'emodinamica che nella patologia degli arti.
Dopo la caratterizzazione del modello, è stato possibile esplorare una moltitudine di studi che esaminano i driver biologici della disfunzione neuromuscolare derivante dal posizionamento della fistola artero-venosa.
