C’est le seul modèle animal disponible pour étudier les mécanismes responsables de l’ischémie des mains liée à l’accès à la dialyse. Le modèle fournit une plate-forme robuste pour examiner l’interaction complexe entre l’urémie et les perturbations neuromusculaires qui résultent des changements hémodynamiques résultant de la chirurgie de la fistule veineuse artérielle. Le dysfonctionnement de la main lié à l’accès affecte jusqu’à 60% des patients hémodialysés et peut avoir un impact sévère sur la qualité de vie des patients.
Ce modèle nous aide à comprendre le handicap et à tester de nouvelles thérapies. La démonstration de la procédure sera assurée par le Dr Raymond Kim, chercheur postdoctoral de notre laboratoire. Pour commencer, placez la souris anesthésiée en décubitus dorsal sur une table d’opération recouverte d’un champ stérile et appliquez le lubrifiant oculaire pour protéger les yeux du dessèchement pendant la chirurgie.
À l’aide d’une tondeuse à stylo, rasez les poils abdominaux pour l’opération et les poils des jambes pour les mesures de perfusion postopératoire, puis nettoyez les cheveux du champ chirurgical. Ensuite, fixez les membres supérieurs et inférieurs avec des élastiques et des pinces. Vérifiez la profondeur de l’anesthésie en surveillant le réflexe de pincement des orteils et titrez l’anesthésie au besoin.
Effectuez l’évaluation du schéma respiratoire toutes les trois à cinq minutes tout au long de l’intervention chirurgicale pour calibrer le niveau d’anesthésie. Faites une laparotomie médiane du bord inférieur de la marge sternale à la symphyse pubienne, et disséquez le coussinet adipeux du pubis pour obtenir un champ opératoire plus large. Ouvrez la céliotomie pour accéder au contenu péritonéal et couvrez les intestins d’une éponge imbibée de solution saline imbibée de non-tissés.
Ensuite, disséquez soigneusement le fascia périvasculaire et le tissu adipeux d’environ un centimètre proximal à la bifurcation aortique, en s’étendant jusqu’au niveau de la bifurcation iliaque gauche à l’aide de pinces Dumont droites et de petits cotons-tiges durs à double extrémité pointus. Ensuite, passez la pointe de la pince inclinée sous le faisceau vasculaire iliaque commun gauche et écartez-le doucement plusieurs fois pour mobiliser les vaisseaux de la musculature rétropéritonéale sous-jacente. Placez deux sutures de soie 4-0 autour du faisceau veineux iliaque commun isolé et utilisez-les comme ligatures du faisceau vasculaire.
Ensuite, créez un seul nœud avec chaque cravate en soie 4-0 et appliquez-les séquentiellement, proximalement, puis distalement. Ensuite, en utilisant les cordes de suture en soie 4-0 comme poignées, faites pivoter le faisceau vasculaire veineux artériel iliaque gauche dans le sens des aiguilles d’une montre et affinez la position pour localiser temporairement la veine antérieure à l’artère. Faites une veinotomie longitudinale d’environ un millimètre avec un ciseau à ressort Vannas droit et rincez doucement le sang résiduel de la lumière veineuse avec une solution saline à 0,9%.
Ensuite, placez une suture en nylon 10-0 impliquant à travers la paroi postérieure de la veine. Ensuite, saisissez les extrémités de suture impliquées et placez-les sous une légère tension pour déplacer la paroi antérieure de la paroi postérieure de l’artère iliaque. Ensuite, faites une incision elliptique d’une taille d’environ 1,0 par 0,3 millimètre à l’aide de ciseaux à ressort Vannas incurvés, en enlevant les parois adhérentes de l’artère iliaque et de la veine.
Rincer doucement le sang résiduel de la lumière artérielle exposée avec une solution saline à 0,9% et une solution saline héparinisée. Après la création de la fistule veineuse artérielle, réparer la veinotomie initiale de la paroi antérieure en utilisant deux à trois sutures en nylon 10-0 de manière interrompue. Ensuite, restaurez le faisceau vasculaire à son orientation anatomique d’origine et placez un petit morceau d’éponge de gélatine absorbable imbibée de solution saline à côté de la veinotomie réparée pour faciliter l’hémostase.
Ensuite, desserrez les ligatures de serrage croisée à un nœud unique 4-0 séquentiellement de distale à proximale, tout en surveillant de près le site de veinotomie pour détecter les saignements excessifs. Frottez doucement le faisceau vasculaire avec de petits cotons-tiges durs à double extrémité et pointus qui facilitent davantage le rétablissement du flux sanguin. Ensuite, confirmez le succès technique de l’opération en visualisant le sang oxygéné rouge vif pulsatile entrant dans la veine iliaque et se mélangeant au sang veineux foncé revenant du membre postérieur.
Injecter une solution saline héparinée dans la veine cave inférieure pour l’anticoagulation systémique afin d’améliorer les résultats de la perméabilité de la fistule veineuse artérielle, et réinspecter le site chirurgical pour l’hémostase après l’injection de solution saline héparinisée. S’il n’y a pas de problèmes de saignement, fermez le fascia médian, puis l’incision cutanée avec des sutures résorbables 5-0 PGA en courant. L’échographie Doppler a été utilisée pour valider la perméabilité de la fistule veineuse artérielle.
Le Doppler couleur a révélé un écoulement turbulent sur le site de la fistule, et l’élargissement spectral pulsatile a été visualisé lors de l’évaluation Doppler par onde de pouls. Si la fistule est patente, l’aorte a une vitesse systolique maximale et diastolique élevée, tandis que la veine cave inférieure développe une pulsatilité avec une vitesse maximale élevée. La dilatation des vaisseaux dans l’aorte et la veine cave inférieure est apparente avec des mesures pré et postopératoires en série.
Les mesures échographiques Doppler en mode B et en onde de pouls après chirurgie ont révélé une dilatation des vaisseaux entrants et sortants et une augmentation de la vitesse systolique maximale par rapport aux animaux fictifs. L’évaluation Doppler au laser des membres postérieurs a montré que les déficits de perfusion POD gauche représentaient environ 20% du membre controlatéral après la chirurgie, avec une récupération progressive au fil du temps. Le déficit de perfusion du muscle tibial antérieur était d’environ 60% après la chirurgie, avec une récupération similaire.
La fonction neuromotrice des membres postérieurs a été quantifiée par des tests de force de préhension et une analyse du modèle de marche sur tapis roulant, qui ont été effectués séquentiellement tout au long de la période de récupération. La force de préhension unilatérale attendue est d’environ 50% du membre controlatéral au quatrième jour postopératoire avec une récupération progressive. Chaque étape de microchirurgie doit être effectuée avec un soin particulier pour éviter les traumatismes nerveux ou vasculaires potentiels qui peuvent entraîner des changements substantiels dans l’hémodynamique et la pathologie des membres.
Après la caractérisation du modèle, une multitude d’études examinant les facteurs biologiques de la dysfonction neuromusculaire résultant de la pose de fistules artérioveineuses ont pu être explorées.
