Dies ist das einzige Tiermodell, das zur Verfügung steht, um die Mechanismen zu untersuchen, die für die dialysezugangsbedingte Handischämie verantwortlich sind. Das Modell bietet eine robuste Plattform, um das komplexe Zusammenspiel zwischen Urämie und neuromuskulären Störungen zu untersuchen, die sich aus hämodynamischen Veränderungen infolge einer arteriellen Venenfisteloperation ergeben. Zugangsbedingte Handfunktionsstörungen betreffen bis zu 60 % der Hämodialysepatienten und können die Lebensqualität der Patienten stark beeinträchtigen.
Dieses Modell hilft uns, die Behinderung zu verstehen und neue Therapien zu testen. Das Verfahren wird von Dr. Raymond Kim, einem Postdoktoranden aus unserem Labor, demonstriert. Legen Sie zunächst die betäubte Maus in Rückenlage auf einen Operationstisch, der mit einem sterilen Tuch bedeckt ist, und tragen Sie das Augengleitmittel auf, um die Augen während der Operation vor dem Austrocknen zu schützen.
Rasieren Sie mit einem Stifttrimmer die Bauchhaare für die Operation und die Beinhaare für die postoperativen Perfusionsmessungen und entfernen Sie die Haare dann vom Operationsfeld. Als nächstes fixieren Sie die oberen und unteren Extremitäten mit Gummibändern und Reißzwecken. Überprüfen Sie die Tiefe der Anästhesie, indem Sie den Zehenquetschreflex überwachen und die Anästhesie bei Bedarf titrieren.
Führen Sie die Bewertung des Atemmusters während des gesamten chirurgischen Eingriffs alle drei bis fünf Minuten durch, um den Anästhesiegrad zu kalibrieren. Führen Sie eine Laparotomie in der Mittellinie vom unteren Rand des Brustbeinrandes bis zur Schambeinfuge durch und präparieren Sie das Schambeinpolster, um ein breiteres Operationsfeld zu erhalten. Öffnen Sie die Zöliotomie, um an den Peritonealinhalt zu gelangen, und decken Sie den Darm mit einem mit Kochsalzlösung getränkten Schwamm ab.
Als nächstes präparieren Sie vorsichtig die perivaskulären Faszien und das Fettgewebe von etwa einem Zentimeter proximal zur Aortenbifurkation und erstrecken sich bis zur Höhe der linken Beckengabelung mit einer geraden Dumont-Pinzette und kleinen doppelseitigen, harten, scharfspitzen Wattestäbchen. Führen Sie dann die Spitze der abgewinkelten Zange unter das linke Beckenleitbündel und spreizen Sie sie sanft mehrmals, um die Gefäße aus der darunter liegenden retroperitonealen Muskulatur zu mobilisieren. Legen Sie zwei 4-0-Seidennähte um das isolierte linke Venenbündel des Arterio communis communis und verwenden Sie sie als Ligaturen zum Leitbündel.
Bilden Sie dann mit jeder 4-0-Seidenkrawatte einen einzelnen Knoten und wenden Sie sie nacheinander, proximal und dann distal an. Drehen Sie als Nächstes mit den 4-0-Seidennahtschnüren als Griffe das venöse Leitbündel der linken Beckenarterie im Uhrzeigersinn und stimmen Sie die Position fein ab, um die Vene vorübergehend vor der Arterie zu lokalisieren. Führen Sie mit einer geraden Vannas-Federschere eine Längsvenotomie von etwa einem Millimeter durch und spülen Sie das Restblut vorsichtig mit 0,9%iger Kochsalzlösung aus dem venösen Lumen aus.
Platzieren Sie dann eine implizite 10-0-Nylonnaht durch die hintere Wand der Vene. Fassen Sie anschließend die betroffenen Nahtenden und setzen Sie sie unter sanfte Spannung, um die Vorderwand von der Hinterwand der Arteria iliaca zu verschieben. Machen Sie als Nächstes einen elliptischen Schnitt von einer Größe von etwa 1,0 x 0,3 Millimetern mit einer gebogenen Vannas-Federschere, wobei die adhärenten Wände sowohl der Beckenarterie als auch der Vene entfernt werden.
Spülen Sie das Restblut des freiliegenden arteriellen Lumens vorsichtig mit 0,9 % Kochsalzlösung und heparinisierter Kochsalzlösung aus. Nach dem Anlegen der arteriellen Venenfistel wird die initiale Vorderwandvenotomie mit zwei bis drei 10-0-Nylonnähten unterbrochen repariert. Stellen Sie anschließend die ursprüngliche anatomische Ausrichtung des Leitbündels wieder her und legen Sie ein kleines Stück mit Kochsalzlösung getränkter, resorbierbarer Gelatineschwamm neben die reparierte Giftomie, um die Hämostase zu erleichtern.
Lösen Sie dann die 4-0-Ligaturen der Kreuzklemme mit einem Knoten nacheinander von distal nach proximal, während Sie die Venotomiestelle genau auf übermäßige Blutungen überwachen. Reiben Sie das Leitbündel sanft mit kleinen doppelseitigen, harten, scharfen Wattestäbchen ein, die die Wiederherstellung der Durchblutung weiter erleichtern. Als nächstes bestätigen Sie den technischen Erfolg der Operation, indem Sie pulsierendes, hellrotes, sauerstoffreiches Blut visualisieren, das in die Beckenvene eintritt und sich mit dunklem venösem Blut vermischt, das aus der Hintergliedmaße zurückkehrt.
Injizieren Sie heparinisierte Kochsalzlösung in die untere Hohlvene zur systemischen Antikoagulation, um die Ergebnisse der Durchgängigkeit der arteriellen venösen Fistel zu verbessern, und untersuchen Sie die Operationsstelle nach der Injektion von heparinisierter Kochsalzlösung erneut auf Hämostase. Wenn es keine Blutungsprobleme gibt, schließen Sie die Mittellinienfaszie und dann den Hautschnitt mit resorbierbaren 5-0 PGA-Nähten in laufender Manier. Mittels Doppler-Ultraschall wurde die Durchgängigkeit der arteriellen Venenfistel validiert.
Farbdoppler zeigte eine turbulente Strömung an der Stelle der Fistel, und die pulsatile spektrale Verbreiterung wurde bei der Beurteilung des Pulswellen-Dopplers visualisiert. Wenn die Fistel offen ist, hat die Aorta eine erhöhte systolische Spitzen- und Enddiastolengeschwindigkeit, während die untere Hohlvene eine Pulsatilität mit erhöhter Spitzengeschwindigkeit entwickelt. Die Gefäßerweiterung sowohl in der Aorta als auch in der Vena cava inferior ist bei seriellen prä- und postoperativen Messungen ersichtlich.
Die B-Mode- und Pulswellen-Doppler-Ultraschallmessungen nach der Operation zeigten eine Erweiterung der Ein- und Ausflussgefäße und eine Erhöhung der systolischen Spitzengeschwindigkeit im Vergleich zu den Scheintieren. Die Laser-Doppler-Beurteilung der Hintergliedmaßen zeigte, dass die Perfusionsdefizite der linken POD nach der Operation etwa 20 % der kontralateralen Gliedmaßen betrugen und sich im Laufe der Zeit allmählich erholten. Das Perfusionsdefizit des vorderen Musculus tibialis betrug ca. 60% nach der Operation, mit ähnlicher Genesung.
Die neuromotorische Funktion der Hintergliedmaßen wurde durch Griffkrafttests und die Analyse von Laufbandgangmustern quantifiziert, die während der gesamten Erholungsphase sequenziell durchgeführt wurden. Die erwartete einseitige Griffkraft beträgt ca. 50 % der kontralateralen Extremität am vierten postoperativen Tag mit allmählicher Erholung. Jeder mikrochirurgische Schritt sollte mit besonderer Sorgfalt durchgeführt werden, um ein potenzielles Nerven- oder Gefäßtrauma zu vermeiden, das erhebliche Veränderungen sowohl in der Hämodynamik als auch in der Pathologie der Gliedmaßen verursachen kann.
Nach der Modellcharakterisierung konnte eine Vielzahl von Studien untersucht werden, die die biologischen Treiber der neuromuskulären Dysfunktion infolge der arteriovenösen Fistelplatzierung untersuchten.
